第1页:转基因食品与安全性封面
Genetically Modified Food (GMF)and Its Safety转基因食品与安全性
第2页:你吃过转基因食品吗
- 你吃过转基因食品吗?
- 不管您愿不愿意,您己经或正在把转基因食品吃进肚里
第3页:转基因食品走进百姓生活
- 转基因食品已经走进我国百姓的生活。
- 国内尚没有转基因作物的大规模生产
- 近几年我国大量从美国、阿根廷等国进口大豆,其中大部分是转基因大豆。
- 我国有一半以上的大豆色拉油含有转基因成分。
第4页:转基因食品三问
究竟什么是转基因食品?转基因食品是否安全?它是否存在长期的隐患?
第5页:主要内容
第6页:什么是转基因
- What is Genetically Modified?什么是转基因?
- 将不同来源的DNA分子进行重组,克服了天然物种生殖隔离的屏障,将具有某种特性的基因分离和克隆,再转接到另外的生物细胞内。
- 从而可以按照人们的意愿创造出自然界中原来并不存在的新的生物功能和类型。
第7页:转基因技术的定义
- “转基因技术”(Genetically Modified Technology)
- 是指使用基因工程或分子生物学技术(不包括传统育种、细胞及原生质体融合、杂交、诱变、体外受精、体细胞变迁及多倍体诱导等技术),将遗传物质导入活细胞或生物体中,产生基因重组现象,并使之表达并遗传的相关技术;
第8页:转基因生物的定义
- “转基因生物”(Genetically Modified Organisms)
- 是指遗传物质基因被改变的生物,其基因改变的方式是通过转基因技术,而不是以自然增殖或自然重组的方式产生。
- 简称:GMOs
第9页:转基因生物的种类
- 转基因生物的种类?
- 目前已经进入食品领域的三类转基因生物包括:转基因动物转基因植物(最多,最重要)转基因微生物
第10页:第一批列入目录的农业转基因生物
第一批列入目录的农业转基因生物:下表列出五类作物及其相关产品。
第一批列入目录的农业转基因生物| 作物 | 列入目录的产品 |
|---|
| 大豆 | 大豆种子、大豆、大豆粉、大豆油、豆粕 |
|---|
| 玉米 | 玉米种子、玉米、玉米油、玉米粉 |
|---|
| 油菜 | 油菜种子、油菜籽、油菜籽油、油菜籽粕 |
|---|
| 棉花 | 棉花种子 |
|---|
| 番茄 | 番茄种子、鲜番茄、番茄酱 |
|---|
第11页:转基因食品的定义
- “转基因食品”(Genetically Modified Foods)
- 是指用转基因生物制造、生产的食品、食品原料及食品添加物等。
- 简称:GMF
第12页:小西红柿是转基因食品吗
- 现在市场上常见的小西红柿算是转基因食品么?
- 小西红柿其实并不属于转基因食品,它是通过常规育种方法培育的。
第13页:为什么会有恐惧心理
- 为什么会对转基因食品有恐惧心理?
- 据专家分析,转基因食品在基因重组与改变过程中,可能产生某种毒性、过敏性,生成抗营养因子。引起营养成分改变,或者某种抗抗生素基因随食品转移到肠道,使抗生素对该机体从此失去疗效。
- 就目前而言,还没有发现转基因食品对人类有害,但同时也缺乏证据证明它的无害性,因此产生了一些争论。
第14页:转基因与常规育种的比较
- 从本质上讲,转基因生物和常规育种的品种是一样的.
- 两者都是在原有的基础上对某些性状进行修饰,或增加新性状、或消除原有不利性状。
- 有意识的杂交育种已有100多年的历史.
第15页:为何要作安全性分析
为什么对转基因植物进行安全性分析?不要求对常规育种的品种作系统的安全性评价?
