页数：21页文件大小：25.39 MB来源： 园林植物病虫害防治ppt课件
本课件为综合实训部分，按调查统计、标本采集与制作、病原菌分离培养与人工接种、防治试验设计与药效统计的顺序安排实训项目，强化病虫害防治的综合动手能力。
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第八章园林植物病虫害防治综合实训一园林植物病虫害的调查与统计
一、实训目的掌握常见园林植物病虫害的调查方法，为正确防治病虫害奠定基础。
二、实训材料及用具调查记录册、记录笔等。
三、实训内容与方法病虫害的调查可分为一般调查、重点调查和调查研究三种。
调查内容可参考下表（见表8-1），表中的
表8-1植物病虫害发生调查表调查人：调查地点:调查时间:年月日发病地块植物名称和生育期病虫害名称10987654321
对发病率、损失程度的计算要求比较准确（见表8-2）。在对病虫害的发生、分布、防治情况进行重点调查后，有时还要针对其中的某一问题进行调查研究，调查研究一定要深入，以进一步提高对病虫害的认识。表8-2植物病（虫）害调查表调查人：调查时间:年月日调查地点：病（虫）害名称：发病（被害）率：田间分布情况：寄主植物：品种:种子来源：土壤性质：肥沃程度：含水量：栽培特点：施肥情况：
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灌、排水情况：病虫发生前温度和降雨：病虫害盛发期温度和降雨：防治方法：防治效果：群众经验：其他病虫害：
（1）植物病害调查结果统计①发病率按照植株或器官是否发病进行统计，以调查发病田块、植株、器官占所有调查数量的百分比。不能表示病害发生的严重程度，只适用于植株或器官受害程度大致相仿的病害，如系统感染的病毒病、全株发病的猝倒病、枯萎病、线虫病害等。如某种园林植物病毒病，调查200株，发病株为15株，发病率为15/200×100=
因此，仅用发病率来表示植物的发病程度并不能够完全反映植物的受害轻重。将植物的发病程度进行分级后再进行统计计算，可以兼顾病害的普遍率和严重程度，能更准确地表示出植物的受害程度。病情指数的计算，首先根据病害发生的轻重，进行分级计数调查，然后根据数字按下列公式计算。∑[各级病株（叶、果等）数×相应级数代表值]病情指数=——————————————————————×100调查总株（叶、果等）数×最高级代表值现以木芙蓉白粉病为例，说明病情指数的计算方法。调查木芙蓉白粉病的病情指数，其分级标准如下：表8-3木芙蓉白粉病病叶分级标准代表值分级标准等级012345无病斑；病斑面积占整个叶面积的5%以下；病斑面积占整个叶面积的6%―10%；病斑面积占整个叶面积的11%―25%；病斑面积占整个叶面积的26%―50%；病斑面积占整个叶面积的50%以上。
123456如调查木芙蓉白粉病叶片200片，其中1级25片、2级75片、3级50片、4级40片、5级10片。则:
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25×0+75×1+50×2+40×3+10×4病情指数=————————————————×100 =3
如调查蛴螬蛀食幼苗的蛀苗率（被害率），调查500株幼苗，其中被蛀苗25株，蛀苗率（被害率）为25/500×100＝5%。②被害指数∑[各级虫株（叶、果等）数×相应级数代表值]被害指数=——————————————————————×100调查总株（叶、果等）数×最高级代表值许多害虫对植物的为害只造成植株产量的部分损失，植株之间的受害轻重程度并不相同，用被害率不能完全说明受害的实际情况，可采用与病害相似的方法，将害虫为害情况按植株受害轻重进行分级，再用被害指数可以较好地解决这个问题。现以蚜虫为例，说明被害指数的计算方法。蚜虫为害分级标准如下:表8-4蚜虫为害分级标准代表值分级标准等级01234无蚜虫，全部叶片正常有蚜虫，全部叶片无蚜害异常现象有蚜虫，受害最重叶片出现皱缩不展有蚜虫，受害最重叶片皱缩半卷，超过半圆形有蚜虫，受害最重叶片皱缩全卷，呈圆形12345如调查蚜虫为害植株100株，0级53株，1级26株，2级18株，3级3株。
则被害指数为:53×0+26×1+18×2+3×3被害指数=————————————×100 =2
四、实训步骤
2调查记载采用顺行调查方法进行调查，即从地块的一端开始调查，到达另一端
图8-1捕虫网种类
注意近地边的点距地边不得少于2m。③调查结果统计按病害的分级标准进行调查，统计每级的数量，用病情指数表示发病严重度。2调查害虫发生情况。①地块的选择选择不同品种、地势、土质、耕作制度、水肥管理的地块，进行对比调查。②取样和结果统计对害虫可采用“Z”字法10点取样，每个样方为1m行长，调查每株内层叶至外层叶的各龄幼虫数，统计每株虫量。
