20 第十章 常见的致动物疾病性病毒.doc

第1页：第十章 常见的致动物疾病性病毒

• 第十章常见的致动物疾病性病毒第一节口蹄疫病毒口蹄疫病毒（Foodandmouthdiseasevirus，FMDV）是牛、猪、羊等偶蹄动物口蹄疫的病原
• 口蹄疫流行极广，在世界许多国家时有发生，对畜牧业发展影响很大，是当前世界各国极为重视的家畜传染病之一
• 该病也偶见于人和其他动物，因而也是一种人畜共患病
• 口蹄疫病毒属于微RNA病毒科（Picornaviridae）口蹄疫病毒属（Aphthovirus），属内只有口蹄疫病毒一种
• 一、生物学特性本病毒是动物病毒中发现最早的一种
• 二十面体对称，直径20～25nm无囊膜，病毒基因组为正股单股RNA
• 二、抵抗力本病毒对乙醚有抵抗力，在1mol/L氯化镁中对热不稳定，对酸敏感，病毒在pH为
• 6.5的缓冲液中、4℃条件下14h灭活90％，在pH
• 5.5时1min灭活90％，在pH
• 5．0时每秒钟灭活90％，pH
• 3．0时瞬间灭活，病毒在pH
• 7.0～
• 7.5时十分稳定
• 病毒的感染性RNA在pH
• 4.0时较原病毒稳定
• 由于口蹄疫病毒对酸特别敏感，故肉中的口蹄疫病毒可进行酸化处理，利用肌肉成熟时所产生的微量酸以杀死病毒
• 但腺体器官和骨髓中产生酸甚少，往往有病毒残留
• 同样，口蹄疫病毒对碱也很敏感，1％NaOH1min即可杀死
• 对消毒剂的抵抗力较强，1:1000升汞，30％来苏儿6小时不能杀死病毒
• 病毒在低温下能长期保存，含病毒的乳汁经巴氏消毒法处理即失去感染力
• 病毒的灭活温度为85℃1min，70℃10min，60℃15min，但裸露的RNA对热较稳定
• 在冰冻的情况下，骨髓中的病毒可生存70d，血中病毒能保持毒力4～5个月，肉中病毒能保持毒力30～40d，水泡皮保存于5％的甘油中，在5℃可保持毒力360～470d
• 三、抗原性根据病毒的血清学特征，目前已知口蹄疫病毒有七个主型：A、O、C、南非Ⅰ、南非Ⅱ、南非Ⅲ和亚洲Ⅰ型
• 各型之间没有相互免疫作用
• 本病毒有较大的变异性，病毒在保存和流行中，常发生血清学的变异，有时流行初期与末期毒型不一致，几乎每年都有新的亚型出现，本病毒已发现65个以上的亚型，某些野毒的亚型在免疫学上与其原型有显著区别
• 病毒子具有良好的免疫原性，能刺激产生中和抗体，并使动物获得免疫力，病毒的12S蛋白质亚单位亦有良好的抗原性
• 四、培养特性
• 1.组织培养利用犊牛、幼猪的肾脏或豚鼠、牛胚胎上皮组织制成细胞单层来培养病毒，病毒繁殖后，使细胞发生病变
• 2.鸡胚培养本病毒不易在鸡胚上生长，必须反复交替通过牛与鸡胚或在添有牛舌上皮的鸡胚组织培养继代后，才可能适应于鸡胚或鸡胚组织培养
• 五、致病性在自然条件下，主要发生于偶蹄兽，其中以奶牛和黄牛最易感，其次是水牛，牦牛、猪，再次为羊和骆驼等
• 野生偶蹄兽也能发生，如野牛、野猪、鹿等
• 人也能感染
• 此外，当发生恶性口蹄疫时，狗、猫亦偶尔感染
• 通常是幼畜较成畜易感
• 可感染30多种动物
• 该病的特点是体温升高，口腔粘膜、趾部及乳房等处发生水泡，有时甚至死亡
• 实验动物中豚鼠最易感，但大部分可耐过，因此常用其做病毒的定型试验
• 乳鼠对本病也很易感，可以检出组织中的微量病毒
• 皮下注射7～10日龄乳鼠，数日后出现后肢痉挛性

第2页：麻痹最后死亡

• 麻痹，最后死亡，其敏感性比豚鼠后肢足掌注射高10～100倍，甚至比牛舌下接种更敏感
• 六、微生物学诊断
• 一）豚鼠接种试验选择500g以上的健康豚鼠4～6只，剪去后肢足掌部被毛，用湿棉花球洗净，再用70％酒精棉消毒
• 将足掌部皮肤或口腔粘膜划破，把感染性病料涂擦于划破处
• 第二天如局部有水疱，即可确诊
• 二）乳鼠接种试验选择3～7日龄乳鼠5只，其中4只接种检样，1只作对照，每只于颈背部皮下接种
• 0.1ml，观察1周
• 如有死鼠应及时拣取，解剖后将检样制成1:3悬液，继续传代接种
• 如无死鼠，则于接种后第4天取活鼠2只冻死，无菌取样制成1:3悬液，继续传代接种，传2～3代死亡即为阳性
• 三）免疫学诊断法目前对口蹄疫的免疫学检测方法很多，如反向间接血球凝集试验、琼脂扩散试验、对流免疫电泳和病毒保护试验定型法等
• 此外，各种分子生物学方法已用于该病毒的检测
• 七、免疫与治疗本病康复后可获得坚强的免疫力，免疫期1～3年，能抗同型强毒攻击，但可被异型病毒所感染，并出现典型症状
• 猪的免疫期较短，仅有几个月
• 免疫和康复动物所产生的抗体有两种类型——早期型和晚期型
• 早期抗体于接种后7d出现，仅保持30d，主要是IgM，对DEAE纤维素吸附力强，对2-巯基乙醇敏感，该抗体能中和或沉淀同型口蹄疫病毒
• 晚期抗体，在10～14d出现，可保持数月，主要为IgG，对DEAE纤维素的吸附力弱，对2-巯基乙醇有抵抗力，IgG抗体具有中和、沉淀和补体结合活性，有型特异性
• 在康复牛血清中还存在2～3种其它迟出现的抗体，其特性尚未完全研究清楚
• 人工自动免疫可用灭活苗或弱毒苗以及基因工程苗
• 人工被动免疫可用口蹄疫高免血清，高免血清也可用于早期治疗
• 第二节狂犬病病毒狂犬病病毒（Rabiesvirus）属于弹状病毒科（Rhabdoviridae）狂犬病毒属（Lyssavirus），是引起人和动物狂犬病的病原，该病在世界各地均有发生
• 一、生物学特性病毒子长140～180nm，宽75～80nm，一端钝圆，另端平凹，呈子弹头形或试管形
• 在螺旋对称的衣壳中，含有负股单股RNA
• 具有脂蛋白的囊膜，在膜上有血凝素的穗状突起
• 该病毒只有一个血清型
• 在自然条件下，能使狗等感染的病毒，称为街毒（Streetvirus）
• 街毒对人、家畜及某些野生动物的毒力很强，而对家兔的毒力较弱
• 把街毒接种于家兔脑内，连续传代后，对家兔的毒力逐渐增强，且毒力稳定，称为固定毒（FixedVirus）
• 自然感染街毒的动物，脑组织神经细胞浆内可见到包涵体，称为内基氏小体（Negribodies）
• 接种了固定毒的动物，常不见这种小体
• 在脑组织中，从海马角及小脑蒲肯野氏（Purkinie’s）细胞中，小体数量最多，一个细胞内可含有几个小体
• 二、抵抗力病毒在pH为7～9的范围内比较稳定，在56℃经30min可使病毒灭括
• 三、抗原性实验证实，即使流行的时间和地域不同，分离的毒株在抗原性上十分接近
• 用补体结合试验和琼脂扩散试验等可测出具有共同的核蛋白抗原，但应用“肽链图谱法”却发现不同地区分离的街毒之间存在抗原差异
• 狂犬病毒与其它弹状病毒没有抗原关系
• 四、培养特性

第3页：通常将死亡动物的大脑

• 通常将死亡动物的大脑、小脑，特别是海马角部分，在无菌条件下取出，研磨，用生理盐水或肉汤制成1:5～10的悬液（如怀疑材料污染时，可在每毫升悬液中加入青霉素500IU、链霉素500µg），低速离心后，取上清液接种于实验动物（小白鼠、豚鼠、家兔等）脑内
• 幼龄小白鼠于接种后7～10d发病死亡，可在脑组织中发现内基氏小体
• 豚鼠及家兔潜伏期较长，接种后经2～3周发病死亡
• 应用10～15日龄鸡胚，将病毒接种于卵黄囊、绒毛尿囊膜及脑内，经3～4d后鸡胚死亡，在脑组织及绒毛尿囊膜上出现嗜酸性颗粒及内基氏小体
• 近年来多用组织培养法，狂犬病病毒可在多种哺乳动物（幼龄小白鼠、大白鼠、田鼠、乳兔、羔羊等）肾原代细胞、鸡胚成纤维细胞、羊胚肾及人胚皮肤肌肉传代细胞上生长
• 这些细胞在接种病毒后可出现颗粒变性
• 五、致病性狂犬病病毒几乎可以感染所有的温血脊椎动物，同样也能感染人
• 本病主要由患病动物咬伤后而感染
• 当健康动物皮肤粘膜有损伤时，接触病畜的唾液亦可以感染
• 病犬的唾液于症状出现前1～2周便可能会有病毒
• 存在于病畜唾液中的病毒，通过咬伤而进入易感动物的皮下组织，然后沿着神经纤维由外周进入神经中枢
• 也有人认为病毒是由外周经血液侵入脑组织
• 病毒在脊髓和脑组织中增殖，并可按离心方向由中枢神经向外扩散，而脑脊髓液在病毒扩散中，亦起着重要作用，使所有器官都能查出病毒
• 抵达唾液腺的病毒，在其上皮细胞内又大量增殖，并进入到唾液中
• 病毒在中枢神经系统中的继续繁殖，损害神经细胞和血管壁，引起血管周围的细胞浸润
• 神经细胞受刺激后，首先引起兴奋症状，如神经紊乱和反射性增高，后期神经细胞变性，逐渐引起麻痹，当呼吸中枢麻痹后即可造成死亡
• 六、微生物学诊断常用的特异性检查方法有包涵体检查，动物试验，荧光抗体检查等三种
• 一）包涵体检查取大脑、小脑，特别是海马角部分，用刀片切开印片，趁印片未完全干燥时，以塞勒（Seller）氏液染1～5s，水洗、干燥、镜检
• 内基氏小体呈鲜红色、间质呈粉红色、红细胞则为桔红色
• 内基氏小体为圆形、卵形、核形、阿米巴形
• 大小为24～27μm，位于细胞浆内
• 用姬姆萨氏（Giemsa）染色，小体为红色（图10-
• 1）
• 由于有些犬、猪和草食兽的病例及病初死亡或早期剖杀动物中可能不见包涵体，所以并不是所有的病例都能检查出包涵体来
• 二）动物试验实验动物如小白鼠、豚鼠、家兔等都可用于诊断，其中以小白鼠最为敏感和经济，并可提高阳性检出率
• 按照病毒的培养方法，给小白鼠脑内接种，每只
• 0.03ml
• 接种后观察21d，5d内死亡者淘汰；
• 5d后发病者，当出现松毛、颤抖、后肢失去平衡、麻痹、虚脱等症状时，可剖杀取脑，作印片，检查包涵体，如为阳性，即可诊断为狂犬病
• 动物试验虽然准确，但需要较多的动物和较长时间
• 为了确诊，在病毒鉴定时，可使用标准免疫血清作中和试验
• 三）荧光抗体检查近来多用此法
• 因为该法特异性强，简单而迅速，并且在包涵体尚未形成时，就可检查出抗原，因此，是诊断狂犬病较好的方法
• 此外，中和试验、补体结合试验、交叉保护试验、血凝抑制试验、间接免疫酶试验（HRP-SPA）、以及单克隆抗体检测、RT-PCR检测（比标准化荧光抗体法敏感100～1000倍）等均可用于狂犬病的检查
• 七、免疫与治疗狂犬病的预防和治疗常用疫苗（弱毒苗和灭活苗）及免疫血清，能得到良好的效果
• 对患狂犬病的病犬和可疑犬，应立即捕杀，以免伤害人、畜
• 图10-1狂犬病毒包涵体

