06 实训4．微生物细胞数的计数.ppt

第1页：实训四微生物细胞数的计数封面

实训四微生物细胞数的计数微生物与发酵工艺

第2页：实训四实验目的

使用血球计数板计数单细胞微生物的数量。一、实验目的

第3页：血球计数板的构造

血球计数板是一块比普通载玻片厚的特制玻片制成。玻片中央刻有四条槽，中央两条槽之间的平面比其它平面略低，中央有一小槽，槽的两边的平面上各刻有9个大方格。中间的一个大方格为计数室，它的长、宽各为1mm，深度为0.1mm,容积为0.1mm3。计数室有两种规格，一种是把大方格分成16个中格，每一中格分成25小格，共计400小格；另一种规格是把大方格分成25

第4页：血细胞计数板示意图

血细胞计数板正面、侧面与正面方格放大示意图

第5页：细胞数的计算公式

因此，在计算上可按下列两种公式进行：1. 16×25计数板的计算：细胞数/mL=（100小格内的细胞数/100）×400×10000×稀释倍数2. 25X16计数板的计算：细胞数/mL=（80小格内的细胞数/80）×400×10000×稀释倍数式中，400为计数板的小格总数；10000为由计数室0.1mm3换算成lmL体积的系数

第6页：实训四材料与用具

1.材料酵母菌悬液2.用具显微镜、血球计数板三、实验材料和用具

第7页：计数操作步骤（一）

四、实验方法1.取清洁干燥的血球计数板，在计数室上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。2.取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多)。菌液可自行渗入计数室。计数室不得有气泡，然后置高倍镜下计数。

第8页：计数操作步骤（二）

3.样品浓度要求每小格内有5～10个菌体为宜。4.计数时，用16×25的计数板要按对角线方位，取左上、左下、右上，右下四个中方格(即100小格)计数酵母菌液，用25×16的计数板，除计数上述对角线的四个方格外，还需数中央一个方格的酵母菌数(即80小格)。四、实验方法

第9页：计数操作步骤（三）

5.每个样品重复计数2～3次，取其平均值，按上述公式计算每毫升菌液所含的酵母细胞数。6.计数完毕，将计数板在水龙头上冲洗，切勿用硬物洗刷，自行晾干或吹风机吹干，或用擦镜头纸轻轻擦拭。四、实验方法

第10页：实训四实验内容

使用血球计数板对样品酵母菌液进行计数，并计算菌液浓度。五、实验内容

第11页：实训四实验报告

将微生物计数的结果填入下列空白1.第一次计数的酵母细胞数目＝个。2.第二次计数的酵母细胞数目＝个。3.从两次的计数结果中求出酵母细胞的平均数目4.稀释倍数＝倍。5.求出每毫升酵母菌液中的细胞数＝个。六、实验报告

第12页：实训四思考题

七、思考题1.为什么两种不同规格的血球计数板测定同一样品时，其结果是一样的？2.使用细胞计数板应注意什么问题?

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