页数:41页文件大小:3.22 MB来源: 酶工程ppt课件
本课件为酶工程课程第六章,先回顾Cech与Altman发现RNA催化功能并获得诺贝尔化学奖的历程,区分催化分子内反应的自我剪接型与自我剪切型核酶及催化分子间反应的核酶,并介绍核酶固定化与研究展望;继而讲解脱氧核酶的概念、手枪型二级结构、催化特性、动力学特征与三类生物学活性;最后系统阐述抗体酶的概念、与酶的差别、七类催化反应,以及诱导法、引入法与拷贝法三种制备途径及其研究展望。
第六章 核酶和抗体酶
第一节 Ribozyme
注:源文件人名与术语分别作「Sidnery Altan」「生物催比剂」,此处按通行写法回正。
二.Ribozyme的种类:自然界存在催化分子内反应(in cis,源文件作 incis)的ribozyme(自我剪接型和自我剪切型)和催化分子间反应(in trans)的ribozyme。
1.自我剪接ribozyme分类:自我剪接ribozyme可分为两类。
2.自我剪切ribozyme的分类:自我剪切的RNA结构有锤头结构和发夹结构,其中尖头指出自我剪切的部位。自我剪接ribozyme包含剪切与连接两个步骤。
几种能进行自我剪切的RNA结构:本页主体为二级结构图示,具体序列与剪切位点建议对照原图补充。
3.催化分子间反应的ribozyme的分类:如L-19IVS具有5种酶活性,可催化多种分子间反应。
三.Ribozyme研究进展与展望:对各种已知ribozyme结构与功能关系的研究,可找出其结构功能域和必需基团,据此可进行分子改造,以获得分子更小的、高效的ribozyme。
研究热点:从催化分子内反应的自我剪切ribozyme设计出催化分子间反应的ribozyme(本页附看图提示)。
Ribozyme的固定化:Ribozyme的固定化已成功,将在医学、工业上获得应用。
意义:对各种RNA-蛋白质复合物酶的分离鉴定,对许多具有特别重要生物功能的RNA和蛋白质构成的颗粒体,在自然界将会发现更多的具有自我剪接或自我剪切的RNA分子和以非RNA为底物的ribozyme。
第一节结束(内容小结)
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脱氧核酶的结构:Carmi等通过体外选择技术合成了一种依赖Ca2+的具有自我切割功能的手枪型二级结构脱氧核酶分子。
三.脱氧核酶的催化特性
四.酶促反应动力学特征
五.生物学意义:三种脱氧核酶的活性:
第二节结束(内容小结)
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二.抗体酶概述:酶与抗体的差别——酶是能与反应过渡态选择结合的催化性物质,抗体是和基态分子结合的催化性物质。
三.抗体酶的催化反应:1.酰基转移反应:本页主体为反应示意,具体底物与产物建议对照原图补充。
2.重排反应:本页主体为反应示意,具体底物与产物建议对照原图补充。
3.氧化还原反应:本页主体为反应示意,具体底物与产物建议对照原图补充。
4.金属螯合反应:本页主体为反应示意,具体金属离子与配体建议对照原图补充。
5.磷酸酯水解反应:本页主体为反应示意,具体底物与产物建议对照原图补充。
6.磷酸酯闭环反应:本页主体为反应示意,具体底物与产物建议对照原图补充。
7.光诱导反应 a:光聚合反应(二聚作用):本页主体为反应示意,具体条件建议对照原图补充。
b.光裂解反应:本页主体为反应示意,具体底物与产物建议对照原图补充。
利用过渡态类似物制备抗体示意图:本页主体为制备流程示意,具体步骤标注建议对照原图补充。
引入法(图示):本页主体为引入方式示意,具体基团与位点建议对照原图补充。
引入法举例:本页主体为具体实例图示,所用抗体与引入基团建议对照原图补充。
缺点:具有一定的盲目性和偶然性,并且不能产生新酶。
拷贝法示意:本页主体为免疫与筛选流程示意,具体步骤建议对照原图补充。
五.研究展望
第三节结束(内容小结)
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