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本课件为微生物学第一章「原核微生物」,先按球状、杆状、螺旋状梳理细菌的基本形态与染色方法,再逐层讲解细胞壁、细胞膜、细胞质内含物、核区等一般构造与糖被、鞭毛、菌毛、芽孢等特殊构造;随后介绍细菌的繁殖与群体形态,并分别讲解放线菌、蓝细菌以及支原体、立克次氏体、衣原体三类特殊原核微生物。
第一章原核微生物,依次讲解细菌、放线菌、蓝细菌以及支原体、立克次氏体、衣原体。
微生物按细胞结构可做如下划分:
古生菌(Archaea)在进化谱系上与真细菌及真核生物相互并列,且与后者关系更近,而其细胞构造却与真细菌较为接近,同属于原核生物。
本章四节的内容要点:
第一节细菌(bacteria) 一、细胞的形态构造及其功能 (一)形态和染色。
细菌的基本形态有三类:球状、杆状、螺旋状。
1、球状:细胞个体呈球形或椭圆形,不同种的球菌在细胞分裂时会形成不同的空间排列方式,常被作为分类依据。
2、杆状:细胞呈杆状或圆柱形,一般其粗细(直径)比较稳定,而长度则常因培养时间、培养条件不同而有较大变化。
常见杆菌举例:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。
常见杆菌举例:铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),又称绿脓杆菌,为常见的条件致病菌。
常见杆菌举例:结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis),菌体细长略弯曲,抗酸染色阳性。
常见杆菌举例:炭疽杆菌(Bacillus anthracis)——炭疽病的病原菌。
常见杆菌举例:破伤风梭菌(Clostridium tetani),为厌氧产芽孢梭菌。
3、螺旋状:分为弧菌、螺旋菌、螺旋体菌三型。
弧菌:菌体只有一个弯曲,其程度不足一圈,形似「C」字或逗号,鞭毛偏端生。代表种:蛭弧菌、霍乱弧菌。
螺旋菌:菌体回转如螺旋,螺旋数目和螺距大小因种而异;鞭毛二端生,细胞壁坚韧,菌体较硬。
螺旋体菌:菌体柔软,用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内。代表种:梅毒密螺旋体。
4、大小与重量:细菌的大小测量单位是 μm(微米)。
大小的测量方法:
5、染色:由于细菌细胞微小又透明,一般先要经过染色才能作显微观察。
(二)细胞的结构:
1、细菌细胞的一般构造 1)细胞壁(cell wall):位于细胞表面、内侧紧贴细胞膜的一层较为坚韧、略具弹性的细胞结构,约占干重的 10%~25%。
不同细菌细胞壁的化学组成和结构不同,通过革兰氏染色法可将所有的细菌分为革兰氏阳性(G+)和革兰氏阴性(G-)。
(1)革兰氏阳性菌细胞壁:由肽聚糖和磷壁酸组成。
A、肽聚糖:由四个氨基酸分子按 L 型与 D 型交替方式连接而成。
双糖单位中的 β-1,4-糖苷键很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解,从而引起细菌因肽聚糖细胞壁「散架」而死亡。
G+ 菌细胞壁化学组成以肽聚糖(peptidoglycan)为主,这是原核微生物所特有的成分,占细胞壁物质总量的 40%~90%。
B、磷壁酸:又名垣酸,是大多数 G+ 菌所特有的成分,约占细胞壁成分的 10%。
(2)革兰氏阴性菌的细胞壁成分:G- 细胞壁的组成和结构比 G+ 更复杂,主要成分为脂多糖、磷脂、脂蛋白、肽聚糖。
G- 也有肽聚糖,仅占细胞壁干重的 5%~10%。肽聚糖结构与 G+ 相同,但短肽尾中的 3 号位上 L-Lys 往往被其他二氨酸取代。
外壁层是 G- 细菌细胞壁所特有的结构,位于壁的最外层,化学成分为脂多糖、磷脂和若干种外蛋白。
(3)G+ 细菌与 G- 细菌细胞壁的比较:两者在肽聚糖含量与层数、磷壁酸有无、外壁层(脂多糖)有无等方面存在系统差异,是革兰氏染色反应的结构基础。
(4)革兰氏染色:由 C. Gram(革兰)于 1884 年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。
(5)古生菌的细胞壁:图为生活于深海热喷口附近极端高温环境中的古生菌(These Archaea species live in extreme heat near deep sea vents)。
古生菌大多为嗜极菌。除热原菌属没有细胞壁以外,其余都具有与真细菌功能相似的细胞壁。
(6)细胞壁缺陷细菌:
大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等 20 多种细菌中均有发现,被认为可能与针对细胞壁的抗菌治疗有关。
特点:
特点:
与原生质体相比,它对外界环境具有一定的抗性,可在普通培养基上生长。
