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09 第八章 胚胎移植.ppt

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本课件讲解胚胎移植技术:先界定其概念并回顾从家兔试验到牛冻胚移植、体细胞克隆的发展历程,随后说明其在发挥优良母畜繁殖潜力、保种与克服不孕等方面的意义、六项生理基础与三条基本原则,最后按供受体选择、同期发情与超数排卵、配种、胚胎收集、检查、保存与移植及术后观察的顺序展开完整技术程序。

第八章章节封面,标示本章进入动物胚胎工程中的胚胎移植技术
胚胎移植概念页,说明对供体超排配种后采集胚胎再移入受体生殖道使其怀孕供体后代
胚胎移植发展年表,按年代列出家兔成功、绵羊山羊成功、非手术法与牛冻胚移植等里程碑
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第1页:第八章胚胎移植

第八章 胚胎移植(动物胚胎工程技术)

第2页:胚胎移植的概念

胚胎移植的概念

胚胎移植
对供体母畜进行超数排卵处理并配种,然后采集胚胎,再移植到受体生殖道的相应部位,从而在受体体内怀孕供体后代的技术。

第3页:胚胎移植的历史

胚胎移植的历史

胚胎移植发展大事记
时期进展
1890—1900W.Heape在家兔方面胚胎移植成功
1900—1950英美科学家在绵羊和山羊方面成功,成功率达35%
1950—1970日本采用非手术法移植成功,成功率达70—80%
1970—1980加拿大、美国成立牛胚胎移植公司;1973年英国牛冻胚移植成功
1982—2006英美日德大规模开展胚胎移植、核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外受精
1996英国诞生世界上第一例体细胞克隆羊多利

第4页:一、胚胎移植的意义

一、胚胎移植的意义

  • 充分发挥优良种母畜的繁殖潜力
  • 用于濒危品种及野生动物的保种
  • 代替种畜引进
  • 克服不孕症
  • 诱发双胎

第5页:二、胚胎移植的生理基础

二、胚胎移植生理基础

  • 多卵泡发育的基础
  • 发情周期中生殖系统的孕向发育
  • 早期胚胎处于游离状态
  • 胚胎发育不存在免疫问题
  • 发育的胚胎最终要与子宫发生生理和组织上的联系
  • 胚胎的遗传性不受受体的影响

第6页:三、胚胎移植的基本原则

三、胚胎移植的基本原则

环境同一性
供体和受体在分类学上属性相同;生理上一致,即发情时间同期;解剖位置一致,即空间环境一致。
胚胎的发育期限
必须处于周期黄体期内。
胚胎的质量
胚胎必须正常,并在处理过程中不受不良因素影响。

第7页:四、胚胎移植的技术程序

四、胚胎移植的技术程序

  • 1.供体和受体的选择
  • 2.同期发情及超数排卵处理
  • 3.供体母畜的配种
  • 4.胚胎的收集
  • 5.胚胎的检查
  • 6.胚胎的保存与培养
  • 7.胚胎的移植
  • 8.供体和受体的术后观察

第8页:胚胎移植技术程序流程

第9页:1.供体和受体的选择

1.供体和受体的选择

供体与受体的选择要求
类别要求
供体育种价值高、生殖机能强、体质强健
受体数量多、价格较低、体型中上等、非优良品种、健康状况良好

第10页:供受体模式之一:波尔羊与奶山羊

供受体模式之一——波尔羊与奶山羊

第11页:供受体模式之二:杜泊羊与地方绵羊

供受体模式之二——杜泊羊与地方绵羊

第12页:供受体模式之三:引进牛与地方黄牛

供受体模式之三——引进牛与地方黄牛

第13页:2.同期发情与超数排卵处理

2.同期发情与超数排卵处理

  • 大规模胚胎移植必须进行同期发情,处理方法为孕激素+PG法
  • 供体要进行超数排卵,最常用的超排激素是FSH和LH

注:原文作「受体要进行超数排卵」,按胚胎移植技术流程,超数排卵的处理对象为供体,据此收录。

第14页:同期发情与超排处理

同期发情与超排

第15页:超排与撤栓的时间安排

同期发情与超排处理:放栓—注射FSH—注射PG—撤栓。

第16页:3.供体母畜的配种

3.供体母畜的配种

  • 供体牛羊发情后应用最优秀的公牛羊精液配种
  • 发情后8—12小时进行第一次配种,每8小时一次直到发情结束
  • 条件允许应采用本交或鲜精输精;采用冷冻精液时每次输精应增大总有效精子数

第17页:4.胚胎的收集

4.胚胎的收集

胚胎冲洗液的配制
杜氏磷酸缓冲液PBS、布林斯特液、SOF合成输卵管液。
手术法收集胚胎
输卵管冲胚、子宫角冲胚。
非手术法收集胚胎
二路法、三路法。

第18页:手术法输卵管冲卵

(1)手术法冲卵——输卵管冲卵

第19页:输卵管冲卵的插管路径

第20页:子宫角冲卵

子宫角冲卵

第21页:三路非手术采卵

(2)三路非手术采卵

第22页:二路非手术冲卵

二路非手术冲卵

第23页:5.胚胎的检查

5.胚胎的检查

  • 收集到的冲洗液静置、分离
  • 拣胚:将胚胎移至培养液或保存液中
  • 胚胎鉴定:根据透明带、胚胎细胞、发育阶段及细胞在透明带中的比例确定胚胎级别

第24页:体视显微镜下的拣胚

第25页:将胚胎装入移胚管

将胚胎装入移胚管

第26页:6.胚胎的保存

6.胚胎的保存

胚胎的降温
使胚胎停止发育,延长其体外生存时间。
体外培养
将胚胎置于体温条件下的培养液中使其继续发育。
胚胎冷冻
经一定处理程序降温冷冻后保存于液氮中。

第27页:7.胚胎移植

7.胚胎移植

  • 手术法移植
  • 非手术法移植

第28页:手术法移胚

(1)手术法移胚

与冲卵手术方法相似,只是用移胚管将胚胎移入相应部位。

第29页:非手术法移胚

(2)非手术法移胚

非手术法是用移胚枪将胚胎移到子宫大弯处。

第30页:8.供体和受体的术后观察

8.供体和受体的术后观察及处理

  • 供体和受体的抗炎处理
  • 健康状况检查
  • 返情状况检查
  • 妊娠检查及妊娠确定

第31页:受体术后观察与护理

第32页:胚胎移植小结

总结

  • 胚胎移植是收集供体胚胎再移植给受体,使供体胚胎在受体体内发育而产生供体后代
  • 胚胎移植的成功有其生理学基础,只有全程按基本要求进行才可能成功
  • 基本流程:供受体选择—供体超排和供受体同期发情—供体胚胎收集—胚胎质量鉴定—胚胎保存—受体胚胎移植—供受体术后护理

第33页:课后作业

作业

  • 请上网查阅资料,目前都有哪些生物技术必须应用到胚胎移植
  • 简述胚胎移植的基本流程

第34页:胚胎移植课件结束页

谢谢!

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