36 实验十五 主要病原菌的认识（三）.doc

第1页：实验十六 酵母菌细胞形态观察及死活细胞染

• 实验十六酵母菌细胞形态观察及死活细胞的染色鉴别目的要求
• 1.通过观察了解酵母细胞的形态结构
• 2.掌握鉴别酵母细胞死活的染色方法
• 材料
• 3.菌种：酵母菌菌悬液
• 4.染料：
• 0.1％美兰染色液
• 5.其他：显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、试管、蒸馏水等
• 原理酵母菌细胞较大，不必染色即可用显微镜观察其形态
• 用美兰染色液可对酵母细胞进行死活染色鉴别
• 美兰是一种弱氧化剂，氧化态呈蓝色，还原态呈无色
• 活的酵母细胞，因新陈代谢的不断进行，具有一定的还原能力，能将进入细胞的美兰还原，而细胞不被染色
• 因此，用美兰对酵母细胞染色一定时间后，无色的为活细胞，呈蓝色的则为死亡细胞
• 需要注意的是，一个活酵母菌的还原能力是一定的，必须严格控制染料的浓度和染色时间
• 方法
• 1.酵母菌细胞形态的观察取洁净的载玻片一块，用滴管取酵母菌悬滴于载玻片中央，取盖玻片一块，小心地将盖玻片一端与菌液接触，然后缓慢地将盖玻片放下，以避免产生气泡
• 至此，一片酵母菌水浸标本片就制成了
• 先用低倍镜观察，再用高倍镜观察，观察时注意酵母细胞的形状及出芽情况
• 2.死活酵母细胞的染色鉴别取
• 0.1％美兰液一滴，滴在一块洁净的载玻片中央，加一滴酵母菌悬液，混合均匀，染色3～5分钟后加盖玻片制成水浸标本片，镜检
• 内容
• 1.制片观察所给各种酵母菌的细胞形态
• 2.用美兰液对酵母菌死活细胞进行染色鉴别
• 结果与思考题
• 3.绘图表示所观察的各种酵母菌，注明菌名及放大倍数
• 4.用美兰对酵母细胞进行染色鉴别时，为什么要控制染料的浓度和染色时间?