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11 第十一章 基因信息的贮存与表达.pptx

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本课件先复习核酸的结构基础与变性复性,再沿中心法则展开:DNA的半保留复制、参与复制的酶类与冈崎片段、逆转录与损伤修复;随后讲转录的条件、过程与hnRNA的加帽连尾剪辑加工;最后详述翻译的三类RNA作用、密码子特点与核蛋白体循环的进位转肽移位,并补充基因工程与聚合酶链反应。

第十一章目录页,列出中心法则、DNA与RNA生物合成、蛋白质生物合成与基因工程五节
分子基础复习目录页,列出核酸分类功能、DNA与RNA组成结构及变性复性杂交四部分
核酸分类功能复习图,区分DNA的遗传物质基础作用与三类RNA在蛋白质合成中的分工
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第1页:第十一章 基因信息的储存和表达

第十一章 基因信息的储存和表达

  • 复习 基因信息的储存和表达的分子基础
  • 第一节 遗传的中心法则
  • 第二节 DNA的生物合成
  • 第三节 RNA的生物合成
  • 第四节 蛋白质的生物合成
  • 第五节 基因工程

第2页:分子基础复习目录

复习 基因信息的储存和表达的分子基础

  • 一、核酸的分类与功能
  • 二、DNA的分子组成和结构
  • 三、RNA的分子组成和结构
  • 四、核酸的变性、复性与杂交

第3页:核酸的分类与功能

一、核酸的分类与功能

脱氧核糖核酸(DNA)
遗传的物质基础;基因就是染色体中带有遗传信息的DNA的功能片段(DNA分子中特定的碱基排列顺序——碱基序列)
核糖核酸(RNA)
mRNA(信使RNA):蛋白质合成的直接模板
tRNA(转运RNA):活化与转运氨基酸
rRNA(核蛋白体RNA):充当装配机、提供场所
共同参与蛋白质的生物合成

第4页:DNA的分子组成和结构

二、DNA的分子组成和结构

(一)分子组成
A、G、T、C 和脱氧核糖及磷酸
Chargaff 规律
一种生物体所有体细胞DNA的碱基组成均相同
同一种生物体内,DNA分子的 A = T、G = C(嘌呤碱与嘧啶碱总量相等)
亲缘相近的生物碱基组成相似,反之亦然
(二)分子结构 1、一级结构
DNA链中 A、T、C、G 的序列;脱氧核糖核苷酸之间以磷酸二酯键相连

第5页:DNA双螺旋结构

2、空间结构(二级结构)——双螺旋结构

(1)结构要点
逆向平行双螺旋
碱基互补规律:A—T(两个氢键相连)、G—C(三个氢键相连)
双螺旋结构的稳定依靠碱基对间的氢键
(2)生物学意义
提出了遗传信息的贮存方式、DNA的复制机理
是DNA复制、转录和翻译的分子基础

第6页:碱基互补配对示意

本页为碱基互补配对示意:A 与 T 配对、G 与 C 配对。

说明:源文件本页仅标注“示意图”并附A、T、G、C字符,图示细节建议对照原课件图片核对。

第7页:四种碱基结构式

本页为四种含氮碱基的化学结构式:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)。

说明:源文件本页仅标注“示意图”并列出碱基名称,结构式细节建议对照原课件图片核对。

第8页:RNA的分子组成和结构特点

三、RNA的分子组成和结构

(一)分子组成与结构特点
1、组成:A、G、U、C 及少量稀有碱基(m7-G)、核糖、磷酸
2、一级结构:RNA链中 A、G、U、C 的序列
3、组成与结构特点:含有稀有碱基(由主要碱基修饰而来);多为单链结构,且碱基组成较不规律

第9页:tRNA的结构特点

1、tRNA

(1)一级结构的共同特点
(2)二级结构——三叶草形
3′-末端:CCA-OH(携带氨基酸的部位)
反密码环顶端:反密码子(识别 mRNA 上特定的密码子)
功能:活化与转运氨基酸