五、实训作业
一、实训目的学习采集、制作和保存昆虫标本的方法，并通过标本采集和鉴定，熟悉当地昆虫种类及形态特征。二、实训用具及材料剪刀、小刀、镊子、放大镜、挑针、标本瓶、大烧杯、福尔马林、酒精、捕虫网、吸虫管、毒瓶、纸袋、采集箱、诱虫灯等。
三、实训内容与方法
（一）昆虫标本的采集
为取虫时方便，网袋可在底端开口；水网用来捕捉水生昆虫。网框的大小和形状不
图8-4指形管图8-5采集盒图8-6三角纸袋的折叠方法图8-7空网的使用限，以适用为准。网袋要求透水性好，常用铜纱尼龙等制成（图8-1）。2吸虫管用于采集蚜虫、蓟马、红蜘蛛等微小昆虫。主要利用吸气时形成的气流将虫体带入容器（图8-2）。3毒瓶和毒管专用于毒杀昆虫。一般有严密封盖的磨口广口瓶或指形管制成。瓶(管)内最下层放毒剂氰化钾（KCN）或氰化钠（NaCN），压实；上平铺一层细木屑，压实，这两层各约5－10cm；最上层是一薄层熟石膏粉，压平实后，用滴管均匀地滴入水，使之结成硬块即可。注意熟石膏粉应铺均匀，并尽量压紧实，以免使用时碎裂，影响使用寿命（图8-3）。有时也可制备简易毒瓶，在密封的广口瓶底放一些棉花，滴几滴三氯甲烷（氯仿）或敌敌畏即成。
毒瓶应根据需要准备大小不同的几个。蝶、蛾等鳞翅目成虫应单独使用一个毒瓶，以免将鳞粉脏污或损坏；小虫可用小号毒瓶分装；软体动物一般不用毒瓶进行毒杀。毒瓶要注意清洁，防潮，瓶内可放一层滤纸，经常更换，平时应塞紧瓶塞，以免剧毒气体对人身造成伤害，并可增加毒瓶的使用期限。毒瓶破裂时要注意妥善处理瓶内的毒物。4指形管用于暂时存放虫体较小的昆虫。管底一般是平的，形状如手指（图8-4），大小规格很多，管口直径一般在10～20mm，管长50～100mm。5采集箱和采集袋防压的标本和需要及时针插的标本，及三角纸包装的标本，可放在木制的采集箱内。外出采集的玻璃用具（如指形管、毒瓶等）和工具（如剪刀、镊子、放大镜、橡皮筋等）、记录本、采集箱等可放于一个有不同规格的分格的采集袋内。
其大小可自行设计。6采集盒通常用于暂时存放活虫。用铁皮制成，盖上有一块透气的铜纱和一个带活盖的孔，大小不同可做成一套，依次套起来，携带方便（图8-5）。7诱虫灯专门用于采集夜间活动的昆虫。可在市场上购买成品，或自行设计制作。诱虫灯下可设一漏斗并连一毒瓶，以便及时毒杀诱来的昆虫。为保证安全，毒瓶内可用敌敌畏做为毒剂。也可在漏斗下安装纱笼得到活虫，饲养后可得生活史标本。8三角纸袋常用来暂时存放蝶、蛾类昆虫的标本。一般用坚韧的光面纸，裁成长宽比为3:2的方形纸片，大小可多备几种，常用的大小有三种：
图8-8扫网及使用方法140mm×140mm、10mm×10mm、7mm×7mm，采集时可根据蝶、蛾的大小选择合适的纸袋（图8-6）。
如果捕到的是蝶、蛾类昆虫，应在网外捏压蝶、蛾的胸骨使其骨折，待其失去活动能力后放入毒瓶，以免蝶、蛾与瓶壁相撞损坏和脏污鳞粉；如捕获的是一些中、小型昆虫，且数量很多，可抖动网袋，使昆虫集中于网底，连网放入大口毒瓶内，待昆虫毒死后再取出分装。栖息于草丛中的昆虫应用扫网进行捕捉。采集者应边走边扫，若在扫网底部开口外连一个塑料管，可使虫体直接集中于管底，可减少取虫的麻烦，提高效率(图8-8)。2诱集诱集是利用昆虫的趋性和生活习性设计的招引方法，常用的有灯光诱集和食物诱集等。灯光诱集常用于蛾类、金龟子、蝼蛄等有趋光性的昆虫。
黑光灯的诱集效果最好，诱集的昆虫种类较多，也可用普通白炽灯。在闷热、无风、无月的夜晚，诱集效果最好。食物诱集是利用昆虫的趋化性，嗅到食物的气味而飞来取食，夜蛾类、蝇类昆虫常用此类方法；很多蝶类昆虫喜欢吸食花蜜及腐烂发酵的水果，因此可在岩石或树干上涂蜂蜜或在地上布置腐烂瓜果进行引诱；夜蛾类诱剂的配方可参考园艺植物害虫防治部分。也可利用昆虫的生活习性设置诱集场所。如利用杨树枝把可诱集棉铃虫、粘虫、豆天蛾、斜纹夜蛾等鳞翅目成虫；堆草诱集地老虎幼虫，果树上缚草诱集越冬害虫等。3振落有许多昆虫，因其常隐蔽于枝丛内，或由于体形、体色与植物相似具有“拟态”，不易发现，此时应轻轻振动树干，昆虫受惊后起飞，有假死性的昆虫则会坠落或叶丝下垂而暴露目标，再行捕捉。
4搜索和观察许多昆虫营隐蔽生活，如蝼蛄、金针虫和地老虎的幼虫在土壤中生活；天牛、吉丁虫、茎蜂和螟蛾的幼虫在植物的茎干中钻蛀生活，卷叶蛾的幼虫在卷叶团中生活，蓑蛾的幼虫则躲避在由枝叶织造的长口袋中，沬蝉会分泌白色泡沫，还有很多昆虫在避风向阳的石块下、土缝中、叶片背面化蛹或越冬，在这些场所仔细搜索、观察就会采集到很多种类的昆虫。根据害虫的为害状也可以寻找到昆虫，如植物形成虫瘿、叶片发黄、植物叶片上形成白点等，就可能找到蚜虫、木虱、蓟马、叶螨等刺吸式口器的害虫；在叶片上发现白色弯曲虫道或在植株和枝干下找到新鲜虫粪，可能找到潜叶蝇、鳞翅目和叶蜂等咀嚼式口器的害虫。
