07 第七章 微生物的生长及其控制.pptx

第1页：微生物的生长及其控制

微生物的生长及其控制

第2页：微生物生长量的测定方法

微生物生长量的测定方法

• 一、微生物的生长
• 个体生长：同化作用速度超过异化作用，原生质总量（重量、体积、大小）不断增加，出现个体生长。个体生长个体繁殖群体生长
• 群体生长=个体生长+个体繁殖
• 微生物学中的“生长”均指群体生长。

第3页：测定生长量的方法

测定生长量的方法

• 1、测定生长量的方法
• 直接法
• 间接法

第4页：直接法

• 直接法
• 测体积：适用于菌量大的样品，初步比较用。待测培养液置于刻度离心管中→沉降或离心→计算菌体体积（包括细胞体积和细胞之间的空隙体积）
• 称干重：适用于菌量大的样品。离心法：离心→干燥[ 100~105℃或红外线烘干或真空干燥（40℃或80℃）] →称干重过滤法：过滤（滤纸或醋酸纤维膜过滤）→洗涤→真空干燥（40℃）→称干重

第5页：间接法

• 间接法
• 比浊法原生质含量↑ →培养液浊度↑用分光光度计测出待测培养液的浊度，对照标准曲线，求出菌体浓度，结果为相对值。不适用于含非细胞固形物多的样品和丝状微生物。
• 生理指标法：测含氮量，含碳量，P、DNA、RNA、ATP、DAP、N-乙酰胞壁酸的含量。

第6页：比浊法的局限性

比浊法的局限性

• Limitations of turbidity count
• Indirect countingDead cells and living cells are not distinguishedParticles in culture disturb measurement
• Not good at high concentrations

第7页：全菌计数法

全菌计数法

• 2、Total counts（全菌计数法）
• 血球计数板法（counting chamber）：常规方法用血球计数板在显微镜下直接计数。
• Limitations of microscopic countDead cells and living cells are all countedSmall cells are difficult to countNeed high cell concentration, 106cells/ml

第8页：血球计数板

• 血球计数板
• 1个大方格分为25个中方格，每个中方格分为16个小方格
• 1个大方格分为16个中方格，每个中方格分为25个小方格
• 计数室容积= 1×1×0.1mm3
• 1ml菌液中的总菌数=×25×104×稀释倍数1ml菌液中的总菌数=×16×104×稀释倍数计菌器

第9页：活菌计数法

3、Viable counts（活菌计数法）•Plate counting（平板菌落计数法）：不适用于严格厌氧菌Spread-plate method（平板表面涂布法）Pour plate method（琼脂培养基浇注法）

第10页：Limitations of plate

• Limitations of plate counting
• Too many variablesInoculum sizeSuitability of mediumIncubation conditionsLength of incubationSize of coloniesSingle colony may arise from more than one cell-cellclump
• cfu/ml：colony-forming unit/ml

第11页：酵母活细胞计数

4、酵母活细胞计数•美蓝染色法活细胞无色，死细胞为兰色。

原理：美蓝是一种弱氧化剂，氧化态呈兰色，还原态呈无色。

活的酵母细胞因新陈代谢的不断进行，具有一定的还原能力，能将进入细胞的美蓝还原，而细胞不被染色。

第12页：同步生长

二、同步生长

第13页：获得同步生长的方法

获得同步生长的方法

• 1、获得同步生长的方法
• 同步生长：细胞群体处于分裂步调一致的状态。
• 获得同步生长的方法：诱导法：改变环境条件，用控制温度、光线、培养基成分、或者用能够影响细胞周期中主要功能的代谢抑制剂等条件，诱导同步生长。

第14页：机械筛选法

机械筛选法：选择性过滤法、密度梯度离心法或膜洗脱法等。

原理：在非同步生长的微生物中，微生物处于不同的生长阶段，体积、大小和重量不一，可用不同孔径的滤膜过滤或密度梯度离心，选出同一生长阶段的微生物。

第15页：同步生长曲线—阶跃性曲线

2、同步生长曲线—阶跃性曲线By careful selection ofcells that havejustdivided, a bacterialpopulation can besynchronized in thebacterial cell divisioncycle.Synchrony can bemaintained for only afew generations.The synchronous growth of a bacterialpopulation.

