页数:36页文件大小:7.98 MB来源: 动物生物化学ppt课件
本课件围绕核酸的化学组成、DNA与RNA的结构特点、超螺旋与核小体组装,以及核酸的理化性质与分子杂交展开,按章节顺序组织图示与要点说明,配套完整文字版,便于对照课件图片理解概念、代谢途径与关键结论。
第4章核酸Nucleic acids
本页为图示页,说明核酸的化学组成与空间结构。
本章主要内容
acids)——19世纪60年代
acids)——19世纪60年代,由Miescher发现。1889年Altmann将其纯化,证明核酸是含磷的酸性生物大分子。20世纪40年代,Avery确定核酸是遗传信息的载体,普遍存在于生命有机体中。
脱氧核糖核酸,DNA (Deoxyribonucleic Acid),在原核细胞是核质的成分,在真核细胞DNA与蛋白质结合形成染色体,少量存在于线粒体。
一个生命有机体的每个体细胞(除生殖细胞外)都含有相同质和量的DNA,包含了它的全部遗传信息。核糖核酸,RNA (Ribonucleic Acid)主要存在于胞液内,真核细胞的核仁和线粒体也含有少量RNA。
RNA的量是变动的。主要有信使RNA(mRNA),转运RNA(tRNA)和核糖体RNA(rRNA)。病毒或者是DNA病毒或者是RNA病毒
1 核酸的化学组成
1.1 碱基(base)
核酸中的嘧啶碱基核酸中的嘌呤碱基其他的稀有碱基
1.2 核糖(ribose)
DNA含脱氧核糖RNA含核糖
1.3 核苷(nucleoside)
核苷(上)与脱氧核苷(下)
1.4 核苷酸(nucleotide)
核糖核苷酸(上)与脱氧核糖核苷酸(下)
腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)3′
5′-环状腺苷酸(cAMP)
DNA分子和RNA分子中化学组成的差别:下表列出相关数据。
| 组成成分 | DNA | RNA |
|---|---|---|
| 嘌呤碱 | 腺嘌呤、鸟嘌呤 | 腺嘌呤、鸟嘌呤 |
| 嘧啶碱 | 胞嘧啶、胸腺嘧啶 | 胞嘧啶、尿嘧啶 |
| 戊糖 | D-2′-脱氧核糖 | D-核糖 |
| 酸 | 磷酸 | 磷酸 |
2 2.1 核酸中核苷酸的连结方式DNA片段
2.1 核酸中核苷酸的连结方式DNA片段RNA片段注意核苷酸之间的连接方式是3’,5’-磷酸二酯键
2.2 DNA分子的大小天然存在的DNA分子最显
DNA分子的大小天然存在的DNA分子最显著的特点是很长,分子质量很大,一般在106-1010。DNA的碱基组成有如下特点
2.3 RNA:占细胞中RNA总量
RNA:占细胞中RNA总量的3%-5%,分子量大小不一,不稳定,代谢活跃,更新迅速,是合成蛋白质的模板。rRNA:细胞中含量最多的RNA,核糖体的组成成分。tRNA:约占细胞中RNA总量的15%。
约由75-90个核苷酸组成。蛋白质合成中携带活化的氨基酸RNA的碱基组成:A、G、C、U, 含少量的稀有碱基RNA分子的类型:mRNA、rRNA、tRNA
2.4 核酸的一级结构
本页为图示页,说明核酸的化学组成与空间结构。
子由两条多聚脱氧核糖核苷酸链
子由两条多聚脱氧核糖核苷酸链(简称DNA单链)组成
螺旋的直径约为2nm
螺旋包含10对碱基,其高度为3.4nm。碱基平面之间的垂直距离0.34nm
碱基互补配对的氢键数目
对氢键
Watson和Crick所提出的模型
B-DNA。不同构型的DNAB型是最稳定的构型
1957年发
现在基因的调控区或染色质的重组部位有DNA的三螺旋结构
2.6 超螺旋DNA指DNA
双螺旋通过弯曲和扭转所形成的特定构象,即DNA的三级结构
DNA超螺旋的三种构象
是由于缠绕不足形成的负超螺旋A 是线性的DNA分子
致密形式存在于细胞核的染色体中
以致密形式存在于细胞核的染色体中。染色体的基本单位是核小体(nucleosome)核小体:由DNA和组蛋白共同构成。
核心组蛋白:4种组蛋白(H2A , H2B , H3 ,H4)形成的8聚体DNA:以负超螺旋缠绕在核心组蛋白上H1在核小体之间起连接作用染色体的基本单位是核小体(nucleosome)
核小体的串珠状结构
本页为图示页,说明核酸的化学组成与空间结构。
分子中常可以见到局部区域碱基互补形成的螺
分子中常可以见到局部区域碱基互补形成的螺旋结构,称为“茎环”结构或“发卡”结构tRNARNA的结构
3 3.1 紫外吸收的特性嘌呤和嘧啶在260
3.1 紫外吸收的特性嘌呤和嘧啶在260 nm有特异的吸收峰,这个性质用于核酸的分析
3.2 溶解性溶于偏碱的溶剂中,可以为乙醇沉淀,容易受机械作用力而
3.3 黏性DNA溶液有高度的黏性
3.4 DNA分子的变性
DNA双螺旋的有序结构受各种理化因子,如热、酸碱、变性剂、有机溶剂以及稀释的作用,转变为无规则的线团结构。变性的特征增色效应,黏度和比旋下降,沉降系数增加,生物学活性丧失
DNA解链曲线增色效应
hyperchromic effect)核酸分子加热变性时,其在260nm处的紫外吸收急剧增加的现象。Tm值:当紫外吸收变化达到最大变化的半数值时,此时所对应的温度称为熔解温度(Tm )、变性温度或中点解链温度
影响Tm值的因素1.溶液的性质2.DNA
中碱基组成的影响大肠杆菌DNA在不同浓度KCl溶液下的熔融温度曲线
3.4 复性:变性DNA分开的两股链在适当条件下
复性:变性DNA分开的两股链在适当条件下重新生成双链结构的过程退火(annealing):热变性的DNA经缓慢冷却复性的过程
3.5 分子杂交当两条不同来源的DNA
RNA)链或DNA链与RNA链之间存在互补的碱基序列时,在一定条件下可以通过互相配对形成双螺旋分子,这种分子称为杂交分子。形成杂交分子的过程称为分子杂交(molecular hybridization)。
核酸探针(nucleic acid probe):某一具有特定序列并且用同位素或其他化学方法标记的DNA或RNA片段。通常是人工合成的。分子杂交图
3.5 分子杂交技术的应
研究不同物种或个体DNA之间的亲缘关系
于鉴定DNA的Southern
印迹技术
本章结束
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