第10页:tRNA三叶草结构示意

本页为tRNA三叶草形二级结构示意,标注 5′-末端、反密码环与 3′-末端氨基酸臂的位置。

说明:源文件本页仅标注“示意图”,图示细节建议对照原课件图片核对。

第11页:mRNA与rRNA

2、mRNA——蛋白质合成的直接模板

密码子
mRNA 分子从 5′-端起读,每三个相邻的核苷酸(碱基)组成一个三联码,决定某种氨基酸
mRNA 分子的首尾结构
5′-端(首部):m7Gppp(7-甲基鸟苷三磷酸)
3′-端(尾部):poly-A(多聚腺苷酸)

3、rRNA——蛋白质合成的场所,起“装配机”的作用:含量最多(约80%),与多种蛋白质结合生成核蛋白体。

第12页:核酸的变性与Tm

四、核酸的变性、复性与杂交——(一)变性

1、概念
核酸双链间氢键断裂,双链结构解开形成两条单链的过程;变性因素:加热及化学处理(有机溶剂等)
2、特性
伴有高色(增色)效应:在 260 nm 的紫外吸收增强
熔点(Tm):DNA 达到 50% 变性时的温度
DNA分子中 G-C 组份愈多,Tm 值愈高,DNA 分子愈稳定,反之亦然

第13页:复性与分子杂交

(二)复性;(三)分子杂交

复性
因变性而解开的两条单链,在温度缓慢下降时重又聚合成双链结构;复性时伴有低(减)效应(260 nm 紫外吸收减弱);复性又称“退火”;变性后若温度迅速下降则不发生复性
分子杂交
以核酸的变性和复性为基础;不同来源的两条核酸单链,若有大致相同的碱基互补顺序,经退火处理可形成杂交双链
可发生在 DNA-DNA、DNA-RNA 和 RNA-RNA 之间

第14页:中心法则与DNA生物合成目录

第一节 遗传的中心法则;第二节 DNA的生物合成:先以中心法则说明遗传信息的流向,再分复制、逆转录与DNA损伤修复三部分展开DNA的生物合成。

  • (一)复制
  • (二)逆转录
  • (三)DNA的损伤和修复

第15页:遗传的中心法则

第一节 遗传的中心法则

复制
以DNA为模板指导DNA合成的过程;酶为DNA指导的DNA聚合酶(DDDP);原料 dNTP
转录
以DNA为模板指导RNA合成的过程;酶为DNA指导的RNA聚合酶(DDRP);原料 NTP
翻译
以mRNA为模板合成蛋白质
逆转录
以RNA为模板指导DNA合成

DNA →(复制)→ DNA →(转录)→ mRNA →(翻译)→ 蛋白质;RNA →(逆转录)→ DNA。

第16页:DNA的半保留复制

第二节 DNA的生物合成——一、复制

1、半保留复制
DNA的复制以半保留复制方式进行:子代DNA保留一条母链、新合成一条互补链
实验证明——同位素 15N 实验
应具备的条件
母链DNA作为模板(3′→5′)
四种 dNTP 作为原料
相应的酶类:DDDP 等
一小段 RNA 作为DNA聚合引物
方向
模板链走向 3′→5′,新链合成方向 5′→3′

第17页:参与复制的酶类

2、参与复制的酶类

(1)引物酶
一种特殊的RNA聚合酶;以DNA为模板、NTP为原料,催化一段引物RNA的合成;RNA引物为DNA合成提供 3′-OH
(2)解旋和解链酶类
解链酶:沿着复制叉促进两条互补链分离
解旋酶(拓扑异构酶):解旋,克服扭结现象
单链结合蛋白:固定已分离解旋的单链,便于复制

其他:DNA聚合酶、DNA连接酶。

第18页:DNA聚合酶与连接酶

(3)DNA聚合酶;(4)DNA连接酶

DNA聚合酶Ⅰ
多功能酶——聚合、填空、修补;充填冈崎片段之间的间隙;具有 5′→3′ 外切酶作用(切除引物和损伤部位)
DNA聚合酶Ⅲ
复制时起主要作用的酶——聚合、填空、修补
DNA连接酶
连接冈崎片段,形成完整的DNA链