第16页:原因分析
原因:常规有性杂交仅限于种内或近缘种间。转基因植物中的外源基因可来自植物、动物、微生物,人们对可能出现的新组合、新性状能否影响人类健康和生物环境还缺乏足够的知识和经验。按目前科学水平还不可能完全精确地预测一个外源基因在新的遗传背景中会产生什么样的互作作用。
第17页:理论上更安全
从理论上讲,基因工程中所转的外源基因是已知的有明确功能的基因。它与远源有性杂交中的高度随机过程相比,其转基因后果应当可以更精确地预测,在应用上也更加安全。
第18页:安全性争论:支持派
- 转基因植物的安全性争论
- 支持派认为:如果转基因农业生物技术得不到社会支持,这一研究将被扼杀,并且强调,迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。
第19页:美国等国的食用经验
美国人食用转基因食品已多年,超级市场上有4000多种商品是含有转基因植物成分的,还没有事例证明人吃了以后会得病,甚至会引起死亡。加拿大、澳大利亚也是转基因食品的生产大国,均有几千万人在吃,到现在为止也没有—个案例说明它有问题。
第20页:反对派的观点
- 反对派的观点
- 一英国科学家声称,转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能;
- 美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。
第21页:环保团体的担忧
- 环保团体认为这种违反自然的转基因作物及产品,未经长期安全测试,长期食用可能对人类及生态环境造成负面影响。
- 尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家,对转基因作物更加排斥,因而抵制美国GMO产品的进口。
第22页:安全性问题在哪里
转基因食品的安全性问题在哪里?
第23页:两类安全性因素
1、食物安全性因素2、环境安全性因素
第24页:食物安全性因素(一)
- 1、食物安全性因素(1)转基因产物的直接影响:包括营养成分、毒性或增加食物过敏性物质的可能;
- (2)转基因间接影响:经遗传工程修饰的基因片段导入后,引发基因突变或改变代谢途径,致使其最终产物可能含有新的成分或改变现有成分的含量所造成的间接影响;
第25页:食物安全性因素(二)
- (3)植物里导入了具有抗除草剂或毒杀虫功能的基因后,它是否也象其他有害物质一样能通过食物链进入人体内;
- (4)转基因食品经由胃肠道的吸收而将基因转移至胃肠道微生物中,从而对人体健康造成影响
第26页:环境安全性因素(一)
- 2、环境安全性因素(1)转基因生物对农业和生态环境的影响;
- (2)产生超级杂草的可能;
- (3)种植抗虫转基因作物后可能使害虫产生免疫并遗传、从而产生更加难以消灭的“超级害虫”;
第27页:环境安全性因素(二)
- (4)转基因向非目标生物漂移的可能性;
- (5)其他生物吃了转基因食物是否会产生畸变或灭绝;
- (6)转基因生物是否会破坏生物的多样性等。
第28页:公众的态度
- 对于普通公众来说又是怎样呢?
- 统计表明,基因工程研究约8个月就会翻一番,美国财政部部长拉里萨莫斯形象地将此比喻成人类还戴着尿布就已迈人了青年时期。
- 这种迅猛的发展速度的确超出了普通公众的理解能力,加上各有所图的利益集团有目的的宣传,同时,人们获得信息的渠道、科学的分辨能力、对新知识的认知程度和理解方式又是千差万别,都会使他们对转基因食品产生不同态度,从而引发争论。
第29页:转基因食品存在的最大理由
转基因食品存在的最大理由:
- 转基因食品并不会比常规育种有更多的危险,恰恰相反,更大的危险是世界上60亿人口中还有12亿人仍在温饱线上挣扎。
- 预计2050年将达到90亿,而发展中国家现有8.4亿人营养不良,13亿人陷于贫困。
第30页:加快传统育种进程
转基因主要是通过生物技术的方法来加快传统育种的过程,例如过去要通过10年才能选育出一个品种,但通过转基因方法可能只需2-3年就可以完成。
第31页:利用基因工程技术较多的国家
利用基因工程技术较多的国家:下表比较各国转基因作物的应用面积。
利用基因工程技术较多的国家及面积| 国家 | 应用面积 |
|---|
| 美国 | 40,000,000 公顷(4000万公顷) |
|---|
| 加拿大 | 12,800,000 公顷(1280万公顷) |
|---|
| 阿根廷 | 7,500,000 公顷(750万公顷) |
|---|
| 澳大利亚、墨西哥、西班牙、法国、南非 | 合计 10 万公顷以上 |
|---|
第32页:美国基因工程应用情况
The situation of geneticengineering in America美国基因工程应用情况
第33页:美国转基因产品认证情况
- 43 gene products from animal and plant were authenticated 43种动、植物转基因产品通过FDA认证
