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13 第10章 发酵过程的控制.pptx

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本课件系统讲解发酵过程中温度、pH、泡沫、补料、菌体浓度与基质、二氧化碳与呼吸商等参数的变化规律、在线检测方法与控制策略,并说明发酵终点的判断依据与工艺优化原则。

第十章发酵过程的控制章节起始页,涵盖第十章发酵过程的控制等内容
发酵生产率讲解页,说明的影响因素可以划分为三类等要点
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第1页:第十章发酵过程的控制

第十章发酵过程的控制

第2页:发酵生产率

的影响因素可以划分为三类:菌体;菌体活动的环境;反应器运转;菌体:菌体浓度;菌体形态;菌体活动的环境:pH值;温度;溶氧浓度;基质浓度;发酵液粘度及循环量等;反应器运转:搅拌情况;通气情况;

第3页:

第4页:一、发酵热伴随发酵的进行而产生的热量叫发

酵热;第一节温度控制生物热:有氧呼吸的最高效率约为42%,厌氧发酵如同型乳酸发酵约为27%,表明菌体分解的基质中的能量,大部分是以热能的形式散失到环境中,用Q生物表示。

第5页:搅拌热

通风搅拌过程中,发酵液之间、发酵液与搅拌器及罐壁之间均有摩擦,由此产生的热量称为摩擦热,用Q搅拌表示,Q搅拌=P×3061蒸发热:空气流经发酵液时带走的热量,用Q蒸发表示,由通气带走的热量为:Q蒸发=G(H出-H进);G:空气流量;H:气体热焓;

第6页:辐射热

通过罐体表面向环境中发射红外线而散失的热量。热量的大小决定于罐内外温度差大小、罐的表面积等。Q发酵= Q生物+ Q搅拌-Q蒸发-Q辐射

第7页:二、发酵热的测量及计算①

利用热交换原理,测量一定时间内冷却水的流量和冷却水进出口温度,Q发酵= qvc(t2–t1)/V②利用温度变化率S(℃/h):先使罐温恒定,再关闭自控装置,测量S,根据Q发酵=(M1C1 + M2C2)u

第8页:③热力学方法

(根据盖斯定律)

第9页:三、温度对微生物生长

的影响最高生长温度、最适生长温度、最低生长温度四、温度对发酵的影响酶学方面产物方面

第10页:五、最适温度的控制如:产黄青霉进行青霉素

发酵过程的温度控制:30℃起始发酵,5h→ 25℃35h→20℃85h→ 25℃40h→放罐。该法其青霉素产量比自始至终进行25℃恒温发酵培养的对照组提高了14.7%。

第11页:一、pH值对菌体生长和代谢产物形成

的影响生长和代谢均有一定范围;不同菌种及同种菌在不同代谢时期pH值不同。第二节pH值的控制pH对发酵的影响酶活性;细胞的结构;微生物对基质的利用速率;代谢方向;

第12页:如Aspergillus niger

在pH2~2.5时利于合成柠檬酸;在pH2.5~6.5范围内时以菌体生长为主;pH7.0时,则以合成草酸为主。生长的最适pH值与发酵的最适pH值

第13页:二、影响发酵液pH值变化的因素1.基质代

谢糖代谢糖分解成小分子酸、醇,使pH下降。氮代谢氨基酸中的-NH2被利用,pH下降;生理酸碱性物质利用后,pH上升或下降。2.产物形成3.菌体自溶

第14页:三、发酵过程中pH值的调节及控制

(一)调整培养基组分:(二)在发酵过程中进行控制C/N高:pH↓;C/N低↑①添加碳酸钙②氨水流加法③尿素流加

第15页:一、泡沫的产生、性质及变化产生

①外界引入;②发酵液内部产生(如CO2);性质:气溶胶体系变化:搅拌的影响;发酵液的性质的影响(如蛋白质);菌体代谢;第三节泡沫的控制

第16页:二、泡沫对发酵

的影响①减少发酵的有效容积;②增加了染菌的机会;③使部分菌体粘附在罐盖或罐壁上,而失去作用;④影响通气搅拌的正常进行;

