页数：24页文件大小：653.5 KB来源： 微生物与发酵工艺ppt课件
本实训课件讲解显微镜的机械与光学系统构成、成像光路与油镜工作原理，演示物测微尺与目测微尺的标定方法，并给出取镜安放、低倍镜、高倍镜与油镜的标准操作步骤和使用注意事项。
实训一显微镜的使用和微生物测微技术微生物与发酵工艺
一、实验目的1.练习和掌握显微镜的使用方法（低倍镜、高倍镜、油镜）。2.掌握使用测微尺测定微生物大小的方法，熟悉微生物大小的一般概念。
二、实验原理（一）显微镜的结构、光学原理和操作方法1.显微镜分机械系统和光学系统两部分机械系统包括：镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、粗准焦螺旋、细准焦螺旋。光学系统包括：目镜、物镜、聚光器、光源、滤光片、虹彩光圈。
双目光学显微镜二、实验原理
（二）显微镜的光学原理1.成像原理光路：光源→虹彩光圈→聚光镜→通光孔→标本（一定要透明）→物镜→镜筒→目镜→眼。二、实验原理
(三)油镜工作原理香柏油的折光率（1.51-1.52）与玻璃片折光率（1.52）相近似，因此在物镜（玻璃）与标本载片（玻璃）之间加入香柏油可以使光线不致因从一个介质（玻璃）进入到另一折光率不同的介质即空气（折光率为1.0）而引起部分散射，造成亮度不够而观察不清，这对透镜弯曲度较大，直径较小（通过光线亦较小）的油镜头是特别重要的。
1.物测微尺物测微尺是一厚玻片，中央有一圆形盖玻片，中央刻有1mm长的标尺，等分为100格，每格100µm，用以标定目测微尺，在不同放大倍数下每格的实际长度。二、实验原理(四)测微技术
二、实验原理物测微尺目测微尺
2.目测微尺的标定将目测微尺装入目镜的隔板上，使刻度朝下；把物测微尺放在载物台上使刻度朝上。用低倍镜找到目测微尺的刻度，移动物测微尺和目测微尺，使两者的第一条刻度线重合，顺着刻度找到另一条重合刻度线。计算在该放大倍数下目测微尺每个小格的实际长度。目测微尺每小格长度(µm)=
用物测微尺标定目测微尺二、实验原理
（二）微生物测微1.分别在低倍镜、高倍镜和油镜下进行目测微尺的标定。2.菌体大小的测量将物测微尺取下，换上标本片，选择适当的物镜测量目的物的大小，分别找出菌体的长和宽占目测微尺的格数，再按照目测微尺1格的长度算出菌体的长度和宽度。用目测微尺测量微生物的大小。即可算出标本（菌体）的大小。四、实验方法
微生物大小测量结果填入下表，低倍镜与高倍镜下分别标定目镜测微尺每格长度。
| 观察条件 | 记录项 | 实测值 |
|---|---|---|
| 低倍镜 | 目镜测微尺格数＝镜台测微尺格数 | （待填写） |
| 低倍镜 | 目镜测微尺每格长度（μm） | （待填写） |
| 高倍镜 | 目镜测微尺格数＝镜台测微尺格数 | （待填写） |
| 高倍镜 | 目镜测微尺每格长度（μm） | （待填写） |
表中数值为实验报告留空项，需由学生实测后填写。
油镜与高倍镜下菌体的长、宽与直径测量结果填入下表。
| 测定对象 | 项目 | 实测值 |
|---|---|---|
| 油镜 | 目镜测微尺格数＝镜台测微尺格数 | （待填写） |
| 油镜 | 目镜测微尺每格长度（μm） | （待填写） |
| 枯草杆菌 | 长（格／μm） | （待填写） |
| 枯草杆菌 | 宽（格／μm） | （待填写） |
| 金黄色葡萄球菌 | 直径（格／μm） | （待填写） |
| 酵母菌（高倍镜） | 长（格／μm） | （待填写） |
| 酵母菌（高倍镜） | 宽（格／μm） | （待填写） |
表中数值为实验报告留空项，需由学生实测后填写。
1.使用油镜时为什么要先用低倍镜和高倍镜检查？2.试述显微镜成像原理并作图表示之。3.油镜使用时为什么一定要浸在香柏油里？4.在使用油镜时应怎样控制聚光器与光圈？5.为什么目测微尺必须用物测微尺标定?七、思考题
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