第4页：第三节 伪狂犬病病毒伪狂犬病病毒

• 第三节伪狂犬病病毒伪狂犬病病毒（Pseudorabiesvirus）又称猪疱疹病毒Ⅰ型，属于疱疹病毒科（Herpesviridae）疱疹病毒甲亚科（Alphaherpesvirinae）
• 它是引起多种家畜和野生动物以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状的一种疱疹病毒
• 由于本病的临床症状同狂犬病有类似之处，曾被误认为狂犬病，后来才起用了“伪狂犬病”这一病名
• 本病广泛分布于世界各地
• 一、生物学特性本病毒呈圆形或椭圆形，为双股DNA，20面体立体对称，位于核心无囊膜的病毒粒子直径约110～150nm，位于胞浆内带囊膜的成熟病毒粒子的直径约180nm
• 衣壳壳粒的长度约12nm、宽9nm，其空心部分的直径约4nm.
• 二、抵抗力本病毒是疱疹病毒中抵抗力比较强的一种，在畜舍内干草上的病毒，夏季存活30d，冬季达46d
• 病毒在pH4～9之间保持稳定
• 在50％甘油盐水中保存的病料0～6℃下154d感染力仅轻度下降，保存到3年时仍具感染力
• 三、抗原性伪狂犬病病毒只有一个血清型，但毒株之间的毒力有强弱之分
• 本病毒与人的单纯疱疹病毒、马立克氏病病毒有微弱的交叉反应
• 病毒颗粒表面没有血凝素抗原
• 四、培养特性
• 一）鸡胚培养病毒可通过多种途径感染鸡胚，适应后很容易连续传代
• 鸡胚感染后约4d，绒毛尿囊膜上产生灰白色痘样病变，迅速侵入中枢神经系统的所有部分，导致胚胎的头盖部突起
• 二）细胞培养本病毒可在鸡胚成纤维细胞，猪、绵羊、牛、兔、狗、猫、猴和马的肾原代细胞，猪和牛的睾丸原代细胞，以及Hela、Hep-
• 2、PK-
• 5、BHK-21等传代细胞中增殖
• 以猪、兔、狗的细胞和鸡胚成纤维细胞最为敏感
• 感染细胞变圆，形成合胞体
• 毒株的毒力越强，合胞体形成越多
• 五、致病性本病毒可感染多种家畜、禽类及野生动物，引起发热，剧烈发痒和急性脑脊髓炎症状
• 本病毒对小猪危害最严重，成年猪症状轻微，死亡很少，并常成为隐性带毒者
• 猪不发生瘙痒，但母猪流产，产仔减少
• 不足15d的仔猪，通常在出现症状后12～24h内死亡
• 本病造成的损失与年龄成负相关性，成年猪很少死亡，而仔猪的死亡率可达到100％
• 牛患病后在皮肤的某部位出现狂痒是本病的基本特征
• 狗和猫的症状与牛相似，但不攻击人和其他动物，常在出现症状后24～36h死亡
• 山羊无瘙痒症状，主要表现不安、大量出汗、后期出现痉挛和麻痹
• 多在24～48h内死亡
• 人可能具有某种程度的易感性
• 六、微生物学诊断
• 一）病毒分离在病的急性期，用棉拭子在口咽部取样
• 病死动物取扁桃体、颈淋巴结和鼻粘膜
• 收集局部水肿液和该区域的神经干
• 部分采集脊髓和脑（最好是中脑、脑桥和延脑）
• 1.鸡胚接种本病毒可适应鸡胚，接种4d后，在绒毛尿囊膜上可见白色痘斑性病变，并迅速侵袭整个神经系统，导致胚胎头盖骨突起
• 2.动物接种病料皮下接种兔，能产生典型的瘙痒症状，2d后兔舐接种部位，以后更狂暴，啃咬皮肤
• 症状持续4～6h，兔卧地不起，阵发性痉挛和呼吸困难死亡
• 经兔接种后的材料则可感染豚鼠和小白鼠，引起瘙痒症状
• 3.细胞培养猪肾传代细胞系（如PK-
• 5）以及猪、兔和牛的原代肾细胞培养最适于病毒的分离培养
• 将待检的脑组织或扁桃体研磨成浆，用Hanks液或PBS液稀释成10％悬

第5页：2000 min离心10 min

• 液，经2000r／min离心10min，取上清，接种长成单层的细胞培养液内，37℃吸附1h，加维持液继续培养
• 病变出现时间与样品中病毒含量多少有关，最早可在接种后18h出现细胞病变，晚的则在96h以后，一般在接种后48h
• 此时，将细胞培养物作苏木紫—伊红染色，镜检可见嗜酸性核内包涵体
• 据报道，兔肾细胞培养对本病毒特别易感，高于鸡胚和实验动物
• 二）血清学检查
• 1．血清中和试验一般用乳兔肾细胞或PK-15细胞
• 病毒滴度不低于105TCID50／
• 1.ml，使用滴度在100～500TCID50范围内
• 被检血清作倍比稀释
• 血清中和效价在1:2时可疑，1:4时为阳性
• 2.ELISA试验某些国家已把ELISA（间接法）作为诊断该病的标准方法
• 但该病毒的抗体与牛疱疹病毒Ⅰ型抗体有交叉反应
• 在同等条件下，用已接种病毒和空白细胞培养物分别制备病毒抗原和对照细胞抗原
• 如被检血清在病毒抗原孔的吸收值较对照孔高
• 0.15以上者判为阳性
• 3.荧光抗体试验采取新鲜病料，做冰冻切片进行荧光抗体染色（间接法）检查，该法比病毒分离更快速
• 4.琼脂扩散试验抗原用PK-15细胞系生产制备，待检猪血清不稀释，25℃左右14～18h即可判定
• 但该方法尚需在实践中进一步验证
• 七、免疫与治疗本病尚无有效药物治疗，紧急情况下用高免血清治疗，可降低死亡率
• 目前针对该病的弱毒苗、弱毒灭活苗、野毒灭活苗及基因缺失苗已研制成功，在许多流行地区应用，能有效减缓猪感染后的临床症状，大大降低本病的发生，减少经济损失
• 但靠疫苗接种不能消灭本病，一般无本病猪场禁用疫苗
• 还有研究证明，当猪同时接种两种不同的基因缺失疫苗后，病毒会发生基因重组现象，因此在同一个动物体中只准使用一种基因缺失苗，以避免疫苗毒株间的重组
• 第四节猪瘟病毒猪瘟病毒(Hogcholeravirus，HCV)属于黄病毒科的瘟病毒属,是猪瘟的病原体，可以引起各种年龄的猪只发病
• 病的特征为急性、热性、高度接触性的传染病
• 该病毒感染后发病率极高，死亡率也很高，有时高达80～100%，对养猪业造成极为严重的危害
• 一、生物学特性猪瘟病毒是单股RNA病毒,相对分子量为4×106道尔顿
• 本病毒呈圆形颗粒状，其直径为38～44nm，核衣壳为对称的20面体立体结构
• 二、抵抗力猪瘟病毒是动物病毒中对外界环境抵抗力较强的一种
• 血液中的病毒在37℃存活7d，50℃存活3d，60℃加热16～24h、72～76℃加热1h杀死该病毒
• 存在于尿中的病毒，用2%氢氧化钠作用15min死亡
• 存在于血液中的病毒，用2%氢氧化钠需1h死亡，
• 2.5%的甲醛1h杀死病毒，
• 0.5%石炭酸杀死血中的病毒需用60多天
• 低温有利于保存病毒，-5～-12℃可生存3个月，在冷冻猪肉内存活6个月，-70℃下可存活数年
• 病毒在腐败的尸体中能存活3～4d，在骨髓内存活15d
• 在熏火腿中存活1～2周，薰肉中存活4周，腌渍猪肉中存活5周，盐渍猪肉中存活12周
• 三、抗原性