- More than 60% processed food contained transferred gene components 超过60%的加工食品含有转基因成分
第34页:美国转基因食品相关数据
美国基因工程应用情况:下表列出三项代表性数据。
美国转基因食品相关数据| 指标 | 数值 |
|---|
| 转基因食品销售额 | 超过 100 亿美元 |
|---|
| 转基因大豆占比 | 超过 50% |
|---|
| 转基因玉米、小麦占比 | 超过 40% |
|---|
第35页:与转基因有关的食品种类
There are 7000 gene food, including infant food, chocolate, frozen , margarin, bread, sausage, meat and its replaement与转基因有关的食品达七千种,包括:婴儿食品、巧克力、冷冻甜品、面包、人造奶油、香肠、肉类及代肉类产品
第36页:基因工程的特点
The characteristic ofgenetic engineering基因工程的特点
第37页:基因交流与定向变异
- The gene of the life-form could be intercommunicated among human, animal, plant and microorganism生物的基因可以在人类、动物、植物和微生物四大系统间进行交流
- Variation could be directly变异可以定向
第38页:基因工程的应用优势
- 改良和培育新产品,
- 促进快速生长,缩短育种年限
- 提高产量和质量,
- 增强抗逆性(抗旱、寒、涝、热、病毒和虫害等),
- 大大降低成本,
- 产出口味更佳的食物。
第39页:基因工程在食品工业中的应用
The application of genetic engineeringin food industry基因工程在食品工业中的应用
第40页:在植物性食品工业中的应用
The application of genetic engineering in plantfood industry基因工程在植物性食品工业中的应用
第41页:改良植物食品的食用品质(一)
- 1. Modified the edible quality of plant food改良植物食品的食用品质
- Modified the oil plant 改变油料作物
- Modified the constitute and content of starch 改变淀粉组成及含量
- Increase amino acid content in potato 增加土豆中氨基酸含量
- Increase lysine content in cereal food 提高谷物食品的赖氨酸含量
第42页:改良植物食品的食用品质(二)
- 1. Modified the edible quality of plant food改良植物食品的食用品质
- Increase tryptophan content in corn and wheat 提高玉米、小麦中的色氨酸含量
- Improve the baking quality of wheat 提高小麦烘焙性能
- Modified the protein, and amino acid, remove the beany flavor in soybeans 改变大豆中的蛋白质、氨基酸、脱除豆腥味
第43页:增加果蔬贮藏保鲜性能
- 2. Improvement in fruit and vegetable shelf-life and organoleptic quality 增加果蔬贮藏、保鲜性能(1)Gene transfer in plants 植物间基因转移
- Gene Modified tomato 转基因番茄
- Gene modified banana, Chinese goosebeery 转基因香蕉、猕猴桃
- Gene modified lichee 转基因荔枝
第44页:动植物间基因转移
- (2)Gene transfer between animals and plants 动植物间基因转移
- 转鱼抗冻蛋白基因的转基因番茄
- 转细菌脱氨酶的转基因番茄
第45页:生产食品疫苗
- 3. Manufacture of edible vaccines生产特殊食品——食品疫苗
- 不耐热肠毒素
- 狂犬病抗原
- 乙肝表面抗原
- 链球菌表面抗原
- 流感表面抗原将以上基因转移到马铃薯、香蕉、番茄等十多种作物上,生产食用疫苗。
第46页:在动物性食品工业中的应用
The application of genetic engineering in animalfood industry基因工程在动物性食品工业中的应用
第47页:生物反应器生产的药物
- 1.Bioreactor 生物反应器Drugs produced by bioreactor 利用生物反应器生产的药物
- 类人胰岛素(IGF)