但在不同地区气候条件有所差别，同种昆虫的发生期也不尽相同。应掌握在各地区昆虫的大量发生期适时采集。如天幕毛虫的幼虫，应在每年的4～6月进行采集；而蛹在6月份就应大量采集，并及时处理后保存；若要得到
图8-9昆虫针图8-10展翅板图8-11还软器成虫，可将蛹采集后置于养虫笼内，待成虫羽化后及时毒杀并制成标本；由于天幕毛虫１年1代，
如铜绿丽金龟在闷热的晴天晚间大量活动，而黑绒金龟则在温暖无风的晴天下午大量出土，并聚集在绿色植物上，极易捕捉。采集环境有时也很重要，经常翻耕的田块地下害虫数量少，而果园、荒地虫量相对大，昆虫种类也相对丰富。
此外，昆虫的各个虫态及为害状都要采到，这样才能对昆虫的形态特征和为害情况在整体上进行认识，特别是制作昆虫的生活史标本，不能缺少任何一个虫态或为害状，同时还应采集一定的数量，以便保证昆虫标本后期制作的质量和数量。在采集昆虫时还应作简单的记载，如寄主植物的种类、被害状、采集时间、采集地点等，必要时可编号，以保证制作标本时标签内容的准确和完整。（二）昆虫标本的制作昆虫标本在采集后，不可长时间随意搁置，以免丢失或损坏，应用适当的方法加以处理，制成各种不同的标本，以便长期观察和研究。
昆虫针一般用不锈钢制成，型号共七种：00，0，1，2，3，4，5。0至5号针的长度为3
用硬泡沫塑料板制成的展翅板造价低廉，制作方便。展翅板一般长为33cm，宽8～16cm，厚4cm，在展翅板的中央可挖一条纵向的凹槽，也可用烧热的粗铁丝烫出凹槽，凹槽的宽深各为5～15mm（图8-10）。3还软器是对于已干燥的标本进行软化的玻璃器皿（图8-11）。一般使用干燥器改装而成。使用时在干燥器底部铺一层湿沙，加少量苯酚以防止霉变。在瓷隔板上放置要还软的标本，加盖密封，一般用凡士林做为密封剂。几天后干燥的标本即可还软。此时可取出整姿、展翅。切勿将标本直接放在湿砂上，以免标本被苯酚腐蚀。
图8-12三级台图8-13昆虫的针插部位图8-14展翅方法4三级台由整块木板制成，长
此外，大头针、粘虫胶（用95%酒精溶解虫胶制成）或乳白胶等也是制作昆虫标本必不可少的用具。
对于体型较大的夜蛾类成虫，一般选用3号针，天蛾类成虫，多用4或5号针；体型较小的蝽、叶蝉、小型蝶、蛾类则用1或2号针。一般插针位置在虫体上是相对固定的。蝶、蛾、蜂、蜻蜓、蝉、叶蝉等从中胸背面正中央插入，穿透中足中央；蚊、蝇从中胸中央偏右的位置插针；蝗虫、蟋蟀、蝼蛄的虫针插在前胸背板偏右的位置；甲虫类虫针插在右鞘翅的基部；蝽类插于中胸小盾片的中央（图8-13）。这种插针位置的规定，一方面是为插针的牢固，另一方面是为避免破坏虫体的鉴定特征。昆虫虫体在昆虫针上的高度是一定的，在制作时可将带虫的虫针倒置，放入三级台的第一级小孔，使虫体背部紧贴于台面上，其上部的留针位置即为8mm。
昆虫插制后还应进行整姿，前足向前，后足向后，中足向两侧；触角短的伸向前方，长的伸向背侧面，并使之对称、整齐、自然美观。整姿后要用大头针或纸条加以固定，待干燥定型后即可装盒保存。对跳甲、木虱、蓟马等体型微小的昆虫，选用0号或00号昆虫针，针从昆虫的腹面插入后，再将昆虫针插在软木片上，再按照一般昆虫的插法，将软木片插在2号虫针上。也可用虫胶将小昆虫粘在三角纸台的尖端，三角纸台的纸尖应粘在虫体的前足与中足之间，然后将三角纸台的底边插在昆虫针上。插制后三角纸台的尖端向左，虫体的前端向前。（2）展翅蝶、蛾和蜻蜓等昆虫，在插针后还需要展翅。将新鲜标本或还软的标本，选择号型合适的昆虫针，按三级台的特定高度插定，先整理蝶、蛾的6足，使其紧贴身体的腹面，不要伸展或折断；其次触角向前、腹部平直向后，然后转移至大小合适的展翅板上，虫体的背面应与两侧面的展翅板水平。
用2枚细昆虫针分别插于前翅前缘中部、第一条翅脉的后面，两手同时拉动一对前翅，使两翅的后缘在同一直线上，并与身体的纵轴成直角，暂时用昆虫针将前翅插在展翅板上固定。再取2枚细昆虫针拨后翅向前，将后翅的前缘压到前翅下面，臀区充分张开，左右对称，充分展平。然后用玻璃纸条压住，以大头针沿前后翅的边缘进行固定，插针时大头针应略向外倾斜。标本插针后应将四翅上的昆虫针拔去，大头针也不可插在翅面上，否则标本干燥后会留下针孔，破坏标本的完整和美观。大型蝶、蛾类等腹部柔软的昆虫在干燥过程中腹部容易下垂，须用硬纸片或虫针支撑在腹部，触角等部位也应拨正，可用大头针插在旁边板上使姿态固定（图8-14）。
标本放置一星期左右，就已干燥、定型，可以取下安插标签。将标本从展翅板上取下时，动作应轻柔，以免将质地脆硬的标本损坏。每个昆虫标本必须有两个标签，一个标签要注明采集地点、时间、寄主种类，虫针插在标签的正中央，高度在三级台的第二级；另一个标签标明昆虫的拉丁文学名和中文名，插在第一级。昆虫标本制作过程中如有损坏，可用粘虫胶贴着修补。