第6页：猪瘟病毒只有一个血清型

• 猪瘟病毒只有一个血清型，近来分离出很多致病力低的毒株，经鉴定为猪瘟病毒的变种，可引起非典型猪瘟，又叫做温和型猪瘟。猪瘟病毒和牛粘膜腹泻病毒具有共同的糖蛋白抗原，两种病毒在核酸类型、形态和理化特性等方面均较相似，但可用单克隆抗体予以鉴别。四、培养特性猪瘟病毒常应用猪胚或乳猪脾、肾、骨髓、淋巴结、白血球、结缔组织或肺组织细胞培养。在这些细胞上均不产生细胞病变。据报导美国的PAV-1株病毒，能在猪肾细胞培养产生明显的细胞病变。猪瘟病毒接种在猪睾丸细胞上不产生细胞病变，但在接种猪瘟病毒3d后，再接种鸡新城疫病毒，即产生明显的细胞病变，而且提高了鸡新城疫病毒的滴度。因此常根据细胞病变的有无，间接测定猪瘟病毒，这种方法叫鸡新城疫病毒强化试验(END试验)。这种强化试验，又可以被猪瘟免疫血清所抑制，所以常用作猪瘟病毒的中和试验。猪瘟病毒在猪肾细胞上不产生细胞病变，再接种鸡新城疫病毒也不出现细胞病变，但细胞培养液中的红细胞凝集效价滴度增高，用这种方法来检查猪瘟病毒，作为猪瘟的诊断手段，叫做血凝增加病变抑制试验(HEIC试验)。五、致病性本病毒只感染猪，各种年龄、性别及品种的猪均易感染，野猪也可以感染。猪瘟病毒人工接种于家兔、豚鼠、小鼠、绵羊、山羊、牛、马、猫均不发生明显的感染症状。但当静脉接种家兔后，再通过猪体，反复数代后，病毒可适应于兔体；再通过兔体多次传代后，可引起兔的体温升高，失去对猪的致病力，而得到一个毒力变异的毒株，即猪瘟兔化弱毒株。应用这个弱毒株制成兔化弱毒疫苗。这个疫苗在全国大量推广应用，在预防猪瘟病上收到了极显著的效果，有力的控制了本病的流行。这个弱毒株也可以在绵羊、牛、马等动物体内繁殖，同时也可在猪肾单层细胞上生长繁殖，用来生产疫苗。六、微生物学诊断猪瘟的诊断根据临床症状及病理剖检变化就可以确诊。但是对非典型的猪瘟就要应用微生物学检验方法。常用的有以下几种试验。(一)兔体交叉免疫试验取6只健康、体温正常的家兔，分成两组，每组3只。一组为对照组，一组为试验组。试验组接种1:10倍稀释的乳剂，经7~14d后，试验组和对照组均接种猪瘟兔化弱毒疫苗，测温2次/d，连续观察3d，如试验组不出现体温反应，即可确诊被检材料有猪瘟病毒。(二)病毒分离采取发病早期病毒血症而高热的扁桃体、淋巴结、脾放在组织研磨器内研碎，加入10%水解乳蛋白Hanks液，制成1:10倍稀释组织悬液。以2000~3000r／min离心20min，吸取上清液，加入青霉素1000IU/ml、链霉素500
• g/ml，置4℃冰箱内过夜。第2d取出接种于猪睾丸单层细胞，37℃培养2~4d，然后接种100PFU的鸡新城疫病毒，再培养2~3d，根据细胞病变的出现与否来判断猪瘟病毒的增殖。用这个方法可分离出自然感染病毒。但对兔化毒株感染动物，病毒则不产生鸡新城疫病毒滴度。病毒分离出以后，应用此病毒为抗原，与已知猪瘟病毒免疫血清作补体结合试验、中和试验或用分离病毒制备抗原与标准猪瘟病毒免疫血清作间接酶标记免疫试验，均可对病毒进行鉴定。除此以外，还可以应用免疫荧光抗体试验、酶标免疫试验、直接蚀斑形成试验等方法进行诊断

第7页：免疫与治疗主要是采用猪瘟兔化弱毒疫苗

• 七、免疫与治疗主要是采用猪瘟兔化弱毒疫苗和灭活疫苗进行主动免疫
• 可应用高免血清进行被动免疫和治疗，但价格昂贵，有效期短
• 第五节猪繁殖与呼吸综合征病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus，PRRSV）是引起猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的病原
• 属动脉炎病毒科（Arteriviridae）动脉炎病毒属（Arterivirus）
• 本病于1987年在美国西部首先发现，后来在加拿大、德国、法国、荷兰、比利时、英国、西班牙、希腊、澳大利亚等国都有报道
• 病毒在未分离鉴定之前，曾称本病为猪神秘病（MystcryswiIlcdisease，MSD）
• 又因患病猪的耳朵等处发绀变蓝，故又称“猪蓝耳病”（Blue-eared pigdisease）
• 一、生物学特性病毒为圆形，直径为50～60nm，含有20～35nm的核衣壳，在氯化铯中浮密度为
• 1.19g／cm3；
• 有囊膜，对乙醚、氯仿敏感；
• 病毒基因组为单股正股RNA，分子量约
• 1.5×106道尔顿
• 不凝集鸡、哺乳动物和人的O型红细胞
• 二、抵抗力该病毒在外界环境中的抵抗力相对较弱，对高温敏感
• 在深冻组织中病毒可存活数年，但在4℃仅存活1个月，37℃存活18h，56℃存活15min以内
• 在pH
• 6.0时稳定，在pH
• 5.0以下和pH
• 7.0以上均易失活，将肉尸保存于4℃18h仍能发现其中有活病毒
• 三、抗原性PRRSV的欧洲毒株和美洲毒株之间抗原性有差异，但也存在一些血清学交叉反应
• 根据其基因遗传性和病原性的差异，分为美洲型（ATCCVR-2
• 2）和欧洲型（LV）两个基因型
• 前者以ATCCVR-2332株为代表株，后者以LelystadVirus（LV）为代表株
• Gilbert等（1
• 7）建立了一种快速多联PCR法以区分这两型病毒的基因型
• 四、培养特性所有动脉炎病毒属病毒均能感染巨噬细胞，均能产生持续无症状感染，均有毒株变异性
• PRRSV的欧洲分离株仅能适应于猪肺巨噬细胞，能出现细胞病变，在美国分离的ATCCVR-2332毒株，可在CL-2621传代细胞或Marc-145细胞上生长并致细胞病变
• 五、致病性本病毒可侵害任何年龄的猪，对其他家畜和动物还未见发病报道，但已发现野鸭等禽类可携带本病毒
• 妊娠母猪和哺乳仔猪受害最严重，生长猪和育肥猪感染后症状较温和
• 母猪怀孕后期受病毒感染后，病毒可经胎盘感染胎儿
• 怀孕母猪发生流产、早产，早产胎儿可比正常分娩提早6周；
• 流产死胎数大量增加，可达50％以上，还有不少木乃伊胎
• 约有1％～2％的感染猪耳尖、四肢末端、尾巴及乳头呈蓝紫色，多发生于症状出现后5～7天，以耳尖变蓝为最常见（曾称猪蓝耳病）
• 母猪有的出现泌乳困难
• 耐过的母猪以后可重新怀孕，但窝产数和仔猪存活率下降
• 发病公猪主要表现为倦怠，嗜睡，精神状况下降
• 小猪发病后主要表现为呼吸困难，明显腹式呼吸和咳嗽等
• 断奶仔猪死亡率可达40％～100％
• 六、微生物学诊断采取病死猪的病料进行检查，其方法有以下几种：
• 一）病毒分离培养与鉴定用猪的肺、脾、死胎儿的肠及腹水、胎儿血清、母猪血液、鼻拭子和粪便等组织和病料分离病毒
• 先将病料剪碎研磨制成1:10乳剂，经1500r／min离心30min，取上清液加双抗，然后

第8页：再经

• 再经
• 0.22μm滤膜过滤，取滤液接种猪肺泡巨噬细胞培养，培养5d后，用免疫过氧化物酶法染色，检查鉴定肺泡巨噬细胞中的PRRSV
• 也可以将病料接种CL-2621或Marc-145细胞单层上，观察细胞病变，并用间接荧光抗体染色法或中和试验法进行病毒鉴定
• 二）酶标抗体染色法将采取的鼻粘膜、肺、气管、脾等组织进行冷冻切片，切片用丙酮固定10min，然后用过氧化物酶标记抗体染色（直接法），显微镜观察可见在支气管及肺泡中有许多上皮细胞感染PRRSV；
• 在脾脏的红髓中也有大量病毒
• 三）荧光抗体染色法：将病料（或接种病料后的CL-2621细胞单层）冷冻切片丙酮固定，用间接法进行荧光抗体染色，然后以荧光显微镜观察，可在细胞内发现病毒
• 此外，PCR和ELISA等技术亦用于本病的诊断
• 七、免疫与治疗对本病目前尚无有效药物进行治疗
• 主要采取综合防制措施，加强管理，彻底消毒
• 严格检疫，切断传播途径
• 如果育成猪发生急性PRRS，可采用抗生素防止或减少继发性细菌感染，提高猪的成活率
• 目前多采用基因缺失苗或灭活苗进行免疫接种
• 第六节猪细小病毒猪细小病毒(Porcineparvovirus，PPV)属于细小病毒科细小病毒属，是引起猪细小病毒病(又称猪繁殖障碍病)的病原体
• 主要侵害母猪
• 母猪(特别是初产母猪)受感染后产出死胎、畸形胎、木乃伊胎或病弱仔猪，偶有流产，但母猪本身无明显症状
• Cartwright等(1
• 7)从猪流产的胎儿中分离出了猪细小病毒，后来在欧洲、北美、南非、亚洲、非洲及大洋洲的许多地区或国家也发现了本病
• 我国(1
• 2)在北京分离到猪细小病毒，以后在上海、吉林、黑龙江、四川、浙江等省也相继分离到该病毒
• 一、生物学特性猪细小病毒呈圆形或六角形，无囊膜，直径20~23nm，20面体等轴立体对称，衣壳由32个壳粒组成，核酸为单股DNA
• 本病毒能凝集人“O”型、豚鼠、大鼠、小鼠、猴、猫、鸡和鹅的红细胞，其中以凝集豚鼠红细胞最好，鸡红细胞对本病毒的敏感性有很大的个体差异
• 不能凝集牛、绵羊、马、兔、仓鼠和猪的红细胞
• 二、抵抗力本病毒耐热能力强，能耐56℃48h或70℃2h，但80℃5min加热则丧失感染性和血凝活性
• 10~40%乙醇30min至2h或pH3~10作用下，其感染性无明显变化
• 对乙醚、氯仿等脂溶剂不敏感
• 甲醛蒸汽和紫外线需要相当长的时间才能杀死本病毒，
• 0.5%漂白粉或氢氧化钠5min可杀死病毒
• 三、抗原性该病毒只有一个血清型，与其他细小病毒无抗原关系
• 四、培养特性猪细小病毒能在多种猪的原代细胞(如猪肾、猪睾丸细胞等)、传代细胞(如PK
• 5、IBRS
• 2、ST细胞等)上生长繁殖
• 在单层细胞长至1／2~3／4时接种病毒，或在制备细胞悬液时加入病毒(同步接种)，有利于病毒增殖
• 病毒生长后可出现细胞病变，即细胞变圆、脱落、裂解
• 病毒在细胞内可形成核内包涵体
• 五、致病性猪是本病毒的易感动物，不同月龄的猪均可感染，但最易感的是初产母猪
• 病毒可通过病猪的口鼻分泌物、粪便等排出体外，污染猪舍、用具等引起水平传播；
• 感染母猪可通过胎盘垂直传播给胎儿；
• 感染公猪的精液也含有病毒，可通过配种传

