03 第三章 常见食品添加剂的测定.ppt

第1页：常见食品添加剂的测定导言

第三章常见食品添加剂的测定食品添加剂的种类繁多。

• （22类）同一添加剂又有不同的分析方法，就具体的分析方法（食品不同，含量不同）甚多。
• 但归纳起来主要有：滴定法、比色法、紫外分光光度法、荧光法、离子选择性电极法、色谱法（气相、液相、薄层）食品中添加剂的测定与食品添加剂的测定的方法又有区别，一个需要进行（前处理）分离，一个则不需要，加之含量差异，分析方法有的采用不同的分析方法。

第2页：防腐剂的测定

一、防腐剂的测定

• （一）碱滴定法测定苯甲酸
• 1、原理
• 样品加入饱和NaCI，在酸性条件下，用乙醚提取，去乙醚溶于中性乙醇，用碱滴定。
• 2、方法
• （1）取样75g + 7.5g NaCI →300ml烧杯溶解
• （2）加入70ml饱和NaCI，用10%NaOH滴至碱性
• （3）定溶250ml，摇、置2h
• （4）过滤，取滤液100ml，置分液漏斗中，用1：1HCI滴至酸性。用190ml乙醚分三次抽提，静置。
• （5）放出乙醚层，用水洗至中性。
• 放入锥形瓶中，回收乙醚，加入50ml中性乙醇，10ml水，3滴酚酞，用0.05mol/LNaOH滴至终点。

第3页：苯甲酸（钠）添加剂的测定

（二）苯甲酸（钠）添加剂的测定

• ①要求:含量（％）≥99.5（苯甲酸钠≥99）（铅计）重金属％≤0.001……
• ②鉴别:1g样+20ml 40g/LNaOH，加1滴100g/L FeCl3生成赭色↓
• 加HCl（1：3）白色↓（黄色火焰钠）
• ③测定
• A.苯甲酸
• 称样0.25g加入中性50％乙醇溶液25ml，2滴酚酞，用NaOH滴至粉红色
• b苯甲酸钠
• 提要：HCl+苯甲酸钠苯甲酸；
• 不溶于水，易溶于乙醚，用乙醚萃取生成的苯甲酸，排除干扰。
• 据用HCl的量计算苯甲酸钠含量称样1.5g+25ml水+50ml乙醚,10滴溴酚蓝;用0.5M HCl滴定,当水层显淡绿色为终点（黄—紫蓝，pH=3.0-4.6）
• （三）气相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、及其盐类(P147,151,152)
• 液相色谱法测定苯甲酸、山梨酸、糖精(P152-154)

第4页：抗氧化剂的测定

二、抗氧化剂的测定

• 1、BHA（叔丁基对羟基茴香醚）的测定
• 样品经石油醚萃取加入72％乙醇，使BHA转入乙醇相中，再与2.6—二氯醌氯亚胺—硼砂（缓冲）溶液的显色剂反应生成蓝色化合物。
• 在λ=620nm处测吸光度A
• 2、BHT（2.6—二叔丁基对甲酚）的测定
• 用水蒸气法将BHT分离出来，溶解于甲醇中（甲醇液接收）加入邻联二茴香胺（另加亚硝酸钠溶液）生成橙红色化合物，用氯仿萃取，在λ=520nm处测吸光度A
• 3、可用气相色谱法测BHA、BHT

第5页：发色剂—亚硝酸盐

三、发色剂—亚硝酸盐、硝酸盐的测定

• 1、亚硝酸盐的测定（P177）
• 样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后在弱酸性条件下（HCl）亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化。
• 与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色染料。
• λ=550nm处测吸光度A
• 2、硝酸盐的测定（镉柱法）（P179-180)
• 样品经用蛋白质沉淀剂（亚铁氰化钾+乙酸锑）沉淀蛋白质，除去上层脂肪。
• 过滤后（用饱和硼砂溶液作提取剂）得提取液。
• 通过镉柱在氯化胺缓冲液中
• NO3-+Cd = CdO+NO2-用盐酸奈乙二胺法（比色）测NO2-总量
• 减去未经镉柱还原前的NO2-，则得由NO3-还原产生的NO2-量,乘以换算系数1.232得硝酸钠（NaNO3）含量

第6页：漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定

四、漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定

• 测定方法有比色法、滴定法、色谱法
• 盐酸副玫瑰苯胺比色法（P170）A.亚硫酸盐与四氯汞钠反应生成络合物[HgCl2SO3]2-
• Na2HgCl4+SO2+H2O→[HgCl2SO3]2-
• B.与甲醛、对品红作用生成紫红色络合物-
• 聚玫瑰红甲基磺酸
• C. λ=550nm处测A

第7页：食品合成色素的测定

五、食品合成色素的测定

• 测定方法主要有：薄层层析法、高效液相色谱法
• 薄层层析法
• 在酸性条件下，用聚酰胺吸附水溶性合成色素，而与天然色素蛋白质、脂肪、淀粉等分离。
• 在碱性条件下，用适当溶液（如乙醇—氨）将其解吸。
• 用薄层层析法分离鉴别，与标准比较定性，测A定量。

第8页：薄层层析分离及定性

薄层层析分离及定性

• a薄层板：1.6g聚酰胺+0.4g可溶性淀粉+2g硅胶G+15ml水研匀、铺在玻璃板上（0.3mm厚）凉干，80℃1h干燥器中
• b点样：用微量注射器或毛细管将样液点于薄层板上（离底2cm左右2cm线宽＜2mm）成一条底边的线
• c展开：层析缸内放入展开剂（如苋菜红、胭脂红用甲醇：乙二胺：氨水=10：3：4）
• 将薄层板下端浸入溶剂0.5-1cm左右，放约1h（色素明显分开），取出晾干
• d比移值Rf的测定：可用纸层析（层析纸）测定方法基本同上a、b、c
• Rf=
• Rf=与标准样液Rf比较定性为何种色素

第9页：定量测定

定量测定

• A刮下色斑（各条状）
• 移入漏斗（G3砂芯）用丙酮—氨水液解析抽滤
• B用柠檬酸（20％）调pH=6
• C定容
• D在各色素λmax处测A，如柠檬黄428nm，胭脂红508nm
• E作标准曲