活幼虫在浸泡前应饥饿1～2d，待其体内的食物残渣排净后用开水煮杀、表皮伸展后投入保存液内。注意绿色幼虫不宜煮杀，否则体色回迅速改变。常用的保存液配方如下：1酒精液常用浓度为75%。小型和体壁较软的虫体可先在低浓度酒精中浸泡后，再用75%酒精液保存以免虫体变硬。也可在75%酒精液中加入
2福尔马林液福尔马林（含甲醛40%）1份：水17～19份。保存昆虫标本效果较好，但会略使标本膨胀，并有刺激性的气味。3绿色幼虫标本保存液硫酸铜10g，溶于100ml水中，煮沸后停火，并立即投入绿色幼虫，刚投入时有褪色现象，待一段时间绿色恢复后可取出，用清水洗净，浸于5%福尔马林液中保存。或用95%酒精90ml，冰醋酸
4红色幼虫浸渍液用硼砂2g，50%酒精100ml混合后浸渍红色饥饿幼虫。或者用甘油20ml，冰醋酸4ml，福尔马林4ml，蒸馏水100ml，效果也很好。5黄色幼虫浸渍液用无水酒精6ml，氯仿3ml，冰醋酸1ml。先将黄色昆虫在此混合液中浸渍24h，然后移入70%酒精中保存。或用苦味酸饱和溶液75ml，福尔马林25ml，冰醋酸5ml混合液，从肛门注入饥饿幼虫的虫体，然后浸渍于冰醋酸、福尔马林、白糖混合液中。
图8-15昆虫生活史标本将前面用各种方法制成的标本，按照昆虫的发育顺序，即卵、幼虫（若虫）的各龄、蛹、成虫的雌虫和雄虫及成虫和幼虫（若虫）的为害状，安放在一个标本盒内，在标本盒的左下角放置标签即可（图8-15）。（三）昆虫标本的保存昆虫标本是认识昆虫防治害虫的参考资料，必须妥善保存。保存标本，主要的工作是防蛀、防鼠、避光、防尘、防潮和防霉。
标本在标本盒中应分类排列，如天蛾、粉蝶、叶甲等。鉴定过的标本应插好学名标签，在盒内的四角还要放置樟脑球以防虫蛀，樟脑球用大头针固定。然后将标本盒放入关闭严密的标本橱内，定期检查，发现蛀虫及时用敌敌畏进行熏杀。
将浸渍标本放入专用的标本橱内。（四）昆虫标本的寄递采集的昆虫标本，常需请人鉴定或互相交换，在不能亲自送达的情况下，就需通过邮局寄递。
3寄运箱上注明昆虫标本、防潮、轻放等字样，以便邮运人员给予细心照顾。四、实训作业采集、识别当地昆虫，并按教师指定要求制作一定数量的昆虫针插标本、浸渍标本和生活史标本，并写好主要标本的标签和详细采集记录。
三园林植物病害标本的采集、制作和保存一、实训目的学习采集、制作和保存植物病害标本的方法，并通过标本采集及鉴定，熟悉当地病害种类和症状特点。二、实训用具及材料标本夹、标本纸、采集箱、剪枝剪、小锯、放大镜、镊子、塑料袋、记录本、标签等。
三、实训内容与方法
采集较大或易损坏的组织如果实、木质根茎，或在田间来不及压制的标本时用。（4）其他剪枝剪、小刀、小锯及放大镜、纸袋、塑料袋、记录本和标签等。
另外，同一标本上的症状应是同一种病害的，当多种病害混合发生时，更应进行仔细选择。若有数码相机则更好，可以真实记载和准确反映病害的症状特点。每种标本采集的份数不能太少，一般叶斑病的标本最少采集十几份。另外还应注意到标本应完整，不要损坏，以保证鉴定的准确性和标本制作时的质量。2病征完全采集病害标本时，对于真菌和细菌性病害一定要采集有病征的标本，真菌病害则病部有子实体为好，以便做进一步鉴定；对子实体不很显著的发病叶片，可带回保湿，待其子实体长出后再行鉴定和标本制作。对真菌性病害的标本如白粉病，因其子实体分有性和无性两个阶段，应尽量在不同的适当时期分别采集，还有许多真菌的有性子实体常在地面的病残体上产生，采集时要注意观察。
3避免混杂采集时对容易混淆污染的标本（如黑粉病和锈病）要分别用纸夹（包）好，以免鉴定时发生差错；对于容易干燥卷缩的标本，如禾本科植物病害，应随采随压，或用湿布包好，防止变形；因发病而败坏的果实，可先用纸分别包好，然后放在标本箱中，以免损坏和沾污；其他不易损坏的标本如木质化的枝条、枝干等，可以暂时放在标本箱中，带回室内进行压制和整理。4采集记载所有病害标本都应有记载，没有记载的标本会使鉴定和制作工作的难度加大。标本记载内容应包括：寄主名称、标本编号、采集地点、生态环境（坡地、平地、砂土、壤土等）、采集日期（年月日）、采集人姓名、病害危害情况（轻、重）等。
标本应挂有标签，同一份标本在记录簿和标签上的编号必须相符，以便查对；标本必须有寄主名称，这是鉴定病害的前提，如果寄主不明，鉴定时困难就很大。对于不熟悉的寄主，最好能采到花、叶和果实，对鉴定会有很大帮助。
图8-16植物病害标本纸袋折叠方法（1）干燥标本的制作与保存干燥法制作标本简单而经济，标本还可以长期保存，应用最广。①标本压制对于含水量少的标本，如禾本科、豆科植物的病叶、茎标本，应随采随压，以保持标本的原形；含水量多的标本，如甘蓝、白菜、番茄等植物的叶片标本，应自然散失一些水分后，再进行压制；有些标本制作时可适当加工，如标本的茎或枝条过粗或叶片过多，应先将枝条劈去一半或去掉一部分叶再压，以防标本因受压不匀，或叶片重叠过多而变形。有些需全株采集的植物标本，一般是将标本的茎折成“N”字形后压制。压制标本时应附有临时标签，临时标签上只需记载寄主和编号即可。