第17页:三、泡沫的控制

(一)化学消泡1.消泡剂①表面活性剂;②对气-液界面的散布系数必须足够大;③无毒害性,且不影响发酵菌体;④不干扰各种测量仪表的使用;⑤在水中的溶解度较小;⑥来源方便,使用成本低;

第18页:应用:常用的一些消泡剂:①天然油脂

2.应用:常用的一些消泡剂:①天然油脂;②高碳醇、脂肪酸和酯类;③聚醚类;④硅酮类;①消泡剂+载体;②复合消泡剂;③消泡剂+乳化剂

第19页:(二)机械消泡1.消泡装置及设计依据

①动力小;②结构简单;③易清洁;④运行可靠;⑤维护费用低;2.罐内消泡;3.罐外消泡;

第20页:第四节补料的控制

一、补料分批培养1.概念根据菌体生长和初始培养基的特点,在分批培养的某些阶段适当补加培养基,使菌体或其代谢产物的生产时间延长。

第21页:补料分批培养的优缺点优点

2.补料分批培养的优缺点优点:与分批培养相比(1)解除底物抑制和葡萄糖的分解阻遏效应。(2)延长次级代谢产物的生产时间。与连续培养相比(1)降低了染菌,避免了遗传不稳定性。(2)最终产物浓度较高,有利于产物的分离。

第22页:缺点:(1)由于没有物料取出

产物的积累最终导致比生产速率的下降。(2)由于物料的加入增加了染菌机会。应用:面包酵母、氨基酸、抗生素等工业。

第23页:二、补料的意义、内容、原则意义

补充菌体营养,延长发酵期(推迟自溶期),提高发酵产量;内容:补充C源、N源、无机盐、诱导酶的底物;原则:根据菌体生长代谢规律;生产需要;

第24页:三、补料操作时间

为达到生产目的,在需要时加入;方式:以不引起发酵液成分剧烈波动为前提;补量:加入与消耗平衡;

第25页:几个实例

补料物产物麦芽汁、氮、磷、镁酵母菌氨水或尿素谷氨酸铵盐、糖柠檬酸葡萄糖苹果酸葡萄糖淀粉酶葡萄糖、氨水、苯乙酸青霉素

第26页:第五节菌体浓度与基质对发酵

的影响一、菌体浓度对发酵的影响及控制菌体(细胞)浓度:单位体积培养液中菌体的含量。菌浓的大小,在一定条件下,不仅反映菌体细胞的多少,而且反映菌体细胞生理特性不完全相同的分化阶段。

第27页:依靠调节培养基的浓度来控制菌浓确定基

础培养基配方中有个适当的配比,避免产生过浓(或过稀)的菌体量;然后通过中间补料来控制,当菌浓太稀时,可补加一部分磷酸盐,促进生长,提高菌浓;但补加过多,则会使菌体过分生长,超过临界浓度,对产物合成产生抑制作用。利用菌体代谢产生的CO2量来控制生产过程的补糖量,以控制菌体的生长和浓度。

第28页:二、基质对发酵

的影响及控制1.碳源对发酵的影响及控制葡萄糖等迅速参与代谢、合成菌体和产生能量,并产生分解产物,有利于菌体生长,但有的分解代谢产物对产物的合成可能产生阻遏作用;迅速利用的碳源

第29页:多数为聚合物

淀粉等为菌体缓慢利用,有利于延长代谢产物的合成,特别有利于延长抗生素的分泌期。在工业上,发酵培养基中常采用含迅速和缓慢利用的混合碳源。缓慢利用的碳源

第30页:氮源对发酵

2.氮源对发酵的影响及控制氨基(或铵)态氮、玉米浆等容易被菌体利用,促进菌体生长,但对某些代谢产物的合成特别是某些抗生素的合成产生调节作用,影响产量。迅速利用的氮源