2)细胞膜(1)概念:细胞质膜(cytoplasmic membrane),又称质膜、细胞膜或内膜,是紧贴在细胞壁内侧、包围着细胞质的一层柔软、脆弱、富有弹性的半透性薄膜,厚约 7~8 nm,由磷脂(占 20%~30%)和蛋白质(占 50%~70%)组成。
(2)细胞膜的生理功能:
(4)间体(mesosome,或中体):细胞质膜内褶而形成的囊状构造,其中充满着层状或管状的泡囊,多见于革兰氏阳性细菌。
与青霉素酶分泌、DNA 复制、分配以及细胞分裂有关;但也可能仅是电镜制片时因脱水操作而引起的一种赝像。
3)细胞质和内含物(1)概念:细胞质(cytoplasm)是细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶状、颗粒状物质的总称,含水量约 80%。
主要成分为核糖体、贮藏物、多种酶类和中间代谢物、质粒、各种营养物和大分子的单体等,少数细菌还有类囊体、羧酶体、气泡或伴孢晶体等。
(2)核糖体(ribosomes):细胞质中的一种核糖核蛋白的颗粒状物质,由核糖核酸(60%)和蛋白质(40%)组成,常以游离状态或多聚核糖状态分布于细胞质中,沉降系数均为 70S,是蛋白质的合成场所。
(3)贮藏物(reserve materials):一类由不同化学成分累积而成的不溶性沉淀颗粒,主要功能是贮存营养物。
① 聚-β-羟丁酸(PHB):类脂性质的碳源类贮藏物。巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)在含乙酸或丁酸的培养基中生长时,细胞内贮藏的 PHB 可达其干重的 60%。
② 多糖类贮藏物:真细菌中以糖原为主。糖原粒较小,不染色需用电镜观察,用碘液染成褐色后可在光学显微镜下看到;有的细菌积累淀粉粒,用碘液染成深蓝色。
③ 异染粒(metachromatic granules):颗粒大小为 0.5~1.0 μm,是无机偏磷酸的聚合物,一般在含磷丰富的环境下形成。功能是贮藏磷元素和能量,并可降低细胞的渗透压。
图为暗视野显微镜下看到的迂回螺菌(Spirillum volutans)异染粒(迂回体)。
⑤ 硫粒(sulfur globules):很多真细菌在进行产能代谢或生物合成时,常涉及对还原性的硫化物如 H2S、硫代硫酸盐等的氧化。
在环境中还原性硫丰富时,常在细胞内以折光性很强的硫粒形式积累硫元素;当环境中还原性硫缺乏时,可被细菌重新利用。
(4)气泡(gas vacuoles):许多光合营养型、无鞭毛运动的水生细菌中存在的充满气体的泡囊状内含物,大小为 0.2~1.0 μm × 75 nm,内由数排柱形小空泡组成,外有 2 nm 厚的蛋白质膜包裹。
功能:调节细胞比重以使细胞漂浮在最适水层中,获取光能、O2 和营养物质。
4)核区(nuclear region or area):原核生物所特有的、无核膜结构、无固定形态的原始细胞核。
2、细菌细胞的特殊结构 1)糖被(glycocalyx)(1)概念:包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质。
按有无固定层次、层次厚薄可细分为:
(2)糖被的特点:
(3)糖被的功能:
2)鞭毛(flagellum,复数 flagella)(1)概念:某些细菌细胞表面着生的一至数十条长丝状、螺旋形的附属物,具有推动细菌运动的功能,为细菌的「运动器官」。
鞭毛的有无和着生方式:
(2)观察和判断细菌鞭毛的方法:
3)菌毛(fimbria,复数 fimbriae):长在细菌体表的纤细、中空、短直、数量较多的蛋白质类附属物,具有使菌体附着于物体表面的功能。
每个细菌约有 250~300 条菌毛。有菌毛的细菌一般以革兰氏阴性致病菌居多,借助菌毛可把它们牢固地粘附于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道等的粘膜上,进一步定植和致病。
4)性毛(pili,单数 pilus):构造和成分与菌毛相同,但比菌毛长,数量仅一至少数几根。
性毛一般见于革兰氏阴性细菌的雄性菌株(供体菌)中,功能是向雌性菌株(受体菌)传递遗传物质;有的性毛还是 RNA 噬菌体的特异性吸附受体。
5)特殊的休眠构造——芽孢(1)概念:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体,称为芽孢(endospore 或 spore),偶译「内生孢子」。
(2)细菌芽孢的特点:
(3)芽孢的形成与芽孢的萌发过程:营养细胞在营养耗尽或环境恶化时启动芽孢形成,成熟芽孢在适宜条件下萌发,重新转变为营养态细胞。
(4)芽孢的耐热机制:芽孢与母细胞相比,在化学组成、细微结构、生理功能等方面都完全不同。
渗透调节皮层膨胀学说:芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差,皮层的离子强度很高,产生极高的渗透压夺取芽孢核心的水分,结果造成皮层的充分膨胀;核心部分的细胞质却变得高度失水,因而具有极强的耐热性。