第19页:DNA复制的过程

3、复制的过程

  1. 模板DNA先解链解旋(解链酶、解旋酶和单链结合蛋白)
  2. 引物酶作用,以 NTP 为原料合成 RNA 引物
  3. 在 dNTP 存在下由 DNA聚合酶Ⅲ催化,在 RNA 引物基础上合成DNA新链
  4. DNA聚合酶Ⅰ外切作用切除引物,空缺部位再由该酶填补
  5. DNA连接酶连接冈崎片段,形成完整的DNA分子

第20页:前导链与随后链

前导链、随后链与冈崎片段

前导链
合成方向与复制叉移动方向相同、进行连续复制的这一条新链
随后链
合成方向与复制叉移动方向相反、进行不连续复制的另一条新链
冈崎片段
随后链上不连续复制而成的DNA片段
方向
模板链走向 3′→5′,新链合成方向 5′→3′

第21页:逆转录

二、逆转录

概念与模式
以病毒RNA为模板,指导合成含有全部病毒遗传信息的DNA;酶与原料为 RDDP/dNTP
逆转录(酶)的意义
(1)逆转录酶存在于所有致癌RNA病毒中,与病毒致癌有关
(2)对中心法则进行了必要的补充
(3)有助于基因工程的实施(用于获得目的基因)

第22页:DNA的损伤和修复

(三)DNA的损伤和修复

1、DNA的损伤
因素:紫外线照射、碱基和核苷类似物、抗菌素及其类似物
2、DNA的修复
修复方式:切除修复、SOS修复、重组修复、光修复
主要修复机制——切除修复

第23页:转录的学习目录

第三节 RNA的生物合成:本节讲清转录的概念与条件、转录与复制的主要区别、转录的起始延长与终止过程,以及真核细胞中转录后的加工和修饰。

  • 一、转录的概念和条件
  • 二、转录与复制的区别
  • 三、转录的过程
  • 四、转录后的加工和修饰

第24页:转录的概念和条件

一、转录的概念和条件

1、概念
以DNA为模板,指导RNA合成的过程
酶:DNA指导的RNA聚合酶(DDRP);原料:NTP
2、条件
模板链DNA、DDRP、NTP
意义
转录是基因表达的第一步,也是最关键的一步;通过转录把 DNA 的信息传递给 RNA

第25页:转录的过程

三、转录的过程

酶与DNA模板的结合
DNA模板链、σ因子、β′亚基
转录的起始
σ因子识别启动子,β亚基参与
RNA链的延长
NTP 依次加入,RNA 链延伸
RNA链的终止与释放
ρ蛋白参与终止

第26页:转录后的加工和修饰

四、转录后的加工和修饰(真核细胞)

hnRNA → mRNA
核不均一RNA经加工成为成熟mRNA
加帽连尾
5′-端(首部):m7Gppp;3′-端(尾部):poly-A
剪辑加工
连接外显子(具有编码功能的序列),切除内含子(不具编码功能的序列)

第27页:蛋白质生物合成目录

第四节 蛋白质的生物合成:本节从翻译的概念出发,讲清参与翻译的三类RNA、原料与因子,进而展开核蛋白体循环的合成过程,最后联系干扰素与抗生素对蛋白质合成的影响。

  • 一、概念
  • 二、参与翻译所需的物质
  • 三、蛋白质合成的过程
  • 四、蛋白质生物合成与医学的关系

第28页:翻译的概念与参与物质

一、概念

翻译(蛋白质的生物合成)
以 mRNA 为模板,在其他 RNA 及因子的参与下合成蛋白质的过程
二、参与翻译所需的物质
1、三类 RNA(mRNA、tRNA、rRNA)
2、20种编码氨基酸(合成蛋白质的原料)
3、参与翻译的酶类
4、其它因子:起始因子、延长因子、终止和释放因子;K+、Mg2+;ATP、GTP

第29页:mRNA与密码子

mRNA在蛋白质合成中的作用

作用
提供直接模板
密码子(64种,分三类)
起始密码:1个(AUG,兼蛋氨酸)
终止密码:3个(UGA、UAA、UAG)
氨基酸信息码:61个
密码子的特点
密码的简并性、密码无标点符号、密码的通用性、密码的摆动性