- Interferon 干扰素
- 血栓溶解剂(TPA)
- 尿激酶
- 白细胞介素
- 生长激素(GH)
第48页:克隆技术在生物反应器中的应用
- The application of clone technology in bioreactor 克隆技术在生物反应器中的应用
- 克隆羊(1997)
- 克隆牛(1999)
第49页:基因工程牛奶(一)
- 2.Gene modified milk 基因工程牛奶
- Increase the lactoferrin content in milk 增加奶中乳铁蛋白
- Increase in milk增加奶中的溶菌酶
第50页:基因工程牛奶(二)
- Increase the protein which is beneficial to adsorb calcium in milk增加奶中有利于吸收钙的蛋白
- Decrease the oil and fat content in milk降低奶中的脂肪
- Increase the anti-illness factor content in milk增加奶中的抗病因子
第51页:转基因技术在动物上的应用
- 3.The application of genetically modifiedtechnology in animal转基因技术在动物上的应用
- 生长素基因GH
- 生长激素释放因子GRF增重、增速、增加饲料转化率、增瘦肉率猪、牛、羊、鱼类、禽
第52页:提高动物食品的品质
- 4. Improve the quality of animal提高动物食品的品质
- 降低结缔组织的胶联度
- 改善肉质(嫩化肉质)
- 提高饲料转化率
第53页:基因工程在微生物中的应用
The application of genetic engineering in microorganism基因工程在微生物中的应用
第54页:用于食品微生物的检验
- 1. Inspection microorganism existed in food 用于食品微生物的检验
- Inspect the bacteria and pathogens in food quickly and sensitively 快速灵敏地检测食品中的细菌或致病菌
- Classify and authenticate the microorganism in food (PCR technology) 食品微生物的分类和鉴定(PCR技术)
第55页:改善发酵食品的品质与风味
- 2. Improve the quality and flavor of fermentation 改善发酵食品的品质与风味
- 酱油风味
- 啤酒风味
- 发酵面食的风味
第56页:利用基因工程生产食品用酶
- 3. Enzyme production from genetic engineering 利用基因工程生产食品用酶
- Rennase 凝乳酶
- α–amylaseα-淀粉酶
- Glucoseoxidase葡萄糖氧化酶
- glucoseisomerase葡萄糖异构酶
- Lysozyme溶菌酶
- Galactosidase半乳糖苷酶
第57页:安全性评价的目的
- The aim of the safety assessment安全性评价的目的
- 为科学决策提供依据
- 保障人类健康及生态环境安全
- 回答公众疑问
- 促进国际贸易,维护国家权益
- 促进生物技术可持续发展
第58页:安全性评价的主要内容
- The content of safety assessment安全性评价的主要内容
- 划分受体生物的安全等级
- 划分基因操作对受体生物的影响类型
- 划分转基因生物体的安全等级
- 转基因产品的安全等级
- 安全性的综合评价和建议
第59页:检验的五项原则
Five principles of inspection the GMfoods转基因食品安全的检验的五项原则根据转基因食品及同类传统食品两者的特性表现及成分进行分析比较:Substantial equivalence实质等同性原则
第60页:实质等同性原则
- Substantial equivalence实质等同性原则
- 即生物技术产生的食品及食品成分,如果与一种现有的食物或食物成分在实质上是相当的,则可以认为是安全的。
第61页:实质等同原则的内涵
- 实质等同原则
- 强调了转基因食品安全性的目的,不是要了解该食品的绝对安全性,而是评价它与非转基因食品的同类食品比较的相对安全性。
- 在评价时注重“个案分析”,即对转基因食品的安全性不一概而论、而是采用“实质等同”一对一地进行个案分析它们的安全性至少不低于相应的参照食品或不会增加来自食品的风险。
第62页:五项原则(一)
- 五项原则(1)如果两者本质是相同的,用传统的安全性评价程序对转基因食品评价。
- (2)如果在一定范围内有差别,用集中于对产生差别的因子进行评价。
第63页:五项原则(二)
- (3)如果氨基酸序列与已知蛋白毒素的氨基酸序列是同系物,则要进行毒理学实验。
