页数:84页文件大小:1.89 MB来源: 分子生物学课ppt课件
本课件围绕从DNA到RNA的信息传递展开,先说明转录的不对称性与转录单元,再比较原核与真核的RNA聚合酶和启动子结构,随后详解转录起始、延伸、终止与转录后加帽、加尾、剪接和编辑。
第三章生物信息的传递(上)——从DNA到RNA
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一、基本概念生物体以DNA为模板合成RNA的过程。转录RNADNA转录(transcription) :
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模板链并非永远在同一条单链上转录方向5 3 3 5 模板链编码链编码链模板链转录方向DNA分子上转录出RNA的区段,称为结构基因。结构基因:
转录单元(transcription unit)一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。
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大肠杆菌RNA聚合酶的组成
| 亚基 | 基因 | 相对分子量 | 亚基数 | 组分 | 功能 |
|---|---|---|---|---|---|
| α | rpoA | 36500 | 2 | 核心酶 | 核心酶组装,启动子识别 |
| β | rpoB | 151000 | 1 | 核心酶 | β与β′共同形成RNA合成的活性中心 |
| β′ | rpoC | 155000 | 1 | 核心酶 | 与β共同形成RNA合成的活性中心 |
| ω | ? | 11000 | 1 | 核心酶 | ? |
| σ | rpoD | 70000 | 1 | σ因子 | 存在多种σ因子,用于识别不同的启动子 |
原文中 ω 亚基的基因名与功能均标注为“?”,保留原样未作推测。
真核生物RNA聚合酶特征比较
| 酶 | 位置 | 转录产物 | 相对活性 | 对α-鹅膏蕈碱的敏感性 |
|---|---|---|---|---|
| RNA聚合酶Ⅰ | 核仁 | rRNA | 50-70% | 不敏感 |
| RNA聚合酶Ⅱ | 核质 | hnRNA | 20-40% | 敏感 |
| RNA聚合酶Ⅲ | 核质 | tRNA | 约10% | 存在物种特异性 |
RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别
| 比较项目 | RNA聚合酶 | DNA聚合酶 |
|---|---|---|
| 大小(M) | 大,4.8×10^5 dol | 小,1.09×10^5 dol |
| 引物 | 无 | 有 |
| 产物 | 较短,游离 | 较长,与模板以氢键相连 |
| 作用方式 | 一条链的某一段 | 两条链同时进行 |
| 外切酶活性 | 无 | 5′→3′,3′→5′ |
| 校对合成能力 | 无 | 有 |
| 修复能力 | 无 | 有 |
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●原核生物启动子结构Pribnow41-44bp
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TTGACA区:提供了RNA聚合酶全酶识别的信号TATA区:酶的紧密结合位点(富含AT碱基,利于双链打开)
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编码链AACTGTATATTA模板链TTGACATATAAT3’5’DNA转录起始点Probnow盒子启动子 35 10+1转录区5’3’RNA转录起点与新生RNA链第一个核甘酸相对应DNA链上的碱基。
大肠杆菌RNA聚合酶全酶所识别的启动子区T85T83G81A61C69A52T89A89T50A65A100
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典型启动子的结构-35 -10 转录起点TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp
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●真核生物启动子真核有三种不同的启动子和有关的元件启动子Ⅱ最为复杂,它和原核的启动子有很多不同
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真核生物启动子的结构核心启动子(core promoter)上游启动子元件(upstream promoter element,UPE)
SV40 早期启动子组蛋白H2BTATACAATGC
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2、转录起始RNA链上第一个核甘酸键的产生
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核心酶···· DNA···· RNA
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不依赖 因子的终止终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区,RNA形成发夹结构;在终止位点前面有一段由4-8个A组成的序列,RNA的3’端为寡聚U
发夹式结构和寡聚U的共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。
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终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关,长度效率
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转录的基本过程
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四、转录后加工
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m7Gppp鸟甘酸转移酶
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3、RNA的剪接地中海贫血病人的珠蛋白基因,1/4
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5’..AAGUAAGU …….CURAY..(10-40)…(U/C)11NCAG G….3’IntronexonexonPolyprimidineCAG = UAG>AAG>GAG
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①
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Ⅰ类内含子的自我剪接
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Ⅱ类内含子的自我剪接
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C变为U碱基的突变
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锥虫coxII 基因的编辑
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●5’端无“帽子”结构,3’端没有或只有较短的poly(A )结构。SD序列:mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。
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原核生物和真核生物mRNA结构的比较
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转录与复制的不同点
| 比较项目 | 复制 | 转录 |
|---|---|---|
| 模板 | 两条链均复制 | 模板链转录(不对称转录) |
| 原料 | dNTP | NTP |
| 酶 | DNA聚合酶 | RNA聚合酶 |
| 产物 | 子代双链DNA(半保留复制) | mRNA、tRNA、rRNA |
| 配对 | A-T;G-C | A-U;G-C |
中国科学院2001年硕士研究生入学考试:名词解释:Transcription; Reverse transcription
1、下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的:A.它位于第一个结构基因处B.它和RNA聚合酶结合C.它编码阻遏蛋白D.它和反密码子结合B
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3、DNA模板链为5’-ATTCAG-3’,其转录产物是:A.5’-GACTTA-3’B.5’-CTGAAT-3’C.5’-UAAGUC-3’D.5’-CUGAAU-3’D
4、DNA复制和转录过程有许多相同点,下列描述哪项是错误的?A.转录以DNA一条链为模板,而以DNA两条链为模板进行复制B.在这两个过程中合成均为5`-3`方向C.复制的产物通常情况下大于转录的产物D.两过程均需RNA引物D
5、真核生物的mRNA加工过程中,5’端加上(),在3’端加上(),后者由()催化。如果被转录基因是不连续的,那么,()一定要被切除,并通过()过程将()连接在一起。帽子结构、多聚腺苷酸尾巴、poly(A)聚合酶、内含子、剪接、外显子
6、–10位的()区和–35位的()区是RNA聚合酶与启动子的结合位点,能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力。TATA、TTGACA
9、下面那一项不属于原核生物mRNA的特征()A:半衰期短B:存在多顺反子的形式C:5’端有帽子结构D:3’端没有或只有较短的多聚(A)结构
10、比较RNA转录与DNA复制,下列哪些是正确的?A.都在细胞核内进行B.转录是连续的C.链的延长均为5’→3’D.与模板链的碱基配对均为G-C
11、真核细胞中的mRNA帽子结构是()A. 7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸B. 7-甲基尿嘧啶核苷三磷酸C. 7-甲基腺嘌呤核苷三磷酸D. 7-甲基胞嘧啶核苷三磷酸
12、下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述()(A)σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物(B)全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物(C)三个全酶在转录起始点形成的复合物(D)σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物
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