第16页：典型生长曲线与各期特点

三、微生物的生长曲线•单细胞微生物的典型生长曲线把少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中后，在适宜的条件下，它们的群体就会有规律的生长起来。

以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就得到微生物的典型生长曲线。

第17页：根据微生物的生长速率常数R不同

•根据微生物的生长速率常数R不同，可分为：Lag phase（延滞期、调整期、适应期）Exponential phase（指数期、对数期）Stationary phase（稳定期、平衡期）Death phase（衰亡期）

第18页：特点生长速率常数R =

1、Growth curve-lag phase•特点生长速率常数R = 0细胞形态变大或增长细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈碱性。

合成代谢活跃，易产生诱导酶。

对外界不良条件反应敏感。

第19页：影响因素菌种特性接种龄接种量培养基成分

•影响因素菌种特性接种龄接种量培养基成分

第20页：生长曲线的指数期

2、Growth curve-exponential phase•特点：R最大，增代时间（代时G）或倍增时间最短。

细胞进行平衡生长，菌体内各种成分最为均匀。

酶系活跃，代谢旺盛。

第21页：特征参数

• 特征参数
• 繁殖代数n：n = 3.322 (lgx2–lgx1)
• 生长速率常数R：R = n / (t2–t1)= 3.322 (lgx2–lgx1) / (t2–t1)
• 代时G：G = 1/ R = (t2–t1) / 3.322 (lgx2–lgx1)

第22页：影响因素菌种特性营养成分营养物浓度培养温

•影响因素菌种特性营养成分营养物浓度培养温度

第23页：培养温度的影响E.coli在不同温度下的

培养温度的影响E.coli在不同温度下的代时代时温度℃代时温度℃22358601017.54012015204590207747.540252930

第24页：特点

3、Growth curve-stationary phase•特点：R = 0，菌体产量达到最高点。

细胞开始储存糖原、异染颗粒和脂肪等储藏物。

以生产菌体或与菌体生长相平行的代谢产物的最佳收获期。

第25页：稳定期到来的原因营养物尤其是生长限制因子

•稳定期到来的原因营养物尤其是生长限制因子的耗尽；营养物的比例失调；有害代谢产物累积；pH、氧化还原电势等物化条件不适宜。

第26页：特点

4、Growth curve-death phase•特点：个体死亡速度>新生速度，群体呈现负生长；细胞形态多样；细胞产生自溶；产生或释放抗生素；芽孢杆菌中芽孢的释放。

第27页：衰亡期到来原因

•衰亡期到来原因：环境条件越来越不利，从而引起细胞内分解代谢大大超过合成代谢，导致菌体死亡。

第28页：生长曲线的应用

生长曲线的应用

• 5、The application of growth curve
• 缩短lag phase，以缩短发酵周期；取exponential phase的种子接种
• 延长exponential phase，有利于形成大量的微生物细胞；采用连续培养

第29页：延长stationary phase

延长stationary phase

• 延长stationary phase，有利于代谢产物积累；
• 根据细胞内含物判断菌龄；
• 根据生长期控制培养条件。

第30页：连续培养与恒浊器恒化器

四、连续培养•连续培养：当微生物以单批培养的方式培养到指数期的后期时，一方面以一定速度连续流进新鲜培养基，并立即搅拌均匀；另一方面，利用溢流的方式，以同样的流速不断流出培养物。

这样，培养物就达到动态平衡，其中的微生物可长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上。

第31页：连续培养器的类型内控制（控制菌体浓度

连续培养器的类型内控制（控制菌体浓度）：恒浊器外控制（控制培养液流速，以控制生长速率）：恒化器单级连续培养器多级连续培养器一般连续培养器固定化细胞连续培养器实验室科研用：连续培养器发酵生产用：连续发酵罐按控制方式分按培养器的级数分按细胞状态分按用途分

第32页：恒浊器

恒浊器•恒浊器（turbidostat）：根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。

第33页：恒化器

恒化器•恒化器（chemostat）：一种设法使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置。

第34页：恒浊器与恒化器的比较装置控制对象培养基培

恒浊器与恒化器的比较装置控制对象培养基培养基流速生长速率产物应用范围恒浊器菌体密度无限制不恒定最高速率大量菌体生产为主（内控制）生长因子或与菌体相平行的代谢产物恒化器培养基有限制恒定低于不同生长实验室流速生长因子最高速率速率菌体为主（外控制）

