第1页：羊水检验概述章节封面
第十八章羊水检验The Examination of Amniotic Fluid
第2页：本章要点（Key Points）
KEY POINTS1.Alterationsofcolorandclarityandthesignificance.2.Evaluationindexesoffetalmaturityandthesignificance.3.Methodologyassessmentandqualitycontroloffoamstabilitytest.4.Examinationindexesoftoxoplasma,others,rubellavirus,cytomegalovirusandherpessimplexvirus(TORCH)infection.5.Evaluativeindexesoffetaldysplasiaandthesignificance.
第3页：前言功能
前言功能：保护母体和胎儿。水----组成：溶质--有机物----无机盐----细胞---98%～99%1%～2%50%50%极少量
第4页：标本采集与处理
一、标本采集羊膜穿刺多由妇产科医师进行。第一节标本采集与处理
第5页：标本采集量:标本采集最佳时间
标本采集量:标本采集最佳时间：①诊断遗传性疾病---②诊断Rh溶血症----③评估胎儿成熟度--妊娠16～20W。妊娠26～36W。妊娠晚期(≥35W)。10～30ml。
第6页：羊水理学检验
第二节羊水理学检验一、量
- 参考范围
- ①妊娠8周：5ml。
- ②妊娠10周：30ml。
- ③妊娠20周：400ml。
- ④妊娠38周：1000ml。
- ⑤足月妊娠：800ml。
- ⑥过期妊娠：＜300ml。
第7页：羊水理学检验（临床意义）
- 临床意义
羊水过多（polyhydramnios）：妊娠任何时期羊水量＞2 000ml。羊水过少（oligohydramnios）：妊娠足月时羊水量＜300ml。
第8页：羊水过多的原因
- 羊水过多的原因
- ①胎儿畸形
- ②多胎妊娠
- ③孕妇和胎儿疾病
- ④胎盘和脐带病变
第9页：羊水过少的原因
- 羊水过少的原因
- ①胎儿畸形
- ②过期妊娠
- ③胎儿宫内发育迟缓
- ④羊膜病变
第10页：颜色与透明度
- 二、颜色与透明度
- ①妊娠早期：无色或淡黄色、清晰、透明
- ②妊娠晚期：乳白色、清晰或稍混浊。
第11页：颜色与透明度（临床意义）
- 临床意义
- 黄绿色
- 表示羊水中混有胎粪，为胎儿窘迫的现象。
- 棕红色或褐色
- 多为胎儿已经死亡。
- 金黄色
- 可能为母婴血型不合所引起的羊水中胆红素过高。
- 粘稠拉丝的黄色
- 表示妊娠过期或胎盘功能减退。
- 混浊脓性或带有臭味者
- 表示宫腔内已有明显感染。
第12页：羊水中的肺泡表面活性物质饱和磷脂是既
【检测原理】羊水中的肺泡表面活性物质饱和磷脂是既亲水又亲脂的两性物质，在乙醇中振荡后形成的泡沫可维持数小时，并形成稳定泡沫层。而其他物质形成的泡沫，能被乙醇消除。用于诊断胎儿肺成熟程度。三、泡沫试验
第13页：参考范围
- 参考范围
阳性（稀释度为1∶1和1∶2的两管液面均出现泡沫环）。
第14页：参考范围（临床意义）
- 临床意义
- 临床上只进行稀释度为1∶1和1∶2的泡沫试验。
- 若2管液面均出现泡沫环为阳性，则提示L/S比值≥2.0，表示胎儿肺成熟。
- 若仅第1管液面出现泡沫环，为临界值，L/S比值在1.5～2.0之间。
- 若2管液面均未出现泡沫环为阴性，L/S比值≤1.49，提示胎儿肺未成熟。
第15页：羊水化学与免疫学检验
第三节：羊水化学与免疫学检验一、甲胎蛋白（AFP ）【检测原理】火箭免疫电泳法放射火箭免疫电泳法放射免疫法酶联免疫吸附法