- (4)如有蛋白质产生了抗营养作用,或营养成分发生改变,则要进行营养学评价。
- (5)如果两者完全不同或没有可比的传统食品,则要特别设计动物模型试验证明其无毒后,还须进行人体营养学试验。
第64页:进一步的毒理学试验(一)
转基因食品不能证明与对应的参照食品实质等同时,要做进一步的毒理学试验,试验主要包括:(1)毒物动力学试验,了解它的吸收、分布、代谢及排泄等情况(2)遗传毒性试验,包括体外试验和体内致突变试验(3)潜在致敏性试验
第65页:进一步的毒理学试验(二)
(4)基因传递与稳定性试验。检查是否导入的基因向人畜胃肠道中存在的微生物中转移和表达(5)微生物定植和微生物致病性试验。对本身是活菌或含有活菌的新型食品要评价这两项指标
第66页:进一步的毒理学试验(三)
(6)啮齿类90天喂养试验。其中注意遗传毒性、神经毒性、免疫毒性及生殖毒性(7)验证对人类的安全性;一定时期后,对转基因食品安全性的再评价。包括耐受量、肠道群菌谱及数量等。
第67页:标记基因的安全性评价
Safety assessment of the marker gene标记基因的安全性评价
第68页:标记基因的用处
- 标记基因的用处?
- 转基因作物在实验室阶段经常要用抗生素作为抗性标记进行筛选;
- 选择标记基因用于植物遗传转化中促进转化细胞、组织和转基因植株的生长。
第69页:常见标记基因
The normal marker gene:常见标记基因:(1)marker gene for kanamycin resistance抗卡那霉素基因(2)marker gene for new hygromycin resistance抗新潮霉素基因(3)抗草甘膦基因(4)GUS报告基因
第70页:公众为何关心标记基因
- 公众为什么关心标记基因的安全性?
- 尽管国际社会认为大部分常用的标记基因是安全的,但仍有一部分标记基因的安全性未能确定;
- 所谓的安全使用的标记基因,仅指基因本身,并不包括启动子、终止子、基因多效性及其它多种可能的次生效应,次生效应可因插入位点不同而异,目前人类无法预测基因插入位点和准确地做到基因的定位整合。
第71页:标记基因涉及的安全性问题
标记基因涉及的安全性问题:
- 标记基因及其编码蛋白的直接毒性;
- 蛋白代谢产物的毒理学安全性;
- 蛋白质的过敏性和基因水平转移的可能性
第72页:标记基因的评价内容
标记基因的评价内容
第73页:标记基因有无直接毒性
- 1、Whether the labeled gene is toxic to human directly标记基因有无直接毒性
- 任何DNA都由4种碱基组成
- DNA在小肠中仅有200mg
- 标记基因DNA在结肠中仅有0.3-1pg,在消化道中是微不足道的
- DNA在消化道中很快被降解
- WHO、FDA实验证明食物中的转基因DNA本身无安全性问题
第74页:基因水平转移的可能性
- 2、The possibility of transferring horizontally 基因水平转移的可能性
- DNA被降解成小片段或核苷酸,在进入肠道微生物存在的小肠下段,盲肠及结肠前已被降解。
- 即使DNA完整存在,DNA转移并整合需要有感受态的细胞,其过程非常复杂,同时小肠上皮细胞新陈代谢,半衰期很短,不断被取代,不可能保存下来。
第75页:未预料基因多效性
- 3.The unpredicted poly-effect of gene未预料基因多效性
- 常规育种中筛除不利性状
- 进行实质等同性鉴定
第76页:标记基因编码蛋白的安全性
- 4.The safety of labeled gene coding protein include the direct toxicity, allergenicity and co-effect标记基因编码蛋白的安全性包括直接毒性、过敏性、因蛋白的催化功能而产生副作用
- The protein is hydrolyzed quickly in alimentary tract 蛋白在消化道中很降解
- Not the same as toxic protein与毒性蛋白无同源性
- No special design, could not suffer from uttermost environment 标记基因无特殊设计,不能忍受极端环境,因此会很快被降解
第77页:抗病虫基因编码的毒蛋白问题
- About the toxic protein coded from anti-disease gene关于抗病虫基因编码的毒蛋白问题
- Existed a acceptor人体内需要有该毒蛋白的受体
- Cumulated at a sufficient level in human body毒蛋白需在人体内积累到足够的量
第78页:逐步淘汰抗生素标记的建议
建议:
- 应寻找替代品,筛选新的标记基因,逐步淘汰对抗生素标记的使用。
第79页:转基因食品要不要贴标签
- “转基因食品,要不要贴标签?”
