第1页:植物学实验的目的和要求(一)
植物学实验是植物学教学的重要组成部分,要求掌握实验的基本方法与技能,贯彻理论联系实际,培养独立工作能力,养成严谨的科学态度与工作作风。
- 熟练使用光学显微镜,并能在显微镜下识别代表性植物的细胞、组织、器官结构
- 掌握徒手切片、压片、染色、临时装片法
- 学会使用肉眼、放大镜、显微镜观察植物器官的外部形态
- 学会植物绘图,掌握花图式、花程式
- 熟练使用和编制植物检索表,识别常见科、属的主要特征及其代表植物
第2页:植物学实验的目的和要求(二)
贯彻理论联系实际,加强对基本知识和基本理论的理解:
- 观察切片标本时注意切面与整体的关系,通过显微镜下一块组织一个薄片建立立体结构的概念
- 观察制片标本时结合植物体外形,了解取材部位,联系解剖结构与生理功能,运用对比法比较各种结构的异同与特点
- 联系实际建立植物界各大类群的进化概念,掌握植物分类的基本方法
第3页:植物学实验的目的和要求(三)
培养科学态度和独立工作的能力:
- 实验过程要求自己动手、独立操作,在观察、记录、绘图、填表或列表时认真仔细、实事求是,不得抄袭和马虎
- 遵守实验室规则,保持良好的工作习惯,根据实验指导要求完成作业
第4页:显微镜的构造
本页对照镜体实物列出光学显微镜各部件名称,供取镜、安放、对光与观察时逐项核对。
光学显微镜的主要构造:
- 目镜
- 镜筒
- 物镜
- 聚光器
- 反光镜
- 镜座
- 倾斜关节
- 镜台
- 执手
- 镜头转换器
- 细聚光器
- 粗聚光器
第5页:显微镜使用方法步骤
显微镜的使用方法步骤:
- 取镜和安放
- 右手握住镜臂,左手托住镜座,把显微镜放在实验台上略偏左,距实验台边缘约5厘米
- 对光
- 转动转换器使低倍物镜对准通光孔,物镜前端与载物台保持2厘米;把较大的光圈对准通光孔,左眼注视目镜内、右眼睁开,转动反光镜使光线反射入镜筒,直到看到白亮的视野
- 观察
- 玻片有盖玻片的一面朝上,用片夹夹紧,标本正对通光孔中心;转动粗准焦螺旋使镜筒下降至物镜接近标本,再反方向转动使镜筒上升至看清物像,最后略调细准焦螺旋使物像清晰
第6页:显微镜使用的注意事项
显微镜使用的注意事项:
- 取镜时一只手握镜臂、另一只手托住镜座,显微镜与地面垂直、水平移动
- 放在身体略偏左侧的实验台上,距台边约5厘米,不可太靠边缘
- 对光时低倍物镜前端与载物台的距离以2厘米为宜
- 视野必须达到白亮,用最大的光圈对准通光孔,反光镜最好用凹面镜
- 左眼注视目镜内,右眼同时睁开,便于以后画图
- 先使镜筒下降接近玻片标本约3~4毫米,此时眼睛注视物镜;而后左眼注视目镜,反向转动粗准焦螺旋使镜筒缓慢上升直到看清物像
- 从目镜内看到的物像是倒像,要将视野左上方的物像移到中央,应把玻片标本向左上方移动
- 显微镜内物像的放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数之积
- 变换物镜时切勿直接扳动物镜,否则影响显微镜的光学性能
- 使用完必须将显微镜收好,放回原处
注:源文件第7条写作"需将玻片标本向右移动",与倒像成像规律不符,此处按"物像偏向哪方就向哪方移动玻片"的通行规则修正为向左上方移动。
第7页:实验一 植物细胞(1)目的与材料
实验目的要求
- 观察植物细胞在光学显微镜下的基本结构
- 认识植物细胞的结构特点及质体特征
- 掌握临时装片和徒手切片的制作技术
- 了解细胞质壁分离与复原的原理
实验材料:洋葱、木耳菜、红辣椒。
实验用品:显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、培养皿、滴管、刀片、剪刀、解剖针、吸水纸、擦镜纸、纱布;I—KI溶液、蔗糖溶液。
第8页:实验一 植物细胞(1)实验内容
实验内容
- 植物细胞基本结构:洋葱
- 叶绿体观察:木耳菜
- 有色体观察:红辣椒
- 白色体观察:洋葱
- 细胞质壁分离与复原:洋葱
作业:绘洋葱细胞结构图。
第9页:洋葱表皮临时装片的制作(一)
洋葱表皮临时装片的制作
- 擦净载玻片和盖玻片
- 擦载玻片:左手拇指和食指捏住玻片边缘,右手用纱布包住上下两面反复擦拭,擦好放在干净处备用;擦盖玻片:轻捏一角,隔着纱布从上下两面慢慢擦拭,用力要小而均匀以免擦碎