第9页：染给母猪

• 染给母猪
• 引起流产、死胎、木乃伊胎、水肿胎、产弱仔等，母猪怀孕早期感染时，胚胎、胎猪死亡率可高达80~100%
• 本病呈地方性或散发性流行，发病猪如不进行免疫预防，能持续多年甚至十几年不断地发生繁殖障碍
• 六、微生物学诊断
• 一)病毒分离采取流产胎儿、死产仔猪、木乃伊胎的肝、肾、肺、睾丸、脑等病料，研磨制成5~10倍乳剂，离心取上清液，加抗生素处理后接种原代猪胚肾细胞培养或PK细胞系培养
• 病毒培养16~36h后，细胞形成核内包涵体，培养24~72h出现细胞病变(细胞变圆、脱落、裂解)，一般在细胞开始脱落时收获病毒，再盲传几代，然后用分离到的病毒与特异血清进行中和试验和血凝抑制试验以鉴定
• 如果病毒接种猪肾细胞，培养后不出现细胞病变，则需盲传2代，若再不出现病变者可判为阴性
• 二)血清学检查常用试管或微量反应法进行血凝抑制试验
• 此外，PCR法适用于持续感染的诊断
• 七、免疫与治疗母猪配种前2个月左右用灭活油乳剂苗或弱毒疫苗进行免疫，可预防本病发生
• 仔猪母源抗体的持续期为14~24周，其抗体效价大于1:80时可抵抗猪细小病毒的感染
• 对本病目前尚无有效药物进行治疗
• 控制带毒猪进入猪场在引进种猪时应加强检疫，严防病猪引进猪场
• 引进猪经隔离饲养2周，再进行一次血凝抑制试验，证实为阴性者，方可与本场猪混饲
• 第七节猪圆环病毒猪圆环病毒（Porcinecircovirus,PCV）是一种圆形小颗粒病毒，属圆环病毒科圆环病毒属
• 猪圆环病毒存在两种血清型，即PCV-1和PCV-2，PCV-1无致病性，PCV-2是引起猪断奶后多系统衰竭综合征（postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS）的病原体
• 该病主要发生在仔猪，一般在断奶后2~3周开始发病，主要特征为进行性消瘦，皮肤苍白或黄疸，呼吸急促等
• 一、生物学特性猪圆环病毒呈球形20面体对称结构，大小约4~26nm，直径平均为17nm，无囊膜，单股环状DNA病毒，基因组大小约为
• 1.76kb，为已知的最小动物病毒之一
• 二、抵抗力猪圆环病毒对外界理化因子的抵抗力较强，在酸性环境中可存活较长时间
• 在70℃时可以存活15分钟，56℃不能将其灭活
• 氯仿作用不失活
• 三、抗原性猪圆环病毒存在两种血清型，即PCV-1和PCV-2，而且两个血清型之间基本无交叉反应
• PCV-1无致病性，PCV-2是PMWS的主要病原
• PCV-2能够进入猪体巨噬细胞内而不被破坏，并能干扰猪巨噬细胞，改变或抑制猪免疫系统，使猪对感染十分敏感而直接引起仔猪的多系统衰竭综合征
• 四、培养特性猪圆环病毒能在猪源和Vero细胞中生长繁殖，但不产生细胞病变
• PCV-1和PCV-2均可在PK-15细胞上增殖，SterensonGW等观察了感染PCV后PK-15细胞内的超微结构，发现细胞质和细胞核中有包涵体，并且细胞质中数量较多，包涵体

第10页：呈圆形

• 呈圆形、大小不
• 一、电子密度较高
• 五、致病性猪圆环病毒二型（PCV-
• 2）及其相关的疾病已在全世界范围内发生与流行
• 猪圆环病毒对猪具有较强的易感性，可经口腔、呼吸道感染不同年龄的猪，常见于6~8周龄的猪，哺乳猪很少发生
• 少数怀孕母猪感染猪圆环病毒后，可经胎盘垂直感染给仔猪
• 潜伏期一般为2周
• 病猪表现为被毛粗乱，喜堆一起，精神沉郁，食欲减退，呼吸急促，衰竭无力，皮肤苍白，有时可见黄疸
• 患猪腹泻，进行性消瘦，体表淋巴结肿大
• 本病毒常与猪呼吸道与繁殖障碍综合征、猪伪狂犬病、猪细小病毒等疫病混合感染
• 六、微生物学诊断
• 一)病毒分离鉴定PMWS暴发流行时采集样品，制成悬液接种PK-15等细胞，但PCV-2在细胞培养中生长不出现细胞病变，通常需要应用病毒特异性抗体才能证实病毒的复制
• 可检查病毒的特异性抗原或特异性DNA
• 二)血清学方法可用间接荧光抗体技术或竞争ELISA方法检测
• 三)电子显微镜检查可观察到病猪的脾、淋巴结等组织细胞核内堆积大量的无囊膜病毒粒子，结合病毒粒子的形态可进行确认
• 此外，PCR法适用于持续感染的诊断
• 七、免疫与治疗目前，对本病还没有疫苗可供使用，也没有有效药物治疗
• 但抗生素疗法和良好的管理有助于控制并发感染
• 本病的防制主要是加强兽医防疫工作，防止本病传入，加强饲养管理，实行全进全出制，以及预防并发或继发感染
• 第八节猪流行性感冒病毒猪流行性感冒病毒（Swineinfluenzavirus,SIV）属正粘病毒科流感病毒属，简称猪流感病毒
• 一、生物学特性典型的病毒粒子呈球形，直径80～120nm，平均为100nm
• 某些毒株，特别是在初次分离时，常呈丝状，丝状体长短不一，长者可达数微米
• 本病毒为单股RNA病毒，有囊膜，囊膜上有两种不同型的纤突致密地镶嵌成规则的毛边样，一种是血凝素（HA），是棒状的核蛋白多聚体；
• 另一种是神经氨酸酶（NA），呈蘑菇状，是完全不同于某些正常细胞中相应酶的糖蛋白多聚体
• 二、抵抗力猪流感病毒对干燥和冰冻的抵抗力强，病料中的病毒在50%甘油中存活40天，60℃加热20分钟灭活，一般消毒剂对其均有灭活作用
• 三、抗原性感染猪的流感病毒已发现至少有5种亚型，即H1N（1包括猪H1N7和禽源H1N
• 1）、H3N2（人H3N2和禽源H3N
• 2）、H1N
• 2、H3N6和H1N7，各亚型间有不同程度的血清学交叉反应
• 只有H1N1与欧洲型H3N2能引起猪发病
• 它们的抗原性与同时期引起人流感大流行的H1N1和H3N2关系密切
• 四、培养特性猪流感病毒能在鸡胚中培养增殖，并能在猴肾细胞、胎猪器官内培养生长
• 当今最常应用10日龄鸡胚的羊膜腔或羊膜腔—尿囊腔同时接种法分离猪流感病毒，感

第11页：染鸡胚大多不死亡

• 染鸡胚大多不死亡，但鸡胚液中出现HA
• 五、致病性各种不同年龄、性别和品种的猪对猪流感病毒均有易感性
• 猪流感的传染源是病猪和带毒猪（痊愈后带毒6～8周）
• 病毒存在于病猪或带毒猪的鼻液或支气管、支气管渗出液以及肺和肺淋巴结内
• 传染途径主要是呼吸道
• 六、微生物学诊断
• 一）病毒分离与鉴定采取发病2～3天急性病猪的鼻分泌物或气管、支气管渗出物作为病料，用生理盐水作适当稀释后，经3000r/min离心沉淀10分钟，吸取上清液，加入双抗于4℃感作1小时，按羊膜腔和尿囊腔各
• 0.2ml同时接种
• 将接种后的鸡胚置33～35℃孵育3天，随后采集羊水和尿囊液，作血凝试验，如果盲传3代仍无HA出现，则为阴性结果；
• 如果出现HA，即可进行病毒鉴定，以新分离病毒作为HA抗原，应用已知的各亚型毒株的免疫血清进行血凝抑制试验
• 二）血清学诊断采取病猪急性期和恢复期（相距2～3周）的双份血清进行血凝抑制试验，如果恢复期血清的抗体效价比急性期血清升高4倍以上，即可诊断为流感
• 七、免疫与治疗猪在流感痊愈后，产生比较坚强持久的免疫力，极少发生第二次感染，但康复猪却可能成为较长期的带毒和排毒者
• 因此，病后康复的种猪，可能成为传播本病的慢性带毒者
• 有关猪流感疫苗，正处于研制阶段，未见推广应用，有福尔马林灭活疫苗的研究报道
• 第十五节禽流行性感冒病毒禽流行性感冒（简称禽流感）是由禽流行性感冒病毒（Avianinfluenzavirus，AIV）引起的一种呼吸系统、全身性败血症等多种病症的禽类烈性传染病
• 本病1878年首先发现于意大利，以后欧、美、非、亚洲的许多国家相继发生，直至1955年才弄清楚病原为A型流感病毒
• 1994年我国广东省某些鸡场发生一种以产蛋下降、呼吸困难等为主要特征的传染病，经病毒分离鉴定为H9N3毒株，确定了该病在我国的存在（自1959年以来从鸡中分离到AIV见表10-
• 1）
• 禽流感的爆发流行给养禽业造成很大的经济损失
• 禽流感已经被国际兽疫局(OIE)定为Ａ类传染病，并被列入国际生物武器公约动物类传染病名单
• 表10-1自1959年以来从鸡中分离到的流感病毒病毒亚型时间国家（地区）H5N1H10N8H5N2H3N2，H3N1，H6N2，H5N？，H4N？，H7N？H7N7H4N8H6N1H5N2H1N1，H3N2，H3N6，H6N4，H3N91959196619801967-19791975-19851975197919841975-1978苏格兰意大利前苏联澳大利亚美国（阿拉巴马）（明尼苏达）（宾西法尼亚）香港