②标本干燥为了避免病叶类标本变形，并使植物组织上的水分易被标本纸吸收，一般每层标本放一层（3～4张）标本纸，每个标本夹的总厚度以10cm为宜。标本夹好后，要用细绳将标本夹扎紧，放到干燥通风处，使其尽快干燥，避免发霉变质。同时要注意勤换标本纸，一般是前3～4d每天换纸2次，以后每2～3d换1次，直到标本完全干燥为止。在第1次换纸时，由于标本经过初步干燥，已变软而容易铺展，可以对标本进行整理。不准备做分离用的标本也可在烘箱或微波炉中迅速烘干。标本干燥愈快，就愈能保存原有色泽。干燥后的标本移动时应十分小心，以防破碎；对于果穗、枝干等粗大标本，可在通风处自然干燥即可，注意不要使其受挤压而变形。
③标本保存标本经选择整理和登记后，应连同采集记录一并放入胶版印刷纸袋、牛皮纸袋或玻面标本盒中，贴好标签，然后按寄主种类或病原类别分类存放。玻面标本盒保存除浸渍标本外，教学及示范用病害标本，用玻面标本盒保存比较方便。玻面标本盒的规格不一，一般比较适宜的大小是长×宽×高＝28cm×20cm×3cm，通常一个标本室内的标本盒应统一规格，美观且便于整理。在标本盒底一般铺一层胶版印刷纸，将标本和标签用乳白胶粘于胶版印刷纸上。在标本盒的侧面还应注明病害的种类和编号，以便于存放和查找。盒装标本一般按寄主种类进行排列较为适宜。蜡叶标本纸袋保存用胶版印刷纸折成纸袋，纸袋的规格可根据标本的大小决定。将标本和采集记录装在纸袋中，并把鉴定标签贴在纸袋的右上角（图8-16）。
袋装标本一般按分类系统排列，要有两套索引系统，一套是寄主索引，一套是病原索引，以便于标本的查找和资料的整理。标本室和标本柜要保持干燥以防生霉，同时还要注意清洁以防虫蛀。可用樟脑放于标本袋和盒中，并定期更换,定期排湿。（2）浸渍标本的制作与保存果实病害为保持原有色泽和症状特征，可制成浸渍标本进行保存。果实因其种类和成熟度不同，颜色差别很大。应根据果实的颜色选择浸渍液的种类。①保存绿色浸渍液保存植物组织绿色的方法很多，可根据不同的材料，选用适当的方法。醋酸铜浸渍液将醋酸铜结晶逐渐加到50%的醋酸溶液中至不再溶解为止（每1000ml约加15g），然后将原液加水3～4倍后使用。
溶液稀释浓度因标本
25g福尔马林15g硝酸亚钴水10g氯化锡10ml95%酒精10ml福尔马林水30～50ml亚硫酸饱和溶液的颜色深浅而不同，浅色的标本用较稀的稀释液，深色标本用较浓的稀释液。用醋酸浸渍液浸渍标本用冷处理方法比较好，具体做法是：将植物叶片或果实用2～3倍的稀释液冷浸3d以上，取出用清水洗净，保存于5%的福尔马林液中。醋酸铜浸渍液保存绿色的原理是铜离子与叶绿素中镁离子的置换作用，重复使用时需补加适量的醋酸铜。另外，用此法保存标本的颜色稍带蓝色，与植物的绿色略有不同。硫酸铜亚硫酸浸渍液先将标本洗净，在5%的硫酸铜浸渍液中浸6～24h，用清水漂洗3～4h，保存于亚硫酸液中。亚硫酸液的配法有两种：一种是用含5～6%的SO2的亚硫酸溶液45ml加水1000ml；另一种是将浓硫酸20ml，稀释于1000ml水中，然后加16g亚硫酸钠。
但此法要注意密封瓶口，并且每年更换一次浸渍液。②保存黄色和桔红色浸渍液含有叶黄素和胡萝卜素的果实，如梨、黄色苹果、杏、柿、柑桔及红色的辣椒等，用亚硫酸溶液保存比较适宜。方法是将含亚硫酸5～6%的水溶液稀释至含亚硫酸
如果防腐力不够，可加少量酒精，果实浸渍后如果发生崩裂，可加入少量甘油。③保存红色浸渍液红色多是由花青素形成的，因此水和酒精都能使红色褪去，较难保存。瓦查（Vacha）浸渍液可固定红色。2000ml将标本洗净，完全浸没于浸渍液中两周，取出保存于以下溶液中：1000ml④浸渍标本的保存制成的标本应存放于标本瓶中，贴好标签。因为浸渍液所用的药品多数具有挥发性或者容易氧化，标本瓶的瓶口应很好的封闭。封口的方法如下：临时封口法：用蜂蜡和松香各1份，分别熔化后混合，加少量凡士林油调成胶状，涂于瓶盖边缘，将瓶盖压紧封口；或用明胶4份在水中浸3～4h，滤去多余水分后加热熔化，加石蜡1份，继续熔化后即成为胶状物，趁热封闭瓶口。
永久封口法：将酪胶和熟石灰各1份混合，加水调成糊状物后即可封口。干燥后，因酪酸钙硬化而密封；也可将明胶28g在水中浸3～4h，滤去水分后加热熔化，再加重铬酸钾
四、实训作业采集、识别当地主要园林植物病害，并按教师指定要求分别制成蜡叶标本、浸渍标本和玻片标本，并详细写明采集记录。四园林植物病害诊断基本操作技术一、实训目的掌握培养基制作及灭菌技术和植物病原菌的分离培养的常用方法，为进一步鉴定和防治植物病害奠定基础。二、实训用具及材料仪器用具：灭菌室、超净工作台、接种箱、恒温箱、烘箱或红外线干燥箱、