第31页:延长代谢产物的分泌期

提高产物的产量;但一次投入也容易促进菌体生长和养分过早耗尽,以致菌体过早衰老而自溶,缩短产物的分泌期。发酵培养基一般选用含有快速和慢速利用的混合氮源,还要在发酵过程中补加氮源来控制浓度。补加有机氮源,如酵母汁、玉米浆、尿素补加无机氮源,如氨水或硫酸铵缓慢利用的氮源

第32页:磷酸盐对发酵

3.磷酸盐对发酵的影响及控制磷是微生物菌体生长繁殖所必需的成分,也是合成代谢产物所必需的。微生物生长良好所允许的磷酸盐浓度为0.32~300mmol/L,而次级代谢产物合成良好所允许的最高平均浓度仅为1.0mmol/L.

第33页:第六节二氧化碳和呼吸商

一、CO2对菌体生长和产物合成的影响CO2是微生物的代谢产物,同时也是某些合成代谢的基质。它是细胞代谢的重要指标。在发酵过程中,CO2有可能对发酵有促进作用,也有可能有抑制作用。

第34页:CO2对菌体

具有抑制作用;通常,当排气中CO2的浓度高于4%时,微生物的糖代谢和呼吸速率下降。如,发酵液中CO2的浓度达到1.6×10-1mol,就会严重抑制酵母的生长;当进气口CO2的含量占混合气体的80%时,酵母活力与对照相比降低20%

第35页:CO2对发酵产生

影响:影响发酵液的酸碱平衡促进发酵:如牛链球菌发酵生产多糖,最重要的发酵条件是提供的空气中要含5%的CO2。抑制发酵:如对肌苷、异亮氨酸、组氨酸、抗生素等发酵的抑制。

第36页:CO2对发酵

影响的机理CO2及HCO3-主要是影响细胞膜的结构,导致膜的流动性及表面电荷密度发生改变,影响到细胞膜的输送效率,导致细胞生长受到抑制、形态发生改变。CO2主要作用于细胞膜的脂质部位;HCO3-影响细胞膜的膜蛋白。

第37页:二、排气中CO2浓度与发酵的关系

如果连续测得排气氧和CO2浓度,可计算出整个发酵过程中CO2的释放率(CRR)。QCO2:二氧化碳比释放率,mmol CO2/(g干菌体·h);X:发酵液中菌体的浓度,g干菌体/L。

第38页:三、呼吸商与发酵的关系发酵过程中菌的耗氧

速率OUR可通过热磁氧分析仪或质谱仪测量进气和排气中的氧含量计算而得,并最终计算出呼吸商RQ呼吸商RQ的变化可以反映菌体代谢的变化情况。

第39页:四、CO2浓度的控制CO2浓度的控制应随

它对发酵的影响而定。如果CO2对产物合成有抑制作用,则应设法降低其浓度;若有促进作用,则应提高其浓度。通气和搅拌速率的大小,不但能调节发酵液中的溶解氧,还能调节CO2的溶解度,在发酵罐中不断通入空气,既可保持溶氧在临界点以上,又可随废气排出所产生的CO2,使之低于能产生抑制作用的浓度。

第40页:第七节微生物发酵终点的判断要确定一个合

理的放罐时间,需要考虑下列几个因素:一、经济因素以最低的成本来获得最大生产能力的时间为最适发酵时间。二、产品质量因素

第41页:在正常情况下

可根据作业计划,按时放罐;在异常情况下,如染菌、代谢异常(糖耗缓慢等),就应根据不同情况,进行适当处理,以免倒罐。为了能够得到尽量多的产物,应该及时采取措施(如改变温度或补充营养等),并适当提前或拖后放罐时间。三、特殊因素

第42页:作业1.补料的意义及内容

。2.发酵过程中进行温控的意义。3.发酵液pH值变化的因素及对发酵液pH进行调控的主要方法。4.发酵液泡沫产生的原因及消泡的基本方法。

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