公开课网19 第八章 配子与胚胎生物工程8.8.ppt

19 第八章 配子与胚胎生物工程8.8.ppt

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(二)、细胞核移植的方法1、核供体细胞的准备胚胎细胞、体细胞、ES细胞1)、胚胎细胞作为核供体先用1%的链酶蛋白酶或pH2.5的台氏液去掉透明带,再用机械吹打或酶消化发使其分散为单个游离的卵裂球
2)、体细胞作为核供体经0.25%胰蛋白酶+0.1%EDTA消化后,将细胞接种培养于DMEM。之后放入5%CO2培养箱中培养,待细胞长至70%~80%时进行传代。传代3~8代的细胞用于核移植。3
2、受体卵母细胞的准备大量实验表明,MII期卵母细胞适用于所有的供体核,目前基本上都采用去核的MII期卵母细胞作为受体胞质。受体卵母细胞在核移植前需要进行去核。目前常用的去核方法有如下几种:

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