第12页：11 6 6 2 9 2

• H11N6H6N2H9N2，H6N2H7N2H8N2，H6N5，H12N5，H8N9，H8N6，H8N3H1N5，H8N5H9N3H5N1H5N1197819791978-198019801990199219972003-2004比利时法国以色列台湾中国香港亚洲
• 一、生物学特性禽流感病毒属于正粘病毒科、流感病毒属
• 典型病毒粒子呈球形，也有的呈杆状或丝状，直径约80～120nm
• 含单股RNA，核衣壳呈螺旋对称
• 外有囊膜，囊膜表面有许多放射状排列的纤突（Spikes），纤突分两类，一类是棒状，由血凝素（HA）分子的三聚体构成；
• 另一类是蘑菇状，由神经氨酸酶（NA）分子的四聚体构成，两种结构在囊膜上的比例约为HA：NA＝75：20
• A型流感病毒的基因组是由分子量不同的8个片段所组成，每个片段分别转录和复制不同的蛋白质，8个片段编码的蛋白质分别为PB
• 1、PB
• 2、PA、HA、NP、NA、M
• 1、M
• 2、NS1和NS210种
• 亚型毒株混合感染时，易发生基因的交换和重组，这是流感病毒发生变异的基础
• 禽流感病毒能凝集多种动物的红细胞，这种凝集现象可被特异性的血清所抑制
• 根据禽流感病毒与新城疫病毒凝集红细胞种类的不同（见表10-
• 2），可初步鉴别两种病毒
• 表10-2NDV和AIV对不同红细胞的凝集作用鸡小白鼠豚鼠兔猪山羊绵羊骡驴马人红细胞来源++++++±±---+-+-+-+-++±NDVAIV
• 二、抗原性根据禽流感病毒HA和NA抗原性的差异，又可将其分为不同的亚型
• 迄今为止，A型流感病毒的HA已经发现16种，分别以H1～H16命名
• NA已发现10种，分别以N1～N10命名
• 在自然界中，这两种抗原又以不同的组合，产生极其多样的亚型毒株
• 根据流感病毒的核蛋白（NP）和膜蛋白（MS）抗原性的不同，将其分为A、B、C三个血清型，三型之间的差异可通过琼脂扩散试验或补体结合试验等进行测定
• 根据1980年世界卫生组织公布的流感病毒命名方法，一株流感病毒的名称包括以下几项内容：型别／宿主／分离地点／毒株序号／分离年代（HA亚型和NA亚型）
• 如A／duck／Ireland／113／83（H5N
• 8），这是一株分离自鸭的A型流感病毒，分离地点为爱尔兰，毒株序号113，分离时间为1983年，亚型为H5N8
• 三、抵抗力禽流感病毒对外界因素的抵抗力较弱
• 加热56℃30min、60℃10min、65～70℃数分钟即可丧失活性
• 对紫外线、甲醛、乙醚等敏感
• 合成去污剂、肥皂和氧化剂可使病毒灭活
• 但对低温的抵抗力较强
• 受尿囊液中蛋白质保护的病毒，在4℃下

第13页：可存活30～35d

• 可存活30～35d，20℃存活7d；
• 在羽毛中的病毒存活18d，在干骨头或组织中存活数周，在冷冻禽肉和骨髓中可存活10个月
• 四、培养特性禽流感病毒可在鸡胚中生长，经尿囊腔接种9～11日龄鸡胚，接种后35～37℃培养，6～72h病毒生长达最高峰
• 第一代即达到较高的血凝滴度，有些毒株可使鸡胚死亡
• 多数毒株可在鸡胚肾、鸡胚成纤维细胞中生长，并形成空斑
• 鸭流感病毒还能在人和牛胚细胞中增殖，并出现细胞病变
• 病毒在适应于鸡、鸭或人的细胞后对禽的毒力减弱
• 五、致病性禽流感病毒易感动物包括鸡、火鸡、鹌鹑、鸽、鹅、野鸡、珍珠鸡、燕鸥等
• 高致病力的禽流感病毒毒株可引起禽类的大批死亡而造成极大的经济损失，历史上造成高致病力禽流感大暴发的毒株都属于Ｈ5或Ｈ7亚型；
• 低致病力禽流感病毒毒株呈致病性极低的呼吸道感染、产蛋下降或呈隐性感染，只引起少量死亡或不死亡
• 目前，我国部分地区流行以Ｈ9亚型为主的中低致病力禽流感，已经并正在给我国养禽业造成很大的经济损失，这一点已引起国内各界的广泛关注
• AIV可经多种途径传播，水平传播效率极高，其致病力变异也极为复杂
• 感染禽可从呼吸道、结膜和粪便中排出病毒，经直接接触传播或经空气间接传播给易感禽类
• 禽流感的潜伏期一般3～5d，临床症状、病理变化因感染毒株毒力的强弱、病程长短和禽种的不同而变化不一
• 流行初期的急性病例，可不出现任何症状而死亡，此类病例，可见体温升高
• 3.3～
• 4.6℃），精神沉郁，食欲下降，不愿走动，羽毛松乱，头翅下垂，鸡冠和肉髯发黑，母鸡产蛋停止，头部常出现水肿，眼睑、肉髯肿胀，眼结膜发炎、流泪，呼吸困难，常发出“咯咯”声，鼻分泌物增多，病鸡常摇头，企图甩出分泌物
• 有的鸡出现神经症状和下痢
• 最急性感染的发病率和死亡率可达到100％
• 特征性的病变是口腔、腺胃、肌胃角质膜下层和十二指肠出血，胸骨内面、胸部肌肉、腹部脂肪和心肌均有散在性的出血点
• 腹膜和心包充血或积液
• 卵囊和输卵管充血或出血
• 六、微生物学诊断
• 一）病毒分离：以采集气管和泄殖腔拭子为最佳，禽类死后，一般取气管、肺、脾、肝等病料，用生理盐水制成1：10悬液，离心，上清液加双抗，于4℃作用30min，过滤，取滤液接种9～11日龄的SPF鸡胚，
• 0.1ml／只，采取尿囊液，做血凝试验，若无血凝性，再盲传1～2代再做血凝试验
• 二）血清学检查：结合病毒分离可进行血凝抑制试验、琼脂扩散试验、中和试验及ELISA等试验，对该病毒进行诊断检测
• 另外还有直接荧光法和间接荧光法等，均可有效地检测出AIV
• PCR是近几年发展成熟起来的一种体外基因扩增技术，能有效地用于多种病毒的基因检测和分子流行病学调查等
• 逆转录-聚合酶链式反应(ＲＴ-ＰＣＲ方法)分子诊断技术，是依据血凝素(ＨＡ)的参考序列，设计一对引物建立的一种直接检测禽粪样和病毒尿囊液中AIVRNA的方法，可从基因水平检测禽流感RNA基因，具有高度的敏感性,结合测序,可显示很高的特异性
• 七、免疫与治疗我国已研究成功H9亚型AIV油乳剂灭活苗,每羽皮下或肌肉注射
• 0.5～1ml，注射后7d就产生保护力达80%,14d后达100%保护,免疫期为6个月,如第一次注射后再加强免疫一次,将会使抗体显著升高和延长保护期
• 一般认为疫苗接种是控制和扑灭禽流感的一种较有效手段,但必须在严格限制和控制条件下实施,以防AIV扩

第14页：散

• 散
• 同时,发生高致病力的AI时,应禁止使用疫苗,因为预防接种会干扰血清学调查,不利于扑灭工作
• 一旦发生疫情，要早诊断，做好隔离、封锁、消毒、扑杀等措施
• 第十六节马立克氏病病毒鸡马立克氏病病毒（Marek’sdiseasevirus,MDV）MDV为疱疹病毒科未分属成员，又名为禽疱疹病毒2型，是引起鸡马立克氏病（Marek’sdisease,MD）的病原体
• 一、生物学特性MDV外形近球形
• 这种病毒在鸡体内有两种存在形式，第一种是不完全病毒，它是无囊膜的裸体病毒，在肿瘤细胞中与细胞严格地结合，当细胞破裂时，病毒也随之失去传染性，与细胞共存亡，其直径为85～100nm的核衣壳，血液中病毒只存在于白细胞中
• 第二种是完全病毒，在羽毛的上皮细胞及脱落的皮屑中，为成熟型的病毒
• 病毒外有厚的囊膜，是非细胞结合性病毒，可脱离细胞而存活，直径可达273～400nm，可从羽囊上皮细胞分离出具有感染性的游离病毒
• 病毒基因组为双股DNA
• MDV可以在多种细胞内复制
• 二、抵抗力MDV中的不完全病毒与细胞相依存，脱离细胞后，即失去活力
• 一旦细胞死亡，病毒也死亡
• 完全病毒对外界环境有较强的抵抗力，存在于皮屑中或灰尘内的病毒，1年后仍有感染力
• 三、抗原性MDV在血清学上可分为对鸡致病的血清Ⅰ型以及另外两组从鸡和火鸡的自然病例分离到的非致病性疱疹病毒血清Ⅱ型（非致瘤毒株）和血清Ⅲ型（火鸡疱疹病毒，HVT）
• 马立克氏病病毒还容易发生基因突变而增强毒力
• 四、培养特性能在刚孵出的幼雏、组织培养和发育的鸡胚中生长繁殖
• 用病鸡血液和肿瘤细胞悬液接种1日龄雏鸡，经2～4周，神经节、神经干和一些内脏器官中出现病变，3～6周可见到肉眼病变
• 鸡肾细胞和鸭胚成纤维细胞培养，适合于马立克氏病毒的增殖
• 细胞内常常形成圆形、折光性细胞团的灶状病变
• 损害的细胞上常可看到A型核内包涵体
• 鸡胚卵黄囊接种，经12～14d，绒毛尿囊膜上发生病毒痘斑
• 五、致病性MDV主要引起雏鸡、火鸡发病
• 在临床上有四种表现型，即神经型、内脏型、眼型和皮肤型
• 六、微生物学诊断马立克氏病可以根据鸡的特征性麻痹症状及病理变化综合诊断
• 必要时做微生物学诊断，主要做病毒的分离和血清学诊断
• 一）病原的分离取病鸡的组织滤液或新鲜血液，腹腔接种于7日龄SPF雏鸡的腹腔，每只
• 0.3～
• 0.5ml，接种4～6只，接种后严格隔离，并做已知的特异性免疫血清处理病料做对照鸡试验，接种后2～10周观察接种鸡和对照鸡的病理变化、组织学变化
• 若试验鸡有典型病变和组织学病变，而对照鸡未出现，则证明雏鸡发生了马立克氏病毒感染
• 另外还可通过鸡胚分离培养法和组织培养分离法分离病毒