第30页:tRNA在蛋白质合成中的作用

tRNA在蛋白质合成中的作用

  • 活化与转运氨基酸
  • tRNA的两个专用部位:3′-末端 CCA-OH(携带氨基酸的部位);反密码环顶端反密码子(识别 mRNA 上特定的密码子)
  • 摆动现象:反密码子与密码子配对时第三位碱基配对较灵活(如 I 与 U、C、A 配对)
  • mRNA 与 tRNA 反向平行配对(mRNA 5′→3′,tRNA 3′→5′)

第31页:rRNA与核蛋白体

rRNA在蛋白质合成中的作用

核蛋白体
由 RNA(rRNA)和多种蛋白质复合而成,是蛋白质生物合成的场所和装配机,由大小两个亚基组成
大亚基
有转肽酶活性和两个 tRNA 结合部位:给位(P位)、受位(A位)
小亚基
有 mRNA 结合部位

第32页:参与蛋白质合成的酶类

参与蛋白质合成的酶类

氨基酰-tRNA合成酶
催化氨基酸与其相应 tRNA 结合,生成氨基酰-tRNA
转肽酶
位于核蛋白体大亚基,催化肽键形成

第33页:蛋白质合成的过程

三、蛋白质合成的过程

1、氨基酸的活化
氨基酸 + tRNA →(氨基酰-tRNA合成酶,Mg2+,ATP)→ 氨基酰-tRNA
2、核蛋白体循环
起始、延长(进位、转肽、移位)、终止
3、后期的加工与修饰
切除N-端的蛋氨酸、部分肽段的水解、氨基酸残基的修饰、二硫键的形成

第34页:蛋白质合成与医学的关系

四、蛋白质生物合成与医学的关系

1、干扰素对蛋白质合成的影响
2、抗生素对蛋白质合成的影响
  • 链霉素:抑制原核细胞蛋白质合成的起始,并导致错误阅读mRNA密码
  • 四环素:与原核细胞30S亚基结合,抑制氨基酰-tRNA的结合
  • 氯霉素:抑制原核细胞50S大亚基的转肽酶活性
  • 红霉素:与原核细胞50S大亚基结合并抑制移位作用
  • 环己亚氨:抑制真核生物60S大亚基的转肽酶活性
  • 嘌呤霉素:是氨基酰-tRNA的类似物,结合在A位,造成未成熟肽链的终止,对真核、原核细胞均有效

第35页:核蛋白体循环:起始

核蛋白体循环(起始)

  • mRNA 5′-端 m7Gppp 与 3′-端 poly-A 之间为编码区
  • 起始密码 AUG 对应反密码 UAC,携带蛋氨酸(蛋)的 tRNA 进入 P 位
  • 第二个密码 ACU(苏)对应的 tRNA 准备进入 A 位

说明:源文件本页为核蛋白体循环示意图字符,文字依图中标注整理,建议对照原课件图片核对。

第36页:核蛋白体循环:进位

核蛋白体循环(进位)

  • A 位(受位)接受与 mRNA 密码子 ACU 相配的氨酰-tRNA(苏)
  • P 位(给位)已结合蛋氨酰-tRNA
  • 进位由延长因子参与,需 GTP 供能

说明:源文件本页为核蛋白体循环示意图字符,文字依图中标注整理,建议对照原课件图片核对。

第37页:核蛋白体循环:转肽

核蛋白体循环(转肽)

  • 在大亚基转肽酶作用下,P 位上的蛋氨酸(或肽链)转移到 A 位氨基酸的氨基上,形成肽键
  • A 位上形成二肽(蛋-苏),P 位 tRNA 空载

说明:源文件本页为核蛋白体循环示意图字符,文字依图中标注整理,建议对照原课件图片核对。

第38页:核蛋白体循环:移位

核蛋白体循环(移位)

  • 核蛋白体沿 mRNA 向 3′-端移动一个密码子(三个核苷酸)
  • 肽酰-tRNA 由 A 位移至 P 位,A 位空出准备接受下一个氨酰-tRNA
  • 移位需延长因子与 GTP