第35页：连续培养的优点

连续培养的优点•优点高效节约了大量动力、人力、水和蒸汽自控产品质量较稳定

第36页：连续培养的缺点

连续培养的缺点•缺点菌种易于退化易遭杂菌污染营养物的利用率低

第37页：温度、氧气与pH对生长的影响

温度、氧气与pH对生长的影响

• 五、影响微生物生长的主要因素
• 温度
• 氧气
• pH
• 渗透压和水活度

第38页：最低生长温度

1、Temperature最低生长温度：一般为-5~-10℃，极端为-30℃嗜冷菌：＜20℃生长温度最适生长温度中温菌：20~45℃嗜热菌：＞45℃最高生长温度：一般为80~95℃最适生长温度：分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度。

最适生长温度≠发酵速度最高时的培养温度≠代谢产物量最高时的温度≠生长量最高时温度。

第39页：微生物各生理过程的不同最适温度菌名生长温

微生物各生理过程的不同最适温度菌名生长温度℃发酵温度℃累积产物温度℃嗜热链球菌37 47 37乳酸链球菌34 40产细胞：25~30产乳酸：30灰色链霉菌37 28—北京棒杆菌32 33~35—丙酮丁醇梭菌37 33—产黄青霉30 25 20

第40页：根据微生物与氧的关系

2、O2•根据微生物与氧的关系，可分为：专性好氧菌：在正常大气压（0.2巴）下好氧呼吸产能以呼吸为主，兼营发酵产能好氧菌兼性厌氧菌以呼吸为主，兼营厌氧呼吸产能微好氧菌：只能在0.01~0.03巴的大气压下生活耐氧菌：不需氧，只能以发酵产能，但氧无毒害厌氧菌（专性）厌氧菌：氧有害或致死，以发酵或无氧呼吸产能

第41页：氧对厌氧菌的毒害机制

氧对厌氧菌的毒害机制

• O2+ eO2.
• 2O2.+ 2H+H2O2+ O2NADH2NADSOD好氧生物及耐氧菌过氧化氢酶好氧生物过氧化物酶耐氧菌H2O +½ O22H2O

第42页：厌氧菌的氧毒害机制

厌氧菌的氧毒害机制

第43页：指外界环境的pH值嗜碱微生物最适生长

指外界环境的pH值嗜碱微生物最适生长

• 3、pH
• pH：-lg[H+]，指外界环境的pH值嗜碱微生物最适生长pH值偏于碱性（如多数放线菌）耐碱微生物
• 微生物（如链霉菌）嗜酸微生物最适生长pH值偏于酸性（多数真菌）耐酸微生物（乳酸杆菌）

第44页：不同微生物的生长pH范围微生物pH值最低

不同微生物的生长pH范围微生物pH值最低：下表列出相关数据。

第45页：几种抗生素产生菌的生长与发酵的最适pH抗

几种抗生素产生菌的生长与发酵的最适pH抗：下表列出相关数据。

第46页：微生物在生命活动过程中

pH•微生物在生命活动过程中，会改变外界环境中的pH值。

糖类发酵、氧化有机酸有机物脂肪水解有机酸培养基内蛋白质脱羧胺类中性成分(NH4)2SO4NH4+选择吸收H2SO4无机盐NaNO3NO3-选择吸收NaOH。

第47页：调节方法过酸时

pH调节方法过酸时：加NaOH、Na2CO3等碱中和过碱时：加H2SO4、HCl等酸中和加适当氮源：如尿素、NaNO3、过酸时NH4OH或蛋白质等“治本”提高通气量过碱时加适当碳源：糖、乳酸、甘油等降低通气量加磷酸缓冲液（K2HPO4—KH2PO4）加CaCO3或NaHCO3“治标”外源调节内源调节

第48页：有害微生物的控制

六、有害微生物的控制

第49页：几个基本概念

• 几个基本概念
• 灭菌：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物（包括病原微生物和非病原微生物）永远丧失其生长繁殖能力的措施。
• 消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。如：巴氏消毒法。

第50页：防腐

防腐

• 防腐：利用某种理化因素（低温、缺氧、干燥、高渗、高酸度、防腐剂）完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的措施。
• 无菌：没有活的微生物存在，如无菌操作，无菌空气。

第51页：化疗

•化疗：利用具有高度选择毒力，（即对病原菌具有高度毒力而对宿主无显著毒性）的化学物质（抗生素、磺胺类）来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，借以达到治疗该传染病的措施。