第15页：琼脂扩散试验用已知的高免血清检查体内

• 二）琼脂扩散试验用已知的高免血清检查体内的抗原，被检抗原应是鸡羽囊上皮中的病毒抗原
• 将待检鸡的腋下拔下一根羽毛，剪下毛根尖的下端，插在琼脂扩散板的外周检验孔内，每只鸡1根羽毛用1个孔，中央孔内加入马立克氏病毒高免血清
• 将琼脂板放入铺有湿沙布的搪瓷盘中，放15～30℃下进行反应，2～3d,抗原与抗体孔之间出现白色沉淀线为阳性
• 此外还可以做间接荧光抗体试验和间接血凝试验
• 七、免疫与治疗采用MD疫苗免疫
• 第十七节鸡新城疫病毒鸡新城疫病毒（Newcastlediseasevirus，NDV）是副黏病毒科（Paramyxoviridae）腮腺炎病毒属（Rubulavirus）
• 它引起一种急性发热性、高度接触性的传染病，常呈败血性经过
• 出现以呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、黏膜和浆膜出血等症状和病变
• 一、生物学特性病毒粒子呈球形，具有囊膜，其大小差别从120～300nm，通常为180nm左右
• 病毒核酸为单链负股、不分节的RNA
• 二、抵抗力NDV在鸡舍内可生存7d，鸡粪内50℃可存活5个半月，鸡肉尸内的病毒在15℃时可存活98d，骨髓内的病毒可存活134d
• 对低温的抵抗力强，4℃可存活数天，对乙醚、氯仿敏感
• 三、抗原性NDV只有一个血清型，但毒株的毒力有着较大的差异
• 四、培养特性大多数病毒株可以在多种细胞上生长，如鸡胚、成鸡、猴肾、猪肾、地鼠肾细胞组织培养上生长，并且引起细胞的病变，使感染的细胞形成蚀斑
• 五、致病性NDV对鸡有很强的致病力，使鸡发生新城疫
• 来航鸡及其它杂种鸡比本地鸡的易感性强，死亡率也高
• 各种年龄的鸡均易感，但幼雏易感性最高
• 对水禽致病力低，一般不能自然感染
• 观赏鸟类如孔雀、鸽、鹦鹉等都能自然感染发病
• 有的国家因进口观赏鸟类，引进了本病毒，致使疾病广泛传播，造成经济损失
• 六、微生物学诊断
• 一）病毒的分离
• 1.鸡胚分离法
• 2.细胞培养分离法将经过处理的检样材料接种于鸡肾单层细胞或鸡胚成纤维单层细胞上，经过35～37℃孵育2d，观察单层细胞上出现的蚀斑
• 二）血清学试验
• 1.红细胞凝集抑制试验（HI）应用已知鸡新城疫病毒来检测病鸡体内的抗体
• 病程5～6d以上者，血液有抗体产生，病程10d以上者，其抗体效价可达1:1280或更高，所以应用已知病毒来测定可疑血清的方法更有实际意义
• 七、免疫与治疗严格按照免疫程序接种
• 雏鸡10～12日龄首免,用Ⅳ系苗点眼和滴鼻；
• 25～30日龄二免,用Ⅳ系苗饮水免疫；
• 60～70日龄三免,用Ⅰ系苗或油乳剂灭活苗
• 0.5ml皮

第16页：第十八节 鸡传染性法氏囊病病毒鸡传染性法

• 下注射,以后每隔半年加强免疫１次
• 第十八节鸡传染性法氏囊病病毒鸡传染性法氏囊病病毒（Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV）是引起鸡传染性法氏囊病(IBD)的病原体
• 一、生物学特性病毒呈球形，无囊膜，直径约60nm，有一层外壳，20面体对称
• 基因组含有A、B两个片段的线状双股RNA分子，大小6Kbp
• A节段
• 3.2Kb，编码VP
• 4、VP
• 2、VP
• 3、VP5；
• B节段
• 2.8Kb，编码VP1，是RNA聚合酶
• IBDV除完整病毒粒子外，还常见有空衣壳
• 二、抵抗力本病毒对各种理化因素都有较强的抵抗力
• 具有很高的热稳定性，于56℃可存活5h，于60℃存活90min
• 耐酸性（pH
• 3）强
• 对乙醚、氯仿和胰蛋白酶有抵抗力
• 对紫外线也有较强的抵抗力
• 三、抗原性本病毒有两种血清型，Ⅰ型和Ⅱ型
• 两种血清型可用中和试验鉴定
• 血清Ⅰ型病毒主要感染鸡，在火鸡中能传染但无致病性
• 血清Ⅱ型病毒感染火鸡，鸡呈亚临床感染
• 四、培养特性本病毒可在鸡胚中生长，被接种的鸡胚一般在接种后3～7d死亡
• 也可在鸡胚成纤维细胞内增殖，并形成蚀斑
• 鸡胚适应毒还可在兔肾细胞（RK-
• 3）上生长，均产生细胞病变
• 五、致病性本病毒主要侵害3～6周龄雏鸡
• 各种品种的鸡均可感染，来航鸡更为易感
• 肉用雏鸡的饲养期一般不超过8周龄，故最为常见，受害也最重
• 六、微生物学诊断采取病鸡的法氏囊、脾脏等组织进行诊断
• 其方法有以下几种：
• 一）鸡胚接种取病料悬液经无菌处理后，离心取上清，经绒毛尿囊膜（CAM）接种9～10日龄鸡胚
• 0.1ml／胚），鸡胚常于4～6天死亡，观察尿囊膜和死胚病变：鸡胚发育呆滞,水肿和全身出血,绒毛尿囊膜水肿出血
• 二）琼脂扩散沉淀试验（AGP）应用含8％NaCl的pH
• 7.4PBS液配制1％琼脂，在培养皿中制备琼脂板，用IBDV阳性、阴性抗原和相应的阳性、阴性血清作对照
• 检测病鸡病料悬液（1:5～1:
• 0）中的抗原
• 37℃24h孵育后，若在待检样品与标准阳性血清之间有一清晰沉淀线，并与标准阳性抗原和标准阳性血清之间形成的沉淀线吻合,为被检阳性
• 另外，应用电镜检查，荧光抗体技术及免疫酶技术等都可进行快速诊断
• 七、免疫与治疗一旦发生本病流行，可用IBD高免卵黄或高免血清进行紧急治疗，效果非常明显
• 预防接种常用的疫苗主要有两种：l.活疫苗：活疫苗分为三类：一是温和型疫苗，对法氏囊没有任何损害，但使用此类疫苗鸡群的保护率较低，D78，PBG98，LKT，LZD228等属此类疫苗
• 二是中毒力疫苗，此类疫苗接种雏鸡后，对法氏囊有轻度可逆性的损伤，但不影响囊的

第17页：正常发育

• 正常发育，不会造成免疫干扰
• 雏鸡首免后中和抗体在5d产生，7d达到较高水平
• 经2次免疫后，接苗雏鸡对自然界Ⅰ型病毒的保护率在85～95％，免疫鸡中和抗体价在1:640～1:2560之间，琼扩的阳性率在70～80％
• 目前国外最常用的中毒力苗是联邦德国产的Cu-l、国内是BJ－836
• 三是毒性型疫苗，此种苗对雏鸡有一定的致病力和免疫抑制力，所以目前各国都不使用
• 第十九节鸡传染性支气管炎病毒鸡传染性支气管炎病毒（Avianinfectiousbronchitisvirus，IBV）属冠状病毒科冠状病毒属（Coronavirus）
• 由IBV所引起的鸡的急性、高度接触性呼吸道疾病，称为鸡传染性支气管炎（IB），其特征为病鸡咳嗽、喷嚏，发出罗音；
• 幼鸡流鼻液，蛋鸡产蛋数量和质量下降；
• 肾型病鸡肾肿大、苍白，有大量尿酸盐沉积等
• 一、生物学特性病毒粒子略呈球形，有囊膜，病毒核酸为正股单链RNA
• 本病毒在胞浆内复制，未经处理的鸡传染性支气管炎病毒不能凝集红细胞，但是鸡胚尿囊液中的病毒用1%胰蛋白酶37℃处理3h之后，则能凝集鸡红细胞
• 二、抵抗力病毒的热稳定性随毒株的不同而异
• 在37℃9～30h丧失感染性，在低温保存时稳定，鸡胚尿囊液和细胞培养物中的病毒，可在-30℃～-60℃存活几个月
• 三、抗原性本病毒由于基因组大而易发生突变，产生许多抗原性及致病性的变异株
• IBV现在至少有20多个血清型和为数更多的变异株
• 各血清之间没有或仅有部分的交互免疫作用
• 自然感染和人工感染都可获得自动免疫
• 感染后第3周，产生大量中和抗体
• 康复鸡可获得约1年的免疫力
• 自然感染或人工感染后恢复的母鸡，其蛋内存在母源抗体，能给新孵出的雏鸡提供天然获得性免疫
• 这种雏鸡的血清抗体可保持14d，以后逐渐降低、消失
• 被动免疫只能减轻疾病的症状，不能预防本病毒的呼吸道感染
• 四、培养特性传染性支气管炎病毒能在鸡胚、鸡胚气管以及来自鸡和鸡胚的多种细胞培养物内生长
• 初代分离最好应用鸡胚
• 一）鸡胚：病毒在发育的鸡胚中生长良好
• 一般采用9～11日龄的鸡胚尿囊腔接种
• 最初几代鸡胚极少发生变化，随着传代次数的增加，鸡胚死亡率增高，鸡胚病变明显，至第10代时，可使80%鸡胚死亡
• 鸡胚的主要变化是鸡胚发育不良，胚体小，卷缩呈球形，尿囊膜增厚，羊膜紧贴在胚体上，卵黄囊皱缩，肝脏可能出现坏死，也可能产生肺炎及肾炎病变，绒毛尿囊膜及羊膜水肿
• 二）细胞培养：新分离的病毒难以在细胞单层中生长，但大多数毒株在鸡胚中继代6～10次后，即可在15～18日龄鸡胚肾细胞（CEK）中生长
• 培养此病毒最常用的是鸡胚肾细胞和肺细胞，肝细胞的敏感性较差，鸡胚成纤维细胞（CEF）的敏感性最差
• 五、致病性在自然条件下，鸡传染性支气管炎病毒，可感染各种年龄的鸡，1～4周龄的雏