- 若转基因产品与目前市售的产品具有实质等同性,则不需再加特殊的标签;
- 若转基因产品中含有对一部分人群有过敏性反应的蛋白,则需加标签,以使购买者作出选择。
第80页:联合国的标签规定
联合国:
- 2000年制定的GMO贸易协定----《卡塔赫纳生物安全协定书》已由62个国家签署通过
- 《卡塔赫纳生物安全协定书》规定,任何含有GMO的产品都必须粘贴“可能含有GMO”的标签,并且出口商必须事先告知进口商,他们的产品是否含有GMO。
第81页:欧洲的标签法规
- 欧洲
- 欧洲委员会于2001年7月25日通过了两个关于转基因生物的法规议案,即关于对农业生物技术产品实施跟踪与标识的法规议案(COM2001—1821)及关于转基因食品和饲料的法规议案(COM2001—425)。
- 这两个议案建立了转基因生物的跟踪系统,制定了转基因饲料的标签规则,完善了现行的转基因食品标签制度,规定了合理化的转基因食物及饲料审批程序。
第82页:日本的标签制度
- 日本
- 日本农林水产省于1999年修订的《农林物资规格化和质量表示标准法规》(JAS)要求:从2001年4月1日起,豆腐、毛豆、玉米淀粉等30项基因改良食品必须予以明确标识,凡制造、加工、进口的食品都要执行新的商品明确标识制度。
第83页:韩国的标签制度
- 韩国
- 韩国食品医药品安全厅宣布,自2001年7月13日起,对用经过转基因(GMO)处理的大豆和玉米、豆芽莱等作为主耍原料生产的27种转基因食品实施食品标识制度。
- 从2001年9月1日起对所有进的大豆、玉米以及含有这些成分的食品要求加贴“转基因”标识,并出具转基因检测证明。
- 有义务标注转基因标识的包括:食品制造及加工商、现货销售制造及加工商、食品添加物制造商、食品分销商、流动专销商、食品进口销售商等。
第84页:澳大利亚与新西兰的标签要求
- 澳大利亚、新西兰
- 澳新两国在食品法典里的关于利用转基因技术生产的食品标难1.5.2中,规定了转基因食品的强制性标识要求。
- 从2001年12月7日起,在澳、新出售的所有食品,无论是含有转基因成分或使用了转基因食品添加剂或者加工助剂,只要最终食品中含有转基因的,必须在食品上用标签标明是转基因食品,并标明含量,让消费者能够非常容易地进行识别和自己决定是否购买。
第85页:美国的标签要求
- 美国
- 美国政府要求源于生物技术的食品要符合《食品标签法》,此项法规要求在包装的标答上标识该种食品的成分、营养物质含量、含过敏源及可能引起的后果等,但不要求标明食品的生产方法(如利用生物技术生产:等)
第86页:我国的标签管理
- 我国
- 2001年6月6日,国务院公布的《农业转基因生物安全管理条例》规定,不得销售未标识的农业转基因生物,其标识应注明产品中含有转基因成分的主要原料名称;有特殊销售范围的还应注明并在指定范围内销售。
第87页:转基因食品检测方法分类
转基因食品检测方法1、鉴定食品中有无转基因成分的方法2、鉴定食品中转基因成分性质的方法3、测定食品中转基因成分含量的方法
第88页:鉴定有无转基因成分的方法
- 1、鉴定食品中有无转基因成分的方法(1)利用转入目的基因所表达的特殊性状鉴定转基因食品----最简便的方法,如富含
- —葫罗卜素的转基因“金色水稻“,低糖高甜玉米等。
- (2)针对目前的蛋白质的鉴定方法,包括ELISA、层析、双向电泳及免疫印迹方法等
第89页:针对共有DNA成分的检测方法