- 滴蒸馏水与取材
- 用滴头滴一滴蒸馏水于载玻片中央,再用镊子或毛笔取一薄而透明的材料切片,置于水滴中
第10页:洋葱表皮临时装片的制作(二)
取材与盖片
- 取洋葱肉质鳞片,用刀片在鳞片内表皮划一个3~5平方毫米小格,用镊子撕下薄膜状内表皮,迅速置于载玻片中央水滴中(表面朝上)并展平
- 盖盖玻片:右手持镊子轻夹盖玻片一角,使其边缘先在左边与水滴边缘接触,然后慢慢倾斜下落平放,使空气逐渐被水挤掉以免产生气泡
- 若盖玻片下水过多,用吸水纸吸掉多余的水,装片即可在显微镜下观察
第11页:洋葱表皮细胞装片的观察
先在低倍镜下观察洋葱表皮细胞的形态和排列情况,选择较清楚的区域换高倍镜观察:
- 细胞壁
- 无色透明,只见侧壁,呈黄色
- 细胞核
- 圆形或卵圆形的球状体,内有明亮的小球体即核仁
- 细胞质
- 细胞核以外、紧贴细胞壁内侧的无色透明胶状物质,内有许多小颗粒即细胞器
- 液泡
- 位于细胞的中央部分
各部分不易识别时可用I—KI染色:将染液滴在盖玻片一侧,另一侧用吸水纸吸入,待洋葱表皮被染成淡黄色时观察,注意细胞核的形状、位置和核仁数目及液泡与细胞质之间的界限。
第12页:植物细胞质体的观察
质体是植物细胞特有的结构,不同的细胞中具有不同类型:
- 白色体
- 多存在于植物体的幼嫩细胞或不见光的细胞中,有些植物的表皮细胞中也有但个体小;洋葱表皮装片中可见核周围透明的颗粒状结构
- 叶绿体
- 含叶绿素的绿色质体,主要存在于植物体绿色部分尤其是叶片中;撕去木耳菜叶表皮刮取少许叶肉装片,可见许多绿色椭圆形颗粒
- 有色体
- 红辣椒徒手切片或刮取少量果肉装片,呈颗粒状、条状、块状等形状,橙红色;细胞老熟时蛋白质基质解体,可呈现规则的色素结晶
第13页:徒手切片的方法(一)
作徒手切片最重要的是切下一小片薄的组织,应再用锋利的新刀片以保证切片质量;有时切的一边厚一边薄,取薄的一侧制成临时装片也有利于观察。徒手切片一般适用于软硬适度的植物根、茎、叶等材料。
- 先将材料切成长2~3厘米、截面积3~5平方毫米的小块,便于手持
- 准备盛有清水的培养皿、毛笔、滴管和单(双)面刀片等用具
- 将要切的材料切成2—3厘米长的小段,截取材料、削平切面均应用解剖刀或用过的刀片
第14页:徒手切片的方法(二)
切片操作要领:
- 左手大拇指、食指和中指捏住材料,拇指略低于中指,使材料突出于手指之上,以免刀口损伤手指
- 右手平稳拿住刀片,刀刃向内且与材料断面平行,以均匀力量从左前方向右后方拉,用整个手臂向后拉,手腕不必用力
- 切片时湿润材料和刀面使之滑润,动作要快,一刀切下;不要用力过大,不能用刀片直接挤压材料,切忌中途停顿或前后"拉锯"式切割
- 薄的切片应该是透明的,可留在刀刃上继续连切几片,然后用蘸水的毛笔把切片取下放入盛水培养皿,或直接选薄的放在滴有水滴的载玻片上制成临时装片观察
第15页:细胞质壁分离与复原的观察
制作洋葱表皮细胞临时装片(不能染色),将蔗糖溶液从盖玻片一侧洗进,放置10—20分钟后镜检,可见细胞角上出现空隙,即质壁分离现象;然后加水洗掉蔗糖,原生质体重新吸水,可观察到质壁分离复原的过程。
作业:绘洋葱表皮细胞结构图。
第16页:植物绘图法(一)
生物绘图是科学记录的一种方法。绘图时应注意:
- 绘科学图以精确为主,不能艺术加工渲染;只在纸的一面绘图,要用2H以上削尖的绘图铅笔
- 边看显微镜边按视野中的实际情况绘图,先轻轻勾画出轮廓,经检查无误后再以准确、清晰的线作最后描绘
- 图的大小要适当、布局合理,应位于纸的略偏左上方,以便在右侧和下方注解文字
- 显微构造图的点线不要重复描绘:以实线表示轮廓,虚线表示被遮蔽但需表现的轮廓,用圆点的疏密表示明暗、凹凸等层次,较暗处(如细胞核)细点越多
第17页:植物绘图法(二)
绘图的点线与注字规范:
- 点墨时笔尖直立,点的大小、疏密要均匀、整齐、浑圆,不能像逗号
- 线条的粗细应有规律,太粗、太细或太密都不符合要求;墨色不能浓淡不匀,线条不能漏画或合并
- 字尽量注在图的右侧,用尺引出水平的指示线,线的右端平齐,然后注字
- 图的各部分位置和比例应与显微镜中实际观察一致,注意突出显微结构的每个特征
- 在图的下方写上所画图的名称及放大倍数
- 一幅图中只要详细画出部分结构,其余勾画出轮廓即可;版面要清洁,做到黑白分明