第16页：参考范围、临床意义
- 参考范围
- ①妊娠15周：40mg/L。
- ②妊娠32周以后：25mg/L。
- 临床意义
1．AFP减低见于葡萄胎、唐氏综合征。
第17页：消化道畸形胎儿、先天性肾病
- AFP增高
- ①开放性神经管缺陷的胎儿。
- ②脐膨出、消化道畸形胎儿。
- ③先天性肾病、先天性食管闭锁、胰腺纤维囊性变、双胎、死胎等。
- ④染色体异常、糖尿病、先兆子痫、母婴Rh血型不合等。
- ⑤羊膜穿刺所致的胎血污染。
第18页：胆碱酯酶ChE测定
二、胆碱酯酶【检测原理】ChE测定：丙酰硫代胆碱或乙酰胆碱作为底物，2-硝基苯甲酸为显色剂的速率法或终点法。AChE测定：聚丙烯酰胺凝胶电泳分析法。
- 参考范围
AChE＜10.43U/L。
第19页：临床意义
- 临床意义
- 1.羊水中AChE活性增高与胎儿开放性神经管畸形有高度的相关性。
- 2.AChE/PChE比值：＞0.27者可诊断为神经管缺损，≤1.0者可诊断为开放性腹壁缺陷胎儿。
- 3.AChE活性测定：可纠正羊水AFP的假阳性。
第20页：卵磷脂与鞘磷脂薄层层析色谱法
三、卵磷脂与鞘磷脂【检测原理】薄层层析色谱法（thin-layerchromatography;TLC）。
- 参考范围
L/S比值≥2.0。
第21页：临床意义
- 临床意义
L/S为1.50～1.99:表示肺脏发育不够成熟，有IRDS可能；
- L/S＜1.49
- 表示肺脏不成熟，IRDS (特发性呼吸窘迫综合征)严重；
- L/S为2.0～3.4
- 表示肺脏已成熟；
- L/S为3.5～3.9
- 表示肺脏肯定成熟；
- L/S＞4.0
- 表示过熟儿。
第22页：肌酐肌酐与苦味酸反应
四、肌酐【检测原理】肌酐与苦味酸反应，生成橘红色的苦味酸肌酐复合物。肌酐测定方法有去蛋白终点法和速率法。
- 参考范围
妊娠37周：＞176.8μmol/L。
第23页：临床意义
- 临床意义
判断胎儿肾脏成熟度，准确率高。妊娠37周时，羊水肌酐：＞176.8μmol/L提示胎儿肾脏成熟；为132.6～176.7μmol/L为临界值；＜132.5μmol/L提示胎儿肾脏未成熟。
第24页：睾酮ELISA法或放射免疫法
五、睾酮【检测原理】ELISA法或放射免疫法。
- 参考范围
- ①男性胎儿：（224±11）μg/L。
- ②女性胎儿（39±2）μg/L。
第25页：临床意义
- 临床意义
- 1.预测胎儿性别。
- 2.妊娠合并糖尿病、母婴Rh血型不合、无脑儿羊水睾酮水平可降低。
- 3.结合染色体检查, 诊断胎儿性疾病。
第26页：雌三醇ELISA法或放射免疫法
六、雌三醇【检测原理】ELISA法或放射免疫法。
- 参考范围
妊娠末期：0.8～1.2mg/L
第27页：临床意义
- 临床意义
- 1.直接反映胎儿-胎盘功能。
- 2.间接的反映胎儿在宫内发育的情况。
- ①雌三醇＜1.0mg/L，胎儿预后不良
- ②雌三醇突然下降，可能为先兆流产。
- ③雌三醇减低，多见于母婴Rh血型不合、妊娠合并糖尿病、重度妊娠高血压综合征时的宫内死胎。
- ④雌三醇持续性处于低值者，可见于胎盘性硫酸酯酶缺乏症
第28页：胆红素光谱分析
七、胆红素【检测原理】光谱分析法，改良J-G法，胆红素氧化酶法和二甲亚砜（DMSO）法。
- 参考范围
＜1.71μmol/L（△A450＜0.02）。
第29页：胆红素光谱分析（临床意义）
- 临床意义
- ①判断胎儿安危、观察胎儿肝脏成熟程度的胆红素水平。
- ②监测胎儿溶血程度，以决定分娩时机。
第30页：葡萄糖葡萄糖氧化酶
八、葡萄糖【检测原理】葡萄糖氧化酶（GOD）法，己糖激酶（HK）法，邻甲苯胺（O-TB）法。