第52页：物理灭菌方法

物理灭菌方法

• Physical ways
• Heat sterilization (including autoclave andpasteurization)
• Radiation (microwaves, UV, X-rays, γ-rays andelectrons)
• Filtration (depth filter, membrane filter andnucleation track (nucleopore) filter)

第53页：干热灭菌

干热灭菌

• （一）Heat sterilization
• Cardinal temperatures for growth
• High temperatures over optimum for growth controlDenaturation at high temperature-the lose of structureand ability to function of macromolecules（大分子）Proteins are the most heat sensitive among the fourkinds of macromoleculesHigher order structures will be effected first

第54页：蛋白质的热变性

Heat denaturation of proteins

第55页：影响湿热灭菌效率的因素

影响湿热灭菌效率的因素

• Factors affecting efficiency ofheat sterilization
• Presence of endospores（芽孢）determinesthe heating process-temperature and time；
• Moist heat has better penetrating power thandry heat；

第56页：微生物的热致死规律

微生物的热致死规律

• Microbial cells die more quickly at acidic pH；
• Dry cells and spores are more resistant to heat；
• Higher concentrations of proteins, sugars and fatsreduce heat penetration.

第57页：一些细菌芽孢干热灭菌所需时间菌名不同温度

一些细菌芽孢干热灭菌所需时间菌名不同温度下的杀死时间（分）120℃ 130℃ 140℃ 150℃ 160℃ 170℃180℃炭疽杆菌——180 60~120 9~90—3肉毒梭菌120 60 15~60 25 20~25 10~15 5~10产气荚膜梭菌50 15~35 5————破伤风梭菌—20~40 5~15 30 12 5 1土壤细菌芽孢———180 30~90 15~60 15

第58页：一些细菌芽孢湿热灭菌所需时间菌名不同温度

一些细菌芽孢湿热灭菌所需时间菌名不同温度下的杀死时间（分）100℃ 105℃ 110℃ 115℃ 120℃ 125℃ 130℃134℃炭疽杆菌2~15 5~10——————枯草杆菌数小时——40————腐败厌氧菌780 170 41 15 5.6———破伤风梭菌5~90 5~25——————产气荚膜梭菌5~45 5~27 10~15 4 1———肉毒梭菌300~530 40~120 32~90 10~40 4~20———一种土壤细菌数小时420 120 15 6~30 4—1.5~10一种嗜热菌—400 100~300 40~110 11~35 3.9~8 3.5 1产孢梭菌150 45 12—————

第59页：干热灭菌法

1、干热灭菌法•火焰灼烧法：直接在火焰上灼烧灭菌。

适用范围：接种针（环），试管口，三角瓶口，金属小工具。

第60页：干热灭菌法

• 干热灭菌法•烘箱内热空气灭菌法：160℃ 2h，适用于耐高温器皿。注意：
• 温度不可超过180℃，超过180℃，玻璃器皿上的棉塞及外面包的纸张均会被烤焦着火。
• 由于热空气穿透力弱，灭菌时物品不宜堆放得太紧。
• 降温要缓慢，以免玻璃破裂，待温度＜60℃时，方可打开箱门。

第61页：湿热灭菌法

湿热灭菌法

• 2、湿热灭菌法
• 煮沸消毒法：一般用于饮用水的消毒，100℃下煮沸数分钟。
• 间歇灭菌法：适用于不耐热培养基。80~100℃ 15~60min室温或37℃过夜
• 巴氏消毒法（Pasteurization）
• 加压灭菌法（Autoclave）培养基彻底灭菌重复三次

第62页：巴氏消毒法

巴氏消毒法

• （1）Pasteurization（巴氏消毒法）
• Named after the great microbiologist-LouisePasteur
• Killing ofnon-spore formingbacteria in heatsensitive materialsRemoval of pathogens（病原体）Removal of food spoilage bacteriaKeeping quality of the materials

第63页：牛奶的巴氏消毒法

•Milk pasteurizationFlash pasteurization-71oC, 15 secBulk pasteurization-63-66oC, 30min

第64页：加压蒸汽灭菌法

（2）Autoclave（加压蒸汽灭菌法）•Moist heating under pressurePressure-1.1kg/cm2Temperature-121oCSterilization time under these conditions-10-15min (longer time needed for penetration ofthese conditions into interiors of objects)

第65页：影响湿热灭菌效率的因素

影响湿热灭菌效率的因素

• Factors affecting efficiency ofAutoclaving sterilization
• 灭菌物体的含菌量：含菌量↑，灭菌时间↑
• 灭菌对象的pH：pH<6，微生物易死亡；pH6.0~8.0，微生物不易死亡
• 灭菌对象的体积：影响热传导率

