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09 第三章 主要实验技术4.4.ppt

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本课件先讲植物细胞的外植体、悬浮与原生质体培养,再介绍动物细胞的群体培养与克隆培养、原代与传代培养及细胞株概念,列出常用细胞系,最后讲解细胞融合类型与杂交瘤单克隆抗体技术。

第四节细胞培养与细胞杂交导览,涵盖植物与动物细胞培养及细胞融合
植物细胞培养的三种方式:外植体培养、悬浮培养与原生质体培养
本页为图片内容,位于「一、植物细胞培养」与「二、动物细胞培养」之间。
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第1页:第四节 细胞培养与细胞杂交

第四节细胞培养与细胞杂交

第2页:一、植物细胞培养

  • 一、植物细胞培养1.外植体培养:诱发产生愈伤组织。用于研究植物的生长发育、分化和变异;进行无性繁殖;制取代谢产物。2.悬浮细胞培养:适合于进行产业化大规模细胞培养,制取植物代谢产物。3.原生质体培养:培养脱壁后的细胞,特点:
  • ①比较容易摄取外来的遗传物质,如DNA;

第3页:

第4页:二、动物细胞培养

二、动物细胞培养

  • 群体培养(massculture):将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中,让细胞贴壁生长,汇合(confluence)后形成均匀的单细胞层;
  • 克隆培养(clonalculture):培养高度稀释的细胞悬液,细胞贴壁生长,每一个细胞形成一个细胞集落,称为克隆。

第5页:原代培养与细胞株

  • 原代培养(primaryculture):即:培养直接来自动物机体的细胞群,将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶称为传代或传代培养(Passage)。
  • 细胞株(cellstrain):从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。
  • 细胞系(cellline)

第6页:常用细胞系

下表列出实验室常用的几种细胞系及其细胞类型与来源(源文本表格数值粘连,已按列拆分还原)。

实验室中常用的几种细胞系
细胞系名称细胞类型来源
3T3成纤维细胞小鼠
HeLa宫颈癌上皮细胞Henrietta Lacks
BHK21成纤维细胞叙利亚仓鼠
PtK1上皮细胞袋鼠
L6成肌细胞大鼠
PC12嗜铬细胞大鼠
SP2浆细胞小鼠
SP2/0骨髓瘤浆细胞小鼠

源文本该表各列文字连续粘连,已按「细胞系名称—细胞类型—来源」顺序拆分还原。

第7页:三、细胞融合

三、细胞融合

  • 通过培养和介导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cellfusion)或细胞杂交。
  • 同核体:相同基因型的细胞融合而成。
  • 异核体:不同基因型的细胞融合而成。
  • 自发融合:同种细胞在培养过程中自发合并的现象。

第8页:

第9页:单克隆抗体技术

单克隆抗体技术

正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞)具有分泌抗体的能力,但不能长期培养,瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养,但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术,获1984年诺贝尔奖。

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