- 参考范围
＜0.56mmol/L。
第31页：临床意义
- 临床意义
- 1.判断胎儿肾脏成熟程度的指标。＜0.56mmol/L，提示胎儿肾脏发育成熟。＞0.80mmol/L，提示胎儿肾脏不成熟。
- 2.但判断肾脏成熟程度的精确度不如羊水肌酐。
第32页：淀粉酶碘-淀粉酶比色法
九、淀粉酶【检测原理】碘-淀粉酶比色法，对-硝基苯麦芽庚糖苷（4NP-G7）法。
- 参考范围
300 Somogyi U/L。
第33页：临床意义
- 临床意义
- 主要用于判断胎儿唾液腺成熟程度。
- 1.大于300 Somogyi U/L，提示胎儿唾液腺成熟；2.200～300 Somogyi U/L为临界值
- 3.小于200 Somogyi U/L为胎儿唾液腺不成熟。
第34页：反三碘甲状腺原氨酸RIA法
十、反三碘甲状腺原氨酸【检测原理】RIA法。
- 参考范围
2.62～8.31nmol/L。
- 临床意义
用于诊断胎儿甲状腺疾病。水平降低见于胎儿甲状腺功能减退。
第35页：血型物质
- 十一、血型物质
- 1.ABH分泌型血型的预测【检测原理】羊水中分泌的血型物质可将相应抗血清中抗体中和。
第36页：本章要点（Key Points）
Judgement of blood typeResultant of agglutinationanti-A serumanti-B serumanti-H serumsecretion of A blood group-4+4+Secretion of B blood group4+-4+secretion of O blood group4+4+-secretion of ABblood group--4+Non-secretion of blood group4+4+4+
第37页：血型酶的测定、检测原理
- 2. ABH（O）血型酶的测定【检测原理】
- A基因产生的N-乙酰氨基半乳糖转移酶，形成A血型物质。B基因产生的D-半乳糖转移酶，形成B血型物质。
- 当有糖供体、Mn++与O型红细胞共同孵育时，羊水中的转移酶可在红细胞膜上合成A或B物质。
- 利用血型测定的方法可检测非分泌型胎儿的血型。
第38页：临床意义
- 临床意义
- 为有严重ABO同种免疫史的孕妇非分泌型的胎儿血型鉴定提供了可能。
- 为在位于ABO基因部位的遗传性疾病的产前诊断提供了可能。
第39页：羊水显微镜检验
第四节羊水显微镜检验一、羊水脂肪细胞计数【检测原理】脂肪细胞计数是反映胎儿皮肤成熟程度的指标。将羊水涂片用尼罗蓝水溶液染色后，显微镜下观察，计数200～500个细胞，计算脂肪细胞阳性率。
第40页：羊水显微镜检验（参考范围、临床意义）
- 参考范围
妊娠34周前羊水脂肪细胞≤1%；34～38周为1%～10%；38～40周为10%～15%；40周以后大于50%。
- 临床意义
大于20%为胎儿皮肤成熟的指标。10%～20%为临界值。小于10%为皮肤不成熟。大于50%为皮肤过熟。
第41页：羊水快速贴壁细胞计数
- 二、羊水快速贴壁细胞计数【检测原理】1.正常羊水细胞需要4～5d才能贴壁生长。
- 2.胎儿畸形，如神经管缺陷及脐疝畸形时，羊水细胞仅需20h即可贴壁生长，此种细胞称为快速贴壁细胞(RAC)，具有贴壁生长快、活细胞贴壁率高的特点。通过计算活细胞贴壁率，来判断有无畸形。
第42页：参考范围、临床意义
- 参考范围
＜4%。
- 临床意义
RAC主要用于胎儿畸形的诊断。脐疝畸形的RAC为9%～12%，无脑儿的RAC为100%。
第43页：
第44页：临床意义
- 临床意义
- 风疹病毒是引起胎儿畸形的病毒之一
- ①妊娠1～2周感染风疹病毒者，胎儿严重畸形发生率为30%～80%
