03 现代食品生物技术的分类.ppt
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本课件介绍微生物快速检测的两类代表技术：ChemScan RDI 激光扫描直接计数法与免疫捕获检测技术，说明其原理、操作流程、仪器组成、结果判读与方法评价，并讨论快速方法的验证、质量控制与发展趋势。
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第33页：反应式表示
- 本页内容
- 以反应式表示该检测过程的化学结合关系。
- 补充说明
- 源文件仅记录引导语，未提取到反应式具体内容，建议对照原图补充反应物与产物。
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第40页：标记的细菌
- 本页内容
- 标记后的细菌图像。
- 所属流程
- ChemScan RDI激光扫描直接计数法中的荧光标记步骤。
- 补充建议
- 建议对照原图补充标记染料与观察条件说明。
第41页：标记后的酵母
- 本页内容
- 标记后的酵母图像。
- 所属流程
- ChemScan RDI激光扫描直接计数法中的荧光标记步骤。
- 补充建议
- 建议对照原图补充标记染料与观察条件说明。
第42页：标记后的霉菌
- 本页内容
- 标记后的霉菌图像。
- 所属流程
- ChemScan RDI激光扫描直接计数法中的荧光标记步骤。
- 补充建议
- 建议对照原图补充标记染料与观察条件说明。
第43页：ChemScan RDI
- 方法名称
- ChemScan RDI，激光扫描直接计数法。
- 本页内容
- 仪器与检测原理图示。
- 补充建议
- 建议对照原图补充仪器组成与操作接口说明。
第44页：三个简单的步骤
三个简单的步骤：
- 过滤
- 标记
- 激光扫描
第45页：TVC检测步骤与时间
检测步骤——TVC（菌落总数）：
- 过滤：样品过滤。
- 标记：预标记60 min。
- 滤膜转移。
- 标记30 min。
- 激光扫描：ChemScan RDITM仪器分析。
第46页：ChemScan RDI主机
ChemScan RDI主机：
- 激光扫描分析仪。
- 3分钟分析时间。
- 结果直接显示细胞个数。
第47页：Laser scanning
- 英文标题
- Laser scanning（激光扫描）。
- 所属方法
- ChemScan RDI激光扫描直接计数法的核心检测环节。
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第63页：免疫捕获原理：抗体包被
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗体—抗原，第一步为固相抗体准备。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充捕获载体与抗体类型说明。
第64页：免疫捕获原理：抗原结合
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体结合。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充孵育温度与时间。
第65页：免疫捕获原理：复合物形成
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体复合物形成。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充反应时间与洗涤要求。
第66页：免疫捕获原理：洗涤增菌
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体复合物经洗涤并增菌。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充洗涤液与增菌条件。
第67页：免疫捕获原理：酶联二抗
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体—酶联二抗，经洗涤并增菌。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充酶标记物类型。
第68页：免疫捕获原理：二抗结合
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体—酶联二抗结合完成，经洗涤并增菌。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充孵育条件。
第69页：免疫捕获原理：二次洗涤
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体—酶联二抗，经洗涤、增菌与二次洗涤。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充洗涤次数与缓冲液。
第70页：免疫捕获原理：加底物显色
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体—酶联二抗，经洗涤、增菌、二次洗涤后加底物显色。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充底物种类与显色判定方式。
第71页：免疫捕获原理：显色判读
- 本页内容
- 免疫捕获检测原理示意：抗原—抗体—酶联二抗，经洗涤、增菌、二次洗涤后加底物显色并判读。
- 所属方法
- 沙门氏菌免疫捕获检测（UNIQUE系列）。
- 补充建议
- 建议对照原图补充结果判读标准。
第72页：沙门氏菌UNIQUE操作简介
沙门氏UNIQUE操作简介：
- 一步增菌，BP，16-24小时。
- 将增菌后的培养物倒入最左边的第一支试管中，插入捕获拭子，41-43℃培养20-40分钟。
- 取出拭子快速放入第二支管中水洗，转动两次，将杂质和非目标微生物洗去。
- 拭子插入第三支管中，35-37℃培养4-5小时进行富集；海产品和橙汁需在41-43℃下培养4-5小时。
- 拭子插入第四支管进行酶联反应，一般食品样品35-37℃保温30-40分钟；海产品、橙汁及含可可成分的样品需在41-43℃富集。
- 取出拭子快速放入第五支管中水洗，转动两次，洗去未交联的酶联二抗试剂；再插入第六支管在20-25℃下显色10分钟左右。
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第74页：VIA、UNIQUE与传统方法比较
沙门氏菌VIA、UNIQUE和传统方法比较：
沙门氏菌传统方法、VIA与UNIQUE检测流程比较| 项目 | 传统方法 | VIA | UNIQUE |
|---|
| 增菌 | 48小时 | 40小时 | 16小时 |
|---|
| 选择性分离或增菌 | 常规分离24小时 | 免疫分离2小时 | 免疫分离并增菌4小时 |
|---|
| 结果判断 | 人工判断，经验性强 | 颜色变化 | 仪器自动判断并打印结果 |
|---|
| 工作量 | 工作量大，需制备大量培养基 | 一般，需制备两种增菌培养基 | 只需准备BP增菌液 |
|---|
第75页：自动免疫捕获检测仪Unique Plus
- 仪器名称
- 自动免疫捕获微生物检测仪——Unique Plus。
- 检测对象
- 沙门氏菌等目标微生物，经捕获拭子富集后自动完成酶联反应与结果判读。
- 补充建议
- 建议对照原图补充仪器组成与操作界面说明。
第76页：Unique Plus检测步骤
检测步骤：
- 插入芯片。
- 放入检测条。
- 加入增菌后的样品。
- 按程序自动操作。
- 打印结果。
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