(3)针对转基因食品特的共有DNA成分的检测方法;植物细胞转入的基因成分一般包括启动子(Promotor)、报告基因(Reporter gene)、目的基因(target gene)、终止子(terminator),其中启动子和终止子为表达目的基因所必需。
第90页:鉴定转基因成分性质的方法
- 2、鉴定食品中转基因成分性质的方法对于某一特定食品原料或未深加工的食品:(1)通过一系列的ELISA,检测已知的转基因蛋白质产物,以确定其中含何种转基因成分。
- (2)多重PCR技术----能同时检测多个已知目的基因
第91页:明确转基因成分的配料来源
- 为了明确转基因成分源于食品中何种配料:(1)在商品化GMF较少的情况下,可通过查询比对上述手段所明确目的基因与商品化GMF清单中目的基因序列,初步确定食品中所含转基因配料。
- (2)更严格的还应设立一系列内参照PCR反应,扩增亲本作物的保守基因序列。
第92页:测定转基因成分含量的方法
3、测定食品中转基因成分含量的方法
第93页:ELISA方法
(1)ELISA方法:可对其中的转基因蛋白产物进行半定量方法:通过测定一系列梯度含量GMF标准品的酶反应OD值,绘制标准曲线后,即可通过测定食品样品中的转基因蛋白产物酶反应OD值进行定量。目前已有商业化的GMF ELISA检测试剂特点:ELISA的灵敏度有限,只能达到微克级;有可能造成假阴性结果。
第94页:PCR技术
- (2)PCR技术:目前GMF的定量仍基于此法
- 聚合酶链式反应(Po1ymerase Chain Reaction,简述PCR)技术.测定基础:食品加工过程中核酸变性程度不及蛋白质
第95页:PCR的主要步骤
- 其主要步骤为:1、运用化学手段对DNA提取;
- 2、设计并合成引物;
- 3、进行PCR扩增;
- 4、克隆并筛选鉴定PCR产物;
- 5、DNA序列分析。
第96页:PCR的分类
- 分类:1、半定量PCR法(semi-quantitative PCR);
- 2、定量竞争PCR法(quantitative competitive PCR);
- 3、实时定量PCR法(real –time quantitative PCR)
第97页:PCR方法的特点
特点:此类方法在实验室阶段基本成熟;只是要对不同物种、品种的不同性状基因研究具体的条件;但它对设备及技术要求较高;费时;准确性也需进一步确定。
第98页:DNA芯片技术
- (3)“DNA芯片”技术
- 方法:通过微加工和生物化学技术,使成千上万的基因集成在lcm2的芯片上,将样品制备、化学反应到检测的整个过程集成化以获得所谓的微型全分析系统(micro total analytical system)。
第99页:DNA芯片的应用现状
- 此方法于80年代提出设想,90年代进行实质性科研.现在进行的商业化生产芯片主要在医学上应用,且品种极少。
- 特点:可以预见,它在转基因作物上的应用普及将极大地提高分析的自动化和速度,并降低成本和污染等。
第100页:检测趋势(一)
检测趋势1:
- 随着转基因食品商品化进程加速,越来越多的目的基因将被转入种类更加繁多的食品作物中,使用的启动子、终止子也将不再局限于目前的几种。
- 因此,常规PCR检测将可能造成越来越多的假阴性,能同时检测多个启动子、终止子、目的基因、内参照基因的基因芯片将成为必需。
第101页:检测趋势(二)
检测趋势2:
- 建立快速可靠的GMF检测手段,也成为卫生监管部门面临的刻不容缓、必须解决的问题
第102页:课程结束页
The End!