- ②妊娠12～18周感染风疹病毒者，10%～20%胎儿可有智力障碍和听力缺陷
- ③妊娠18周以后感染风疹病毒的危害性很低。
第45页：巨细胞病毒检查
巨细胞病毒检查巨细胞病毒是疱疹病毒的一种。WHO已将其列为引起新生儿出生缺陷的主要病原体。3. 单纯疱疹病毒检查单纯疱疹病毒是疱疹病毒的一种。与胎儿和新生儿有关的主要是Ⅱ型。
第46页：弓形虫
- 二、弓形虫【检测原理】①组织学：可直接寻找弓形虫的滋养体、包囊或卵囊等。
- ②血清学：有Sabin-Feldman染色试验、补体结合试验、间接荧光抗体试验或间接血凝试验等。
- ③PCR：以B1基因、200-300重复序列（AF146527）或16S rDNA为目的基因。
第47页：弓形虫（临床意义）
- 临床意义
可引起弓形虫病，为人畜共患疾病。孕妇感染弓形虫后，除了通过胎盘感染胎儿外，还可经过羊水进入消化道而使胎儿感染。孕妇感染弓形虫后，可造成流产、早产、胎儿小头畸形、脑积水、视力障碍、智力发育缺陷等畸形。
第48页：羊水检验的质量控制与临床应用
- 第六节羊水检验的质量控制与临床应用一、质量控制
- ①AFP：母体AFP检测连续2次阳性时，再考虑是否行羊水AFP检查。
- ②羊水胆红素检测：要求避光。
- ③羊水泡沫试验：新鲜标本或4℃冷藏。操作时需用力振荡。
第49页：临床应用
第50页：产前诊断
- （一）产前诊断
- 1．神经管缺陷性疾病（NTD ）①母体血清和羊水AFP增高。
- ②羊水AFP增高除了见于NTD以外，还可见于死胎、先天性食管闭锁及某些染色体病。
- ③RAC对诊断NTD具有高度的特异性和灵敏度。无脑儿的RAC贴壁率为100%，脐疝畸形RAC贴壁率为9%～12%。
第51页：遗传性代谢病
- 遗传性代谢病
- ①羊水酶学检查。
- ②限制性片段长度多态性连续分析。
- ③羊水PCR检查。减少遗传性疾病的发生率。如脂代谢病、粘多糖沉积病、氨基酸代谢病、碳水化合物代谢病等。
第52页：染色体病常染色体异常 先天愚型
染色体病常染色体异常--先天愚型(21-三体)性染色体异常--先天性卵巢发育不全症(45,X)明确诊断--可终止妊娠。
第53页：性连锁遗传病
- 性连锁遗传病
- 常见的性连锁遗传病有血友病、原发性低丙种球蛋白血症、肌营养不良、黏多糖沉积病Ⅱ型、糖原代谢病Ⅱ型、红绿色盲、自毁面容综合征等。
- 对X连锁隐性遗传病，如血友病、红绿色盲、假性肥大型肌营养不良症等家族史的胎儿，及早确定胎儿性别，男胎应终止妊娠。
第54页：评估胎儿成熟度
（二）评估胎儿成熟度
第55页：肺成熟度
- 1.肺成熟度
- 2.肾成熟度
- 3.肝成熟度
- 4.唾液腺成熟度
- 5.皮脂腺成熟度
第56页：即弓形虫、风疹病毒
- （三）诊断TORCH感染
- TORCH是一组病原生物的英文名称缩写，即弓形虫（toxoplasma gondii）、其他病原微生物（others）、风疹病毒（rubella virus）、巨细胞病毒（cytomegalovirus）、单纯疱疹病毒（herpes simplex virus）第一个英文字母的组合。
第57页：临床意义
- 临床意义
这组病原生物常可通过胎盘传给胎儿，引起围产期感染，导致流产、死胎、早产、先天畸形和智力障碍等各种异常。因此，TORCH感染的检验已成为许多地区孕期检查的常规项目。
第58页：本章要点小结
羊水检验是一种较为安全、可靠的诊断方法，对产前诊断、评估胎儿成熟度、筛选先天性遗传病、和检查宫内感染等有重要价值。总结
第59页：本章要点小结
本章要点羊水颜色和透明度的变化与意义。泡沫试验的方法学评价与质量控制。胎儿成熟度的评价指标及意义。TORCH感染的检查指标。胎儿发育异常的评价指标及意义。