第66页：加热与散热速度

加热与散热速度

• 加热与散热速度
• 灭菌锅内空气排除程度的影响：加压蒸汽灭菌不是靠蒸汽压力，而是靠蒸汽温度，灭菌时要先排尽锅内空气，否则压力表上压力=锅内水蒸汽压力+空气压力↓↓压力表上温度水蒸汽锅内温度
• 高温对培养基成分的影响

第67页：灭菌物体含菌量的影响芽孢数目和灭菌时间的

灭菌物体含菌量的影响芽孢数目和灭菌时间的关系芽孢数/ml在100℃下杀菌时间（分）100 000 000 1975 000 000 1650 000 000 1425 000 000 121 000 000 8100 000 6

第68页：对灭菌时间的影响温度芽孢数灭菌时间（分）

pH对灭菌时间的影响温度芽孢数灭菌时间（分）（℃）（个/ml）pH6.1 pH5.3 pH5.0 pH4.7 pH4.5120 10 000 8 7 5 3 3115 10 000 25 25 12 13 13110 10 000 70 65 35 30 24100 10 000 740 720 180 150 150

第69页：灭菌对象体积的影响不同容量的液体的灭菌时

灭菌对象体积的影响不同容量的液体的灭菌时间容器（ml）在121~123℃下所需灭菌时间（分）三角烧瓶50 12~14200 12~15500 17~221 000 20~252 000 30~35血清瓶9 000 50~55

第70页：空气排除度对灭菌温度的影响压力表读数锅内

空气排除度对灭菌温度的影响压力表读数锅内温度（℃）kg/cm2磅/英寸2纯蒸汽排除1/2空气不排除空气0.35 5 109 94 720.70 10 115 105 901.05 151211121001.40 20 126 118 1091.75 25 130 124 1152.10 30 134 128 121

第71页：高温对培养基成分的影响

高温对培养基成分的影响•形成沉淀物牛肉膏、蛋白胨、麦芽汁等天然培养基灭菌后，发生沉淀。

（一般不影响微生物生长）培养基中含Ca、Mg、Fe、Zn等离子，加热后易形成磷酸盐、碳酸盐沉淀。

第72页：高温对营养成分的破坏

•破坏营养，提高色泽褐变：含糖较高的培养基灭菌后，颜色发生变化，如黄、褐色，一般颜色越深，发酵效果越差。

原因：还原糖的羰基与氨基酸或蛋白质的氨基反应→氨基糖（褐色）；部份糖分解→焦糖。

第73页：改变培养基pH

改变培养基pH

• 改变培养基pH：灭菌后，培养基pH下降0.2~0.3
• 降低培养基浓度：气温低时会增加冷凝水。

第74页：灭菌温度和时间对营养成分破坏的影响灭菌温

灭菌温度和时间对营养成分破坏的影响灭菌温度（℃）灭菌时间（分）营养成分的破坏（%）100 400 99.3110 30 67115 15 50120 4 27130 0.5 8140 0.08 2150 0.01 <1

第75页：不同温度下湿热灭菌对糖类的破坏（用旋光法

不同温度下湿热灭菌对糖类的破坏（用旋光法：下表列出相关数据。

第76页：二）Filter

二）Filter

• （二）Filter sterilization（过滤除菌法）
• Filter with pores sized less than 0.22 um to stopmicrobial cells
• Used for heat sensitive materials
• Can not remove viruses or extremely smallbacteria

第77页：辐射灭菌

辐射灭菌

• （三）Radiation sterilization
• Microwaves-microwave oven, thermal effects
• Ultraviolet (UV)-DNA breakage
• Ionization radiation
• Sources: X-rays, Gamma rays, Electrons
• Mechanism: ions and reactive molecules to destroymacromolecules

第78页：四）Chemical ways

四）Chemical ways

• （四）Chemical ways
• Agents thatkillorganisms are often calledcidalagents(bactericidal, fungicidal and viricidalagents)—杀菌剂
• Agents that do not kill but onlyinhibitgrowtharecalledstatic agents(bacteriostatic,fungistatic, and viristatic agents)—抑菌剂

