页数：10页文件大小：1.33 MB来源： 细胞生物学ppt课件
本课件讲解细胞化学技术，在保持细胞结构完整的前提下借助化学反应研究细胞器的结构与功能关系。内容涵盖酶细胞化学技术、免疫细胞化学的荧光、酶、铁蛋白与胶体金四类标记方法、直接法与间接法的优劣比较，以及放射自显影术的定位原理。
第二节 细胞化学技术（Cytochemistry）
细胞化学技术是在保持细胞结构完整的条件下，借助细胞中的化学反应，研究细胞和细胞内的细胞器的结构、功能关系的一种技术。本节依次介绍酶细胞化学技术、免疫细胞化学技术和放射自显影术。
一、酶细胞化学技术：通过酶的特异细胞化学反应来显示酶在细胞内的分布及酶活性强弱的一种技术。
二、免疫细胞化学技术（Immunocytochemistry）：利用抗原和抗体的结合具有高敏感性和特异性的特点，用已知的经过标记的抗体检测组织与细胞中相应抗原的方法。
免疫铁蛋白电镜技术
本页展示免疫铁蛋白电镜技术的原理：以含铁离子的铁蛋白标记抗体，利用铁离子在电镜下呈黑色颗粒来定位抗原所在位置。
免疫胶体金电镜技术
本页展示免疫胶体金电镜技术的原理：用胶体金溶液标记抗体，经抗原抗体反应后在电镜下以高电子密度的金颗粒定位抗原。
免疫荧光显微镜技术（Immunofluorescence microscopy）
本页介绍免疫荧光显微镜技术，即用荧光素标记的抗体与细胞内抗原结合，在荧光显微镜下观察抗原的分布。
荧光素标记抗体的方法：分为直接法与间接法两类，二者在操作、敏感度与特异性上各有优劣。
| 方法 | 操作要点 | 优点 | 缺点 |
|---|---|---|---|
| 直接法 | 荧光素直接和第一抗体相偶联 | 简单方便，易于操作，省时省力 | 敏感度不够，特异性不强，标记抗体需自己制备 |
| 间接法 | 荧光素先和第二抗体（抗第一抗体的抗体）偶联，再与第一抗体作用 | 敏感度高，特异性强，可购买不同的标记二抗 | 操作比直接法复杂 |
三、放射自显影术（autoradiography）：放射性核素在蜕变过程中发出带电粒子可使感光材料感光。利用这样的特性，用放射性化合物脉冲标记活细胞，经固定、切片后在暗处把感光乳胶覆盖于切片上，在此期间由于放射性同位素衰变使乳胶曝光，经显影、定影，根据银粒所在部位，就可知道细胞中放射性物质的分布。
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