(6)伴孢晶体(parasporal crystal):少数芽孢杆菌,例如苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ 内毒素,称为伴孢晶体。
特点:不溶于水,对蛋白酶类不敏感,容易溶于碱性溶剂;对 200 多种昆虫尤其是鳞翅目幼虫有毒杀作用,可制成有利于环境保护的生物农药——细菌杀虫剂。
伴孢晶体的杀虫过程:
二、细菌的分裂:细菌主要通过无性繁殖产生后代,其繁殖方式是二分裂,简称裂殖。
繁殖过程分为三个连续步骤:① 核的分裂和隔膜的形成;② 横隔壁形成;③ 子细胞分裂。另外有的细菌还存在三分裂和复分裂。
(三)细菌的繁殖 1、裂殖(fission) 1)二分裂(binary fission):一个母细胞对半分裂为两个子细胞。
三、细菌的群体形态(一)在固体培养基上(内)的群体形态:形成肉眼可见的菌落(colony),其大小、形状、边缘、隆起、颜色与透明度等都是菌种鉴定的依据。
(二)在半固体培养基上(内)的群体形态:
(三)在液体培养基上(内)的群体形态:可表现为均匀浑浊、沉淀生长或表面形成菌膜、菌环等。
第二节放线菌(Actinomyces)(一)概念:在形态上具有分枝状菌丝、菌落形态与霉菌相似、以孢子进行繁殖的类群,曾被描述为「介于细菌与丝状真菌之间又接近细菌的一类丝状原核生物」。
近代生物学技术证明,放线菌实际上属于细菌范畴内的原核微生物,只不过其细胞形态为分枝状菌丝;它是具有菌丝、以孢子进行繁殖、革兰氏染色阳性的一类原核微生物。
(二)形态与结构:
源文「菌丝直径与杆菌类似,约1mm」单位应为 μm(微米),本页已按教材标准值更正。
(三)生长与繁殖:繁殖方式包括无性分生孢子与菌丝断裂,后者常见于液体培养中,工业发酵生产抗生素时都以此法大量繁殖放线菌。
注意:细菌的芽孢是休眠体,而放线菌的孢子是繁殖体。
(四)菌落形态:按能否产生大量分枝和气生菌丝分为两类。
| 类型 | 代表属 | 菌落特征 |
|---|---|---|
| 能产生大量分枝和气生菌丝 | 链霉菌 | 菌落质地致密,与培养基结合紧密,小而不蔓延,不易挑起或挑起后不易破碎 |
| 不能产生大量菌丝体 | 诺卡氏菌 | 粘着力差,粉质,针挑起易粉碎 |
(五)分布特点及与人类的关系:
第三节蓝细菌(Cyanobacteria) 1、概念:也称蓝藻或蓝绿藻(blue-green algae),是一类含有叶绿素 a、能以水作为供氢体和电子供体、通过光合作用将光能转变成化学能、同化 CO2 为有机物质的光合细菌。
以前曾归于藻类,因为它和高等植物一样具有光合色素——叶绿素 a,能进行产氧型光合作用。
2、特性:
3、蓝细菌的分群:
第四节支原体(Mycoplasma)、立克次氏体(Rickettsia)和衣原体(Chlamydia):三者均为革兰氏阴性细菌,其大小和特性均介于通常的细菌与病毒之间。
(一)支原体(Mycoplasma):无细胞壁、呈多形态,是能在无生命培养基上生长繁殖的最小原核微生物。
(二)立克次氏体(Rickettsia) 1、概念:大小介于通常的细菌与病毒之间,在许多方面类似细菌,专性活细胞内寄生的原核微生物。
H. T. Ricketts 于 1909 年首次发现斑疹伤寒的病原体,并因研究此病而牺牲,1916 年人们以他的名字命名这类病原体作为纪念。
2、特性 1)某些性质与病毒相近:
源文个体大小「球状体 0.2-0.5 mm;杆状体 0.3-0.5 × 0.3-2 mm」单位应为 μm,本页已按教材标准值更正:球状体 0.2~0.5 μm,杆状体 0.3~0.5 μm × 0.3~2 μm。
2)从一种宿主传至另一宿主的特殊生活方式:主要以节肢动物(虱、蜱、螨等)为媒介,寄生在它们的消化道表皮细胞中,然后通过节肢动物叮咬和排泄物传播给人和其他动物。
(三)衣原体(Chlamydia) 1、概念:介于立克次氏体与病毒之间,能通过细菌滤器,专性活细胞内寄生的一类原核微生物。
过去误认为「大病毒」,但它们的生物学特性更接近细菌而不同于病毒。图为在宿主细胞内观察到的衣原体微菌落(microcolony)。
2、特性:
沙眼衣原体是人类沙眼的病原体,可引起结膜炎、角膜炎、角膜血管翳等临床症状,成为致盲的重要原因。
源文个体直径「0.2-0.3 mm」单位应为 μm,本页已按教材标准值更正。
3、生活史:原体(elementary body)具有感染性,侵入宿主细胞后转变为始体(reticulate body),始体以二分裂方式增殖,随后再分化形成新的原体并释放,完成一个发育周期。
支原体、立克次氏体、衣原体与细菌、病毒的比较:主要从大小、细胞壁有无、能否人工培养、核酸类型、对抗生素敏感性及繁殖方式等方面进行横向比较。
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