第79页：消毒剂及其作用

消毒剂及其作用

• Disinfectantsare chemicals thatkillmicroorganisms and are used oninanimateobjects—消毒剂
• Antisepticsare chemical agents thatkill or inhibitgrowth of microorganisms and that are sufficientlynontoxicto be applied tolivingtissues.—防腐剂

第80页：抗菌效力的测定

抗菌效力的测定

• Measuring antimicrobial activity
• Smallest amount of agent needed to inhibit thegrowth of test organism
• Minimum inhibitory concentration-MIC（最低抑菌浓度）
• Methods for testing MICTube dilution techniqueAgar diffusion technique

第81页：

第82页：比浊法测生长量

Turbidity measurement（比浊法）

第83页：

第84页：血球计数板

血球计数板

第85页：计菌器Hawksley计菌器

Peteroff-Hauser计菌器Hawksley计菌器

第86页：

第87页：

第88页：

第89页：涂布平板法

Spread-plate method（涂布法）

第90页：

第91页：倾注平板法

Pour plate method（倾注法）

第92页：

第93页：平板划线分离法）特点

Streak Plate（平板划线分离法）特点：快速、方便。

分区划线（适用于浓度较大的样品）连续划线（适用于浓度较小的样品）。

第94页：平板划线分离法

Helmstetter-Cummings法

第95页：群体生长周期

Growth cycle of populationsin batch culture

第96页：延滞期指数期稳定期衰亡期

延滞期指数期稳定期衰亡期

第97页：接种量的影响

接种量的影响

第98页：营养物浓度的影响时间8.0mg/ml6.

营养物浓度的影响时间8.0mg/ml6.0mg/ml4.0mg/ml2.0mg/ml1.0mg/ml0.5mg/ml0.2mg/ml0.1mg/ml只最大收获量受影响生长速度和最大收获量受影响细胞数或菌体量

第99页：细胞数或产物浓度时间细胞产物I型II型

lg细胞数或产物浓度时间细胞产物I型II型

第100页：单批培养恒浊法恒化法单批培养连续培养时间

单批培养恒浊法恒化法单批培养连续培养时间连续流入新鲜培养液lg细胞数（个/ml）连续培养

第101页：恒化器

恒化器Chemostat或bactogen

第102页：微生物的温度类型

Temperature classes

第103页：

第104页：生长温度三基点

Cardinal temperatures

第105页：专性好氧菌

(a)专性好氧菌；(b)厌氧菌；(c)兼性厌氧菌；(d)微好氧菌；(e)耐氧菌

第106页：

第107页：

第108页：高压蒸汽灭菌锅

Autoclave

第109页：

第110页：

第111页：

第112页：

第113页：应用范围作用原理名称及使用方法类型皮肤

应用范围作用原理名称及使用方法类型皮肤、器皿脱水、蛋白质变性70%—75%乙醇醇类房间、物品消毒（不适合食品厂）蛋白质变性0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）醛类地面、器具皮肤地面、器具破坏细胞膜、蛋白质变性3%—5%石炭酸2%来苏儿3%—5%来苏儿酚类皮肤、水果、蔬菜皮肤、物品表面水果、蔬菜、塑料等氧化蛋白质活性基团，酶失活0.1%高锰酸钾3%过氧化氢0.2%—0.5%过氧乙酸氧化剂常用的消毒防腐剂及其应用

第114页：应用范围作用原理名称及使用方法类型非金属

应用范围作用原理名称及使用方法类型非金属器皿皮肤、粘膜、伤口皮肤、新生儿眼睛防治植物病害蛋白质变性、酶失活变性、沉淀蛋白蛋白质变性、酶失活0.05%—0.1%升汞2%红汞0.1%—1%硝酸银0.1%—0.5%硫酸铜重金属盐类皮肤、粘膜、器械皮肤、金属、棉织品、塑料蛋白变性、破坏细胞膜0.05%—0.1%新洁尔灭0.05%—0.1%杜灭芬表面活性剂

第115页：应用范围作用原理名称及使用方法类型饮水

应用范围作用原理名称及使用方法类型饮水、游泳池水地面水、空气等皮肤破坏细胞膜、蛋白质0.2—0.5mg/L氯气10%—20%漂白粉0.5%—1%漂白粉2.5%碘酒卤素及其化合物皮肤、伤口与蛋白质的羧基结合2%—4%龙胆紫染料食品防腐食品防腐0.1%苯甲酸0.1%山梨酸酸类

第116页：试管稀释法

Tube dilution method

第117页：琼脂扩散法

Agar diffusion method