说明:源文件本页为核蛋白体循环示意图字符,文字依图中标注整理,建议对照原课件图片核对。

第39页:核蛋白体循环:第二轮进位

核蛋白体循环(第二轮进位—转肽)

  • 密码子 GCU 对应的丙氨酰-tRNA(丙)进入 A 位
  • 转肽后 P 位携带三肽(蛋-苏-丙)

说明:源文件本页为核蛋白体循环示意图字符,文字依图中标注整理,建议对照原课件图片核对。

第40页:核蛋白体循环:再次移位

核蛋白体循环(再次移位—转肽)

  • 移位后 A 位空出,等待下一个密码子对应的氨酰-tRNA
  • 肽链随进位—转肽—移位循环不断延长

说明:源文件本页为核蛋白体循环示意图字符,文字依图中标注整理,建议对照原课件图片核对。

第41页:核蛋白体循环:终止

核蛋白体循环(终止)

  • mRNA 上的终止密码(如 UGA)进入 A 位
  • 释放因子识别终止密码,肽链水解释放
  • 核蛋白体解离为大小亚基,mRNA 与 tRNA 释放

说明:源文件本页为核蛋白体循环示意图字符,文字依图中标注整理,建议对照原课件图片核对。

第42页:蛋白质合成附图过渡页

本页源文件仅含“返回主菜单”导航文字,依上下文位于核蛋白体循环图示与第五节基因工程之间,疑似为蛋白质合成相关附图或分节过渡页。

说明:源文件本页未提取到正文内容,仅有导航文字,建议对照原课件图片补充本页要点说明。

第43页:基因工程和聚合酶链反应

第五节 基因工程和聚合酶链反应

1、基因工程的概念
用人工方法将所要研究的基因(目的基因)在体外与载体DNA结合成重组DNA,然后引入宿主细胞,筛选出能表达重组DNA的活细胞,并加以纯化、传代、扩增成为克隆
2、基因工程的简要步骤
可归纳为分、切、接、转、筛五个字
3、聚合酶链反应(PCR)
体外DNA扩增法,基本原理同DNA复制

第44页:半保留复制示意

半保留复制示意

  • 母链 3′→5′ 与 5′→3′ 两条链解开
  • 各以一条母链为模板,按 A—T、G—C 配对合成新链
  • 子代DNA各保留一条母链、新合成一条互补链

说明:源文件本页为复制示意图字符,走向建议对照原课件图片核对。

第45页:逆转录示意

逆转录示意

  • 病毒RNA →(逆转录酶)→ RNA-DNA 杂交体
  • 杂交体中的RNA被水解,再合成互补DNA链
  • 最终形成病毒双链DNA,整合入宿主基因组

说明:源文件本页为示意图字符,细节建议对照原课件图片核对。

第46页:DNA损伤的切除修复

DNA损伤的切除修复

  1. 内切酶识别并在损伤部位附近切开
  2. 外切酶切除损伤的核苷酸片段
  3. DNA聚合酶以互补链为模板填补缺口
  4. DNA连接酶封口,恢复完整DNA链

第47页:RNA聚合酶与亚基组成

RNA聚合酶(转录酶)——DDRP

原核细胞中的DDRP
由五个亚基组成的全酶(α2ββ′σ)
核心酶
α2ββ′
σ(起始因子)
识别起始位点
β′
结合DNA模板
β
转录的主要酶(催化磷酸二酯键形成)

第48页:转录与复制的区别

转录与复制的区别

转录与复制的区别
比较项目DNA复制RNA转录
原料dNTPNTP
碱基配对A与T,G与CU与A,G与C
催化的酶DDDPDDRP
模板整个DNA分子的二条完整单链DNA分子上的某个基因中的一条链
加工与修饰不需要在真核细胞内需要

第49页:hnRNA加工示意

hnRNA内含子切除及外显子连接示意

  • hnRNA:5′-端 m7Gppp、3′-端 poly-A,中间含外显子与内含子
  • 经核酶(剪接体)作用切除内含子
  • 连接酶将外显子连接,生成成熟 mRNA
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