图8-17斜面摆放方法紫外线灭菌灯、电炉、铝锅、天平、烧杯、量筒、培养皿、高压灭菌锅、试管、三角瓶、铁丝试管筐、试管架、漏斗、接种针、接种环、解剖刀、镊子、解剖剪、酒精灯、显微镜、载玻片、盖玻片、挑针、贮水滴瓶、手持喷雾器、纱布、棉花、玻璃铅笔等。实验材料：马铃薯、蔗糖（葡萄糖）、琼脂、牛肉膏、蛋白胨及供分离用的真菌或细菌病害标本。实验药品：福尔马林、高锰酸钾、肥皂、
三、内容和方法
（一）培养基配制一般兼性寄生物都可以在人工培养基上生长。可根据病原菌的需要，配制营养成份不同的培养基。最常用的固体培养基有：
配制方法是：1称量洗净去皮的马铃薯200g，称量葡萄糖20g、琼脂7～20g。2将马铃薯切成小块，加水1000毫升，煮沸约
适于真菌生长的pH值为偏酸性，可不调pH值。4分装于三角瓶或试管中，一般以瓶高的1/3较为合适，试管内的培养基做斜面的约装5ml，做平板的约装10ml，注意培养基不可沾污试管口和瓶口。5加棉塞，棉塞的1/3在外，2/3在内，拔出时有“嘭”的轻微爆破声，表明其大小合适。6将试管约每10支捆扎好，棉塞部分用牛皮纸包好，牛皮纸上用铅笔或玻璃铅笔注明培养基种类、配制日期、组别等。7摆斜面在灭菌后进行，将试管口搁置在一定高度的木条上，斜面的长度以不超过试管总长的1/2为宜。待培养基完全冷却后即成斜面（图8-17）。
适，故需调节pH值。在病原菌的分离培养中，平板培养基也经常使用，其制作方法是：将三角瓶或试管内的培养基熔化并冷却至45～50℃，取灭菌培养皿一个，在无菌条件下将培养基约10ml倒入培养皿内。将培养基倒入培养皿时，一般是先将三角瓶或试管的棉塞在酒精灯火焰附近拔下，用右手的手掌握住，切不可将棉塞放在接种箱或无菌室的台面上，以免沾染杂菌。左手拿起培养皿，用食指和拇指将培养皿盖掀开，用其余的手指托住培养皿底，将培养基倒入，在台面上按顺时针方向轻摇，使培养基均匀地分布在培养皿底部，待培养基完全凝固后备用。一般平板培养基应现用现做。
（二）灭菌
3接通电源，加热至冷空气完全排出后（蒸气从气门有力地冲出），关闭排气阀，当压力上升至所需指标，开始计时，并维持所需压力。4达到所需时间后，关闭电源，待压力指针下降至0，或将电源关闭后慢慢放气，待压力降至0时将盖打开。注意关闭电源后不可快速排气，以免锅内压力突然下降，使培养基冲出管口污染棉塞。5将培养基在25～30℃恒温箱内放置48h，无杂菌生长，即可使用。
（三）病原菌分离培养
但应工作人员注意不宜在紫外灯下操作，以免伤害身体；也可使用超净工作台，分离前可不必对其灭菌，使用较方便。无论哪种场所进行病菌的分离，在工作前都应将所需物品放好，以免临时取物带来杂菌；工作人员也要注意自身清洁，工作前用肥皂洗手，分离前还要用70%酒精擦拭双手；工作过程中，应尽量少说话，呼吸要轻。
2组织的表面消毒分离材料表面经常带有腐生菌等杂菌，在分离病原
图8-18接种环菌时，应当用适当的消毒剂清除表面的腐生菌，以便得到病原菌的纯培养。常用的表面消毒剂是
分离材料的组织表面常附有气泡，会使消毒剂不能与分离材料表面直接接触，影响消毒效果，简单而有效的方法是在用消毒液处理前，先将分离材料在70%的酒精中浸2～3s。经过升汞消毒的病组织，在移入斜面前，必须用无菌水洗去残留的消毒剂，否则会影响病菌的生长。一般是用无菌水洗3～4次，每次3min。无菌水与蒸馏水不同，其制法是将三角瓶或试管等盛蒸馏水，加水量与培养基量相同，之后加棉塞灭菌即可，灭菌法与培养基同。另外，用无菌水清洗后的材料移入培养基前，所有操作所用的镊子、接种环（图8-18）等物品，均应经酒精火焰灭菌。（3）分离方法①组织分离法这种方法应用最普遍，常用于叶、茎病斑组织内病菌的分离。取真菌性叶斑病的新鲜病叶，选择典型病斑，用剪刀剪取病健交界处的组织(边长4～5mm)数块；将病组织放入70%酒精中浸3～5s后，将病组织在
对于块茎、根、茎或果实等较大组织内的病菌，可先在其表面涂抹酒精进行火焰灭菌，再用灭菌刀将病健交界组织分割成小块，移入斜面中。若发病的组织较幼嫩，使用表面消毒剂时可能会杀死其中的病原菌，消毒时间应尽可能缩短，或者不用药剂消毒，而以无菌水冲洗8～9次后，按无菌操作法移入平板培养基上。②稀释分离法对细菌性病害，通常采用稀释分离法。方法是取灭菌培养皿3个，平放于湿毛巾上，用灭菌吸管移1ml无菌水注入每个培养皿中，注明编号、分离日期、分离材料和操作者；取分离材料（边长4～5mm），经升汞消毒和无菌水冲洗3次后，移入第一个培养皿中，静置10～15min，使细菌释放到水中制成菌悬液；然后用灭菌的移植环从第一个培养皿中移3环到第二个培养皿中，充分混合后再移3环到第三个培养皿中；将熔化的牛肉膏蛋白胨培养基冷却至45℃左右，分别倒入3个培养皿中，按顺时针方向晃动，使培养基与菌悬液混合均匀；待培养基凝固后，将培养皿翻转（将培养皿翻转的目的是避免冷凝水滴落在培养基上，造成污染），在25℃恒温箱内培养；培养3～5d后，观察菌落生长情况，将分离目的菌移入斜面培养，淘汰杂菌。