第18页：鸡和幼鸡最为严重

• 鸡和幼鸡最为严重
• 主要症状为精神不振，呼吸困难、气管罗音、咳嗽、喷嚏
• 幼鸡的病死率约为25%，雏鸡可达70～90%，6周以上的鸡通常不死亡
• 产蛋鸡的产蛋量下降，并常产出软壳蛋和畸形蛋，蛋的质量降低
• 某些毒株，可引起鸡的肾病
• 幼鸡的病理变化是鼻窦炎、卡他性气管炎、支气管炎、肺充血和水肿，偶而气囊混浊增厚
• 鼻道中常有卡他性渗出物，支气管内有干酪样堵塞物
• 由侵害肾脏的毒株致病时，肾脏肿大、苍白、肾小管和输尿管内充满尿酸盐结晶
• 六、微生物学诊断
• 一）病毒的分离鉴定
• 二）血清学试验
• 1.病毒中和试验：应用已知的病毒检查待检血清中的特异性抗体，分别采取病初和2～3周后的双份血清，同时测定两份血样对鸡传染性支气管炎病毒的中和抗体效价，如第2次（康复期）血样的中和抗体滴度高于第一次血样4倍以上，即可诊断为鸡传染性支气管炎
• 2.荧光抗体试验：可用于鸡传染性支气管炎病毒感染的快速诊断——检测急性病鸡气管涂片中的鸡传染性支气管炎病毒
• 取气管上皮涂片，在空气中干燥，丙酮固定后，用荧光抗体在37℃湿盘中染色15～30min，将染片在pH
• 7.2缓冲盐水中涮洗，而后干燥，滴加缓冲盐水和甘油的等量混合液，盖上盖玻片，即可在荧光显微镜下检查
• 因在各个血清型之间具有某些交叉反应性，所以荧光抗体不能鉴别到型
• 七、免疫与治疗建立无病鸡群是根本性的预防措施
• 灭活苗效果不佳，弱毒苗被广泛地应用
• 疫苗来自无毒力的分离株，或者通过在鸡胚传代致弱
• 免疫途径包括饮水、喷雾或点眼
• 由于鸡传染性支气管炎病毒不断出现新的突变株，免疫效果有时不好
• 第二十节鸡喉气管炎病毒鸡喉气管炎病毒（Avianinfectiouslaryngotracheitisvirus，ILTV）属疱疹病毒科（Herpesviridae）疱疹病毒甲亚科(Akphaherpesvirinae)，类传染性喉气管炎病毒属（Infectiourlaryngotracheitis-likeviruses）
• 由该病毒引起的急性疾病，以呼吸困难、气喘、咳出血样渗出物为特征，受侵害的气管黏膜细胞肿胀与水肿，导致糜烂和出血
• 该病能使产蛋量下降并导致死亡率增加
• 一、生物学特性本病毒系球形带囊膜的较大病毒，主要由核心、衣壳和囊膜三部分组成
• 无囊膜的核衣壳直径约100nm
• 衣壳为二十面立体对称
• 二、抵抗力本病毒对热、脂溶剂及许多消毒剂均敏感
• 经乙醚处理24h后，即失去传染性
• 在55℃经10～15min即被破坏
• 三、免疫性虽然体液免疫与感染有关，但对于喉气管炎病毒感染，它并不是主要的保护机制，而是以细胞介导的免疫为主
• 鸡喉气管炎母源抗体虽能经卵传给子代，但不能提供保护作用，也不干扰鸡的免疫接种
• 在免疫接种或野外感染鸡喉气管炎病毒后，两周龄以上的鸡迅速产生免疫力，3～4d内可产生部分保护，到6～8d能完全保护
• 四、培养特性

第19页：本病毒呈现高度的宿主特异性

• 本病毒呈现高度的宿主特异性，只能在鸡胚及其细胞培养物内良好增殖
• 虽能在Hela细胞内增殖，但不形成细胞病变
• 本病毒易在10日龄鸡胚绒毛尿囊膜上生长，产生孤立的大小不一的痘疱
• 五、致病性各种年龄和品种的鸡都易感，一年四季均可发生
• 鸡传染性喉气管炎病毒的自然入侵门户是上呼吸道
• 经口途径能感染鼻上皮细胞，是另一种感染方式
• 在自然情况下，飞沫传染是最基本的传播方式
• 但通过人、野鸟、鼠类、犬以及病毒污染用具的机械携带，也能引起传播
• 目前还未证实蛋内或蛋壳上的病毒能经蛋传播
• 病鸡麦现为咳嗽和气喘、流涕等，严重的呼吸困难，伸颈摇头，作挤压状，并咳出血样粘液，发病率可达100%，死亡率一般为50～70%，因毒株的毒力而异
• 低毒株死亡率只有20%，表现为结膜炎及产蛋下降等
• 病变以气管及喉部组织为主
• 六、微生物学诊断
• 1.病毒的鉴定：除对病毒的一般特性和形态进行检查外，重点在于用已知毒株的免疫血清进行病毒中和试验
• 但在自然流行中毒力较弱的毒株，常不能被已知标准强毒的免疫血清中和
• 因此，当其他特征与本病毒相符时，也应判定为鸡喉气管炎病毒
• 2.病毒抗原的检测：应用荧光抗体法能有效地检出喉气管粘膜切片标本中的病毒抗原
• 近来，用单克隆抗体建立的酶联免疫吸附试验（ELISA）可快速检测出气管渗出物中的鸡喉气管炎病毒抗原
• 这种方法准确、简单，比病毒分离快速，而且比荧光抗体技术及免疫扩散试验检测气管中的鸡喉气管炎病毒抗原更准确
• 二）免疫与治疗根除本病须全部扑杀病鸡群，并在彻底消毒鸡舍1个月后再引进健康鸡群
• 在流行地区可用弱毒疫苗免疫预防，可不发病，但不能防止野毒感染或改变带毒状态
• 第二十一节减蛋综合征病毒减蛋综合征病毒(Eggdropsyndromevirus，EDSV)是引起种鸡、商品蛋鸡产蛋下降为主要表现的一种传染病的病原体
• 本病的特征是产蛋下降，并伴有软壳蛋、薄壳蛋、破壳蛋和无壳蛋
• 该病首发于1976年，所以又称为EDS-76
• 一、生物学特性EDSV属于腺病毒科（Adenoviridae）禽腺病毒属(Aviadenovirus)Ⅲ群腺病毒
• 减蛋综合症病毒无囊膜，核衣壳的直径70~80nm，呈20面立体对称，20面体的12个尖顶上各有一个纤突，血凝素位于纤突的顶端
• 衣壳由病毒蛋白组成，其核酸为双股DNA
• 本病毒能凝集鸡、鸭、火鸡、鹅、鸽和孔雀的红细胞，但不凝集哺乳动物如大鼠、家兔、马、牛、羊和猪的红细胞
• 利用这一特性进行红细胞凝集(HA)可检出病毒，这种特性能被相应的抗体所抑制，用红细胞凝集抑制试验(HI)可检出病鸡、免疫鸡血清中的特异性抗体
• 二、培养特性减蛋综合征病毒能在鸭胚中生长，经尿囊腔接种10~12日龄鸭胚后，一般72~96h为死亡高峰
• 死胚主要表现胚体出血
• 尿囊液中病毒血凝价稳定，一般在181og2左右，随着胚龄的增大，血凝价可高达191og2
• 本病毒在鸡胚中生长不良

第20页：该病毒在鸭胚细胞和鸡胚肝

• 该病毒在鸭胚细胞和鸡胚肝、肾细胞中生长良好，这些细胞在接毒48h后出现细胞病变，主要表现为细胞圆缩、折光性增强，血凝价可达101og2以上
• 但该病毒在鸡胚成纤维细胞上生长较差，血凝价较低，一般41og2左右
• 在多种哺乳动物细胞中不生长
• 三、抗原性目前为止，所发现的EDSV–76均属同一血清型
• 四、抵抗力本病毒对酸具有较强的抵抗力
• 五、致病性EDSV–76的自然宿主是水禽，但自然感染和人工感染均不引起发病，也无产蛋变化
• 而所有年龄的鸡都易感，但只对产蛋鸡有致病性，使产蛋鸡突出表现为产蛋下降、蛋壳异常，尤其是在产蛋高峰期间，产蛋量突然下降，降幅可达20%~60%
• 六、微生物学诊断
• 一)病毒分离
• 二)血清学检查血清学检查用于检测自然感染和人工免疫鸡产生的抗EDSV–76抗体
• 最常用的血清学方法有血凝抑制试验(HI)和琼脂扩散试验(AGP)
• 1.血凝抑制试验(HI)采用微量法
• HI滴度在1︰4以下者为阴性，1︰8为可疑，1︰16以上为阳性
• 鸡感染EDSV–76后，7~10天HI滴度可达1︰1024~2048
• 七、免疫与治疗防制本病最有效的措施是免疫接种和淘汰阳性种鸡群
• 国内外研制的灭活油乳剂苗已被广泛使用，并起到了良好的保护作用
• 产蛋鸡在14~16周龄时进行免疫，免疫后7d能测出抗体，2~5周时达到8~9log2，免疫力至少维持1年
• 第二十二节禽网状内皮组织增生病病毒禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosisvirus,REV)属于反转录病毒科（Retroviridae）哺乳C型反转录病毒属(Gammaretrovirus )，是引起鸡、鸭、火鸡和其他禽类的网状内皮组织增生病(Reticuloendotheliosis，RE)的病原体
• REV与各种哺乳动物的反转录病毒在进化上有紧密的联系，为生物学界研究肿瘤病毒的演化提供了一个研究模型，现已引起广大研究者的高度重视
• 一、生物学特性病毒呈球形，有壳粒和囊膜，REV的遗传物质是单股RNA，由60～70s复合体组成，包括二个30～40sRNA亚单位
• REV基因组由gag、pol和env等组成，完全复制型REV基因组大小为
• 9.0kb；
• 而不完全复制型（缺陷型）T株只有
• 5.7kb，原因是其基因组有丢失
• REV含RNA指导的DNA聚合酶(反转录酶需Mn2+激活)，此外还有许多多肽，其中有env基因编码的gp90和gp20两个糖蛋白，和gag基因编码的5种结构蛋白：p
• 2、pp
• 8、pp
• 0、p30和p10
• gp90为病毒的囊膜蛋白，p30蛋白是主要的群特异性抗原，不同的REV的抗血清可互相发生交叉反应
• 二、抵抗力REV可被脂溶剂如乙醚、5%氯仿和消毒剂破坏，不耐酸(pH
• 3.
• 0)
• 表面糖蛋白可被蛋白水解酶部分破坏
• 对紫外线有较强的抵抗力
• 从感染REV鸡的组织或细胞培养物液体中可以获得不含宿主细胞的REV，它可以在-70℃长期保存而不降低活性，在4℃下病毒比较稳定，在37℃下20min后传染力丧失50%，1h后丧失99%