病原细菌也常用划线分离法。方法是预先将牛肉膏蛋白胨培养基倒入培养皿内，待凝固成平板后待用；与稀释分离法中第一个培养皿相同的方法获得菌悬液；用灭菌的接种环蘸取菌悬液在培养基平板表面划线，注意不要把培养基表面划破，划过第一批线后在酒精火焰上灭菌，冷却后接第一批线的末端向另一方向划线，再次灭菌后再划第三批线。其他步骤同稀释分离法。
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（四）病害的人工接种病害的人工接种，是人为地使病原物与寄主植物的感病部位接触，并给予适宜发病的条件，以诱发病害。在确定寄主范围、品种抗病性的测定、病原致病性变异、病害发生和流行条件以及药剂防治效果测定等工作时，常借助于人工接种才能得出可靠的结论。人工接种方法是根据病害的侵染方式和侵入途径设计的。在接种前，要根据试验内容的不同，按计划做好准备工作。如鉴定抗病性，除待鉴定的品种外，还要选择合适的对照品种；进行药效测定时，应选择较易感病的品种，还要准备足够数量的具有致病力的病原菌；此外，进行人工接种要有适宜发病的环境条件。
环境条件中主要是温度和湿度的保证，在室内可通过相应的设备进行调节，在田间接种主要应确保湿度条件。在对病害进行人工接种时，应详细记载接种日期、地点、方法、寄主和病原菌的详细信息。接种后要定期进行观察，详细记载发病情况和病害症状特点等（表8-5。表8-5植物病害人工接种记录卡接种接种地点：接种日期：方法：接种情况接种后的管理：抗病性：品种：寄主种类：寄主植物接种部位及生育期：生育期：病原形态：病原菌名称：病原物培养基种类及培养方法：培养温度及培养时期：严重度：潜育期：症状特点末期中期症状：早期对产量或品质的可能影响：
取盆栽桃树幼苗，每株灌1L菌悬液，在26～28℃下，约2～3周可发病。
四、作业
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处理4对照处理3处理2对照处理1处理4对照处理3处理2对照处理1
一、实训目的掌握园林植物病虫害防治试验设计的一般方法，掌握药效试验效果的调查方法和结果的统计分析，掌握防治方案设计的一般步骤和方法。
二、实训用具及材料常用药械、各类农药、调查用表、计算器等。
三、实训内容与方法
（一）园林植物防治试验的设计与效果检查
(2)试验地的管理措施要始终保持一致，并按计划记录试验情况、数据。(3)试验项目的每项处理需重复3次，重复次数越多越准确，这样可以消除因各种因素影响而造成的误差。此外，为求得各种新农药的绝对防治效果，并消除自然误差，还必须设置与自然条件相同的对照区。
较高大的树木也可以株数为单位。形状一般以长方形为好，可减少立地条件差异带来的影响。长宽比例可根据地形、株行距大小而定。(2)处理项目项目的多少，决定于试验的目的和需要。农药新品种的比较试验，因种类较多，处理项目自然就多些。而剂型、药量、浓度等比较试验的项目就少些。为了提高试验的准确性,处理项目不宜太多。比较试验又可分为单因子试验和多因子试验。单因子试验只比较一个因素，处理项目较少，小区面积可稍大。多因子试验是在一个因素的比较上再附加另一个因素的比较，如在农药品种的比较上再加浓度比较，这样，处理项目较多，小区面积可适当缩小。
(3)设置保护区和隔离区在试验区四周要设立保护区，可排除外界种种因素的干扰，以保证试验的准确性。为防止不同处理项目相互间的影响，小区之间应设隔离区。(4)小区排列小区药效试验的准确性与小区的排列有关。一般原则是：不同处理小区在试验地内应呈随机分布，以消除病虫分布不均和立地条件不同而引起的误差。常用的排列方法有：随机排列法和对比排列法。还有一种方法称拉丁方排列法，这种方法要求处理和重复的次数相同，但在同一横、竖行中不能有相同的处理。表8-6对比排列法表8-7随机排列法
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24对照31对照4231对照2143214对照3表8-8拉丁方排列法432对照11对照4323214对照24对照13对照1324大区试验设计在小区试验的基础上，选择少数有效的药剂或剂型，进一步做大区试验。大区的面积一般为500-1500m2，可不设重复或只重复1次。大区试验一般误差较小，试验结果可作为推广的依据。对于一些活动性较强的，不易搞小区试验的害虫，可直接做大区试验，但应设标准药剂(当地常用的药剂)做对照。大面积示范试验经小区和大区试验，确认了在药效和经济效益符合要求的农药后，便可做大面积多点示范试验，然后推广使用。