第21页：对病毒没有保护作感染的细胞加入二甲基

• 对病毒没有保护作感染的细胞加入二甲基亚砜后可以在液氮中长期保存，MgCl2用
• 三、抗原性目前已分离到30多株REV，虽然不同毒株的致病力不同，但都具有相似的抗原性，即属同一血清型
• 根据病毒中和试验等方法，将REV分成三种不同的抗原亚型，即I、II和III型
• 其中I型含A、B、C三个抗原表位，II型含B抗原表位，III型含A、B抗原表位
• 四、培养特性REV分为完全复制型和不完全复制型两种病毒群
• 完全复制型的REV可在几种禽体内复制，而实验室内主要在鸡胚、火鸡胚、鸭胚及鹌鹑胚的成纤维细胞内增殖，有的毒株在鸭胚和火鸡胚成纤维细胞形成合胞体细胞病变
• 不完全复制型的REV需一种辅助病毒(REV-A)才能在上述细胞内复制，而且在3代以后即完全丧失致瘤作用
• 五、致病性REV的自然宿主有鸡、火鸡、鸭、鹅、日本鹌鹑等，其中鸡和火鸡发病最常见
• 六、微生物学诊断REV的检查须在典型病理变化的基础上，结合检测REV或其抗体进行
• 一）病毒分离与鉴定
• 二）抗体的检测除检测病毒或其抗原外，检测鸡血清或蛋黄中的抗体也可作为诊断方法
• 琼脂凝胶试验、直接或间接荧光试验、ELISA、病毒中和试验等均可检出血清或卵黄中的抗体，而与血清相比，用卵黄则更方便
• 三）鉴别诊断RE在病理学上与马立克氏病(MD)和淋巴细胞性白血病(LL)十分相似，单纯依靠肉眼或光镜较难区别
• 急性网状细胞瘤由于自然病例少、潜伏期短，故易与MD或LL区别
• 应注意矮小综合征与鸡MD、鸡腔上囊性淋巴瘤与LL的鉴别诊断
• 后者可结合病原学和血清学技术加以区别
• PCR可准确诊断本病，因只有来源于REV感染组织的DNA才能扩增，未感染鸡血液或MD、LL肿瘤的DNA不能扩增
• 此外，也可通过电镜技术进行鉴别诊断
• 七、免疫与治疗目前无治疗RE的方法，也没有有效预防本病的报道，但给雏鸡注射无细胞的病毒培养上清液可显著降低接种RECC-cubo肿瘤细胞引起的死亡率
• 目前，及时淘汰血清学查出的阳性鸡，是行之有效的预防措施
• 第二十三节禽白血病病毒禽白血病病毒（AvianIeukosisvirus，ALV）是反录病毒科，禽C型反录病毒属的代表种
• 早在上个世纪的中后期就有人对本病进行了描述和报道，是人类最早认识的禽病之一
• 本病毒除能引起白血病外，还能引起骨髓细胞瘤、上皮细胞瘤等肿瘤性疾病，而且它诱发的肿瘤多与造血系统有关
• 由于禽白血病病毒与禽肉瘤病毒在理化特性、病毒形态以及致病性等方面具有许多相同的特征，因此常常统称为禽白血病／肉瘤病毒
• 一、生物学特性禽白血病具有典型的C型病毒的形态特征，病毒以出芽增殖的方式在胞浆膜上出芽并释放
• 病毒RNA基因组是由2个34～38S的亚单位构成的二聚体，分子质量为106u，每个基因组的单体约有
• 7.2kb
• 病毒的主要蛋白成分为衣壳蛋白P
• 7、基质蛋白P
• 9、核衣壳蛋白P
• 2、囊膜蛋白gp85和跨膜蛋白gp37

第22页：抵抗力病毒对乙醚氯仿等脂溶剂敏感

• 二、抵抗力病毒对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感，对紫外线有很强耐受性，不耐热，56℃30min即可丧失感染性，-60℃才能长期保存
• 在pH5～9间稳定
• 三、抗原性本病毒具有共同的群特异性抗原P27
• 根据对细胞的感染范围、干扰谱以及基质蛋白P19抗原性的不同等，本病毒又分成A～J10个亚群
• 同一亚群的病毒能够互相干扰，并具有不同程度的交叉中和能力
• 不同的群间没有这种能力
• 病毒的囊膜糖蛋白具有型特异性抗原决定簇，能诱发中和抗体
• 用中和试验可以将亚群细分为若干不同的抗原型
• 四、培养特性大多数禽白血病病毒能在鸡胚上良好生长，在绒毛尿囊膜上产生增生性痘斑，这种痘斑在8d后可以计数，而且与病毒的剂量成线性关系
• 五、致病性由于感染的毒株不同，病鸡的症状和病理变化也有所不同
• 病毒的A、B、C、D亚群是外源性病毒，有较强的致病性
• E亚群是内源性病毒
• 所谓内源性是指这类病毒的基因组已经为一种生物的固定基因结构的一部分，就像一组宿主细胞基因组一样受细胞的调节控制
• 一般的鸡都携带E亚群基因序列，这些序列被整合到鸡细胞的基因组上
• 当完整的内源性病毒基因组存在时，细胞可能自发地或经某种化学试剂的作用，产生出E亚群白血病病毒
• 当内源性病毒基因是缺损型时，基因可能在细胞内进行表型表达而不产生感染性病毒
• E亚群对鸡的致病性很弱或根本不致病
• F和G亚群主要感染野鸡
• J亚群在1971年发现，外源性，宿主为鸡，引起髓细胞瘤，对肉鸡危害严重
• 本病毒所致疾病最常见有如下3种
• 一）淋巴细胞性白血病在鸡的性成熟期发病率最高，14周龄以下的鸡极少发病
• 主要临床症状是消瘦、贫血、腹泻、虚弱，肝、法氏囊肿大，且临床症状出现，病程通常很短，最后衰竭死亡
• 肿瘤常见于肝、脾、肾、法氏囊，有时也侵害心、肺等
• 组织学检查，肿瘤组织是由处于原始发育阶段的成淋巴细胞组成，这种细胞源于法氏囊，属于囊依赖性细胞，如果摘除法氏囊，能防止这种肿瘤发生
• 二）成红细胞性白血病野外病例发生于3月龄以上的鸡
• 主要临床症状是怠倦，全身性虚弱，鸡冠略为苍白或发绀；
• 继之病情发展，症状加重，表现消瘦和腹泻，一个或更多羽毛囊可能发生大量出血，病程数天到数月
• 患严重贫血的鸡，鸡冠变成淡黄色直至白色
• 死于此病的鸡，通常带有全身性贫血，其器官常有出血点
• 三）成骨髓细胞性白血病主要症状与成红细胞性白血病相似，严重的废食、显著脱水、消瘦和腹泻
• 还可见到血凝不良引起的羽毛囊出血，病程较长
• 另外，本病可在病鸡外周血液中见到大量的成髓细胞，几乎占全部血液有形成分的75％
• 本病很少自然发生
• 六、微生物学诊断根据病史、症状及剖检发现肿瘤，通常可作出诊断，但应与马立克病相鉴别
• 可用ELISA等检测病毒抗原
• 确诊需要进行病毒的分离鉴定
• 七、免疫与治疗由于本病毒及其制备物在灭活的同时其免疫原性会遭到不同程度的破坏，培育无致病力的弱毒株亦未取得重要进展，因此至今也没有研制出有实用价值的疫苗
• 第二十七节朊病毒牛海绵状脑病（Bovinespongiformencephalopathy，BSE）是一种致死性高的神经系统疾病，由于受感染的牛出现神经症状和大脑出现病理性变化，故又称作疯

第23页：牛病（Madcowdisease）

• 牛病（Madcowdisease）
• 就BSE的病原，Prusiner提出了朊病毒（Prion）的概念，他给朊病毒所下的定义是：朊病毒是不被大多数修饰核酸的方法灭活的蛋白质传染性颗粒（Proteinaceousinfectiousparticle，缩写为Prion）
• 朊病毒还是羊痒病、传染性水貂脑病，以及人的库鲁、克-雅氏病等的病原体
• 一、生物学特性朊病毒是一种蛋白质，不含核酸，分子量33～35×103道尔顿
• 抗蛋白酶的朊病毒蛋白PrPsc是其唯一（或主要）成分，它是宿主PrP基因编码的蛋白PrPc翻译后修饰构型改变而形成，在朊病毒病理发生中起主导作用，其复制和分离物（或毒株）的特性都由其自身和宿主PrPc相互作用决定而不依赖于任何核酸
• 二、抵抗力该病原对理化因素比一般的细菌和病毒抵抗力强，常用消毒药物不能将其杀死，对福尔马林、紫外线、辐射不敏感，对强酸碱有很强的抵抗力,pH
• 2.1～
• 0.5时，用2～5％的次氯酸钠或90％的石炭酸经2h以上才可灭活，在121℃中能耐热30min以上，有报道136℃30min才可灭活
• 该病原主要集中分布于中枢神经系统，其次存在于脾、淋巴结、肠、唾液腺等
• 粪便、尿液中很少
• 朊病毒的许多理化特性非常独特，其理化特性见表10-4
• 三、致病性BSE病原主要感染牛，引起牛海绵状脑病
• 奶牛群发病率为33％，肉牛群为
• 4.7％，总牛群发病率为
• 8.2％
• BSE多发生于布里吉安和荷斯坦奶牛，乳肉兼用型也有发生
• 奶牛比肉牛易感，杂种牛比纯种牛易感
• 本病无明显的季节性，发病与气温和季节无关，多为散发
• 与牛的性别和管理等因素也无关，多发生于3岁以上的成年牛
• 该病可通过口腔、伤口、啃咬等途径传播，常见的传播媒介有牛奶及其制品、精液、牛胚胎、皮革、牛皮具、牛内脏、脑、血液、唾液、排泄物以及污染的器具、人和动物等，也有垂直传染的报道
• BSE病原也可感染痒病敏感系小鼠、牛、绵羊、山羊、猪等
• 人吃了BSE病牛肉也有可能受感染
• 1992年7月6日英国路透社曾报道儿童因注射了来自动物尸体的垂体生长激素得了类似BSE的致命脑病
• 朊病毒的生物学特性非常特殊，它的致病特征与一般病毒感染不一样（见表10-
• 5）
• 四、微生物学诊断90年代以来，许多学者研究用免疫印迹检查淋巴组织中的PrPsc早期诊断痒病，这种方法是否适用于BSE诊断值得研究
• 目前主要根据临床症状、高病死率和特征性的组织病理学变化作初步诊断，尚无适用的病毒学和血清学方法
• 最近发现可用脑电波图像作早期诊断
• 五、免疫与治疗目前尚无疫苗，唯一有效防制措施是扑杀病羊或病牛和与其接触过的羊和牛