1取样方式若病虫分布普遍、均匀、危害严重，可采取单对角线、双对角线或五点法取样，样点可酌情减少。对于发生不普遍、分布不均匀、危害较轻的病虫，应增加取样点，采用棋盘式、抽行式取样。取样点的大小应视具体情况而定，原则应以能充分保证结果的正确性和不影响工作效率为前提。2药效试验结果的统计分析杀虫剂药效试验结果的统计分析计算杀虫剂的药效，是以害虫死亡率(虫口减退率)，或株(果)受害率来表示防治效果的。在计算前需将检查结果填入下表。表8-9食叶害虫药效检查表校正死亡率死亡率死亡数总虫数检查虫数处理方法标准株取样方法试验地点检查日期五天二天一天死亡率死亡数总虫数死亡率死亡数总虫数死亡率死亡数总虫数对照区表8-10钻蛀性害虫及地下害虫药效检查表
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备注防治效果被害率被害株数检查总数处理方法取样方法试验地点调查日期叶部害虫死亡情况易于观察,可按下列公式计算死亡率：害虫死亡率(%)＝（防治前活虫数－防治后活虫数）/防治前活虫数×100％害虫因气候、天敌、人为的影响有自然死亡现象，若自然死亡数很高，按上式计算则不能正确反映杀虫剂的药效，在这种情况下应以校正死亡率来表示：校正死亡率(%)＝（防治区虫口死亡率－对照区虫口死亡率）/（1－对照区虫口死亡率）×100％蛀食性害虫或苗圃地下害虫死亡情况不易观察，常以各处理区的受害情况来表示防治效果，即等到出现受害现象时开始检查，并按下列公式进行计算：防治效果(%)＝（对照区受害率－施药区受害率）/对照区受害率×100％也可用杀虫率来表示防治效果，但需解剖梢、干、果，或挖土检查。
杀菌剂药效实验结果的统计分析用杀菌剂防治病害，很难目测病原物是否死亡。因此，对于苗期病害，常根据防治前后发病率的变化来计算防治效果。至于叶部病害，则以相对防治效果来表示：相对防治效果(%)＝（对照区病情指数－处理区病情指数）/对照区病情指数×100％如需检查杀菌剂的内吸治疗效果,则以实际防治效果表示：实际防治效果(%)＝（对照区病情指数增长值－处理区病情指数增长值）/对照区病情指数增长值×100％式中，病情指数增长值＝检查药效时的病情指数－施药时的病情指数。试验结果的整理和分析试验结束后，应将原始记录和数据归纳，整理，写成试验报告，内容包括目的、项目、材料、方法、结果分析和结论。
（二）园林植物病虫害防治方案的设计园林植物病虫害防治方案的设计可分以下几方面：
3调查组织培养苗与非组织培养苗病毒病害的感病率，说明苗木组织培养的优点。4调查当地的某一种植物在不同的栽培管理条件下某种病虫害的发生情况。5结合园林植物修剪,调查修剪前后植株上某种越冬昆虫的数量。6设黑光灯或高压电网诱虫,调查所诱的昆虫的种类、数量、食性等。7在食叶害虫下树前，树干基部绑草帘诱集下树害虫，分别调查草帘内和树冠下土壤中该虫的数量，并与未绑草帘的树比较,说明潜所诱杀在防治害虫方面的作用。8自制黄板诱集蚜虫或糖醋液诱地老虎，统计所诱蚜虫、地老虎数量，说明在什么情况下设黄板、糖醋液效果好。9认识常见捕食性、寄生性天敌昆虫。
调查相隔一定距离的2个绿化区
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内捕食性、寄生性天敌昆虫的种类、数量及害虫种类、数量，说明天敌昆虫在控制害虫方面的作用。10用白僵菌菌粉(或苏云金杆菌乳油)、敌百虫(或其他有机杀虫剂)防治食叶害虫，比较防治效果，说明两者防治害虫的优缺点。11药效实验：如前所述。
由于各地区的具体情况不同，防治计划的内容和形式也不一致，可按年度计划，季节计划和阶段计划等方式安排到生产计划中去，计划的基本内容应包括以下几点：1确定防治对象，选择防治方法根据病虫害调查和预测预报资料,历年来病虫发生情况和防治经验,确定有哪些主要的病虫害,在何时发生最多,何时最易防治,用什么办法防治,多少时间可以完成,摸清情况后,确定防治指标,采取最经济有效措施进行防治。2建立机构，组织力量对病虫害防治工作，特别是大型的灭虫、治病活动应建立机构。说明需用劳力数量和来源，便于组织力量。3准备药剂、药械及其他物资事先应确定药剂种类和药械型号。
准确估计数量，并与供销部门订立供应合同，以免临时无法采购，影响防治工作。储备或新购买的药剂，都应进行效果鉴定，以防失效，对已有的药械应进行检查和维修。4技术培训采取短期培训与蹲点指导相结合的办法，对参加防治人员介绍防治技术，开展学习与宣传活动。5做出预算，拟定经费计划。表8-11病虫防治经费计划表备注经费总计其他费用用工量用药量防治方法防治面积防治地点防治对象防治时间运输药械维修药械购置工资劳力金额总用量每亩用量药剂名称合计平均工资总用工量每亩用工量合计单价单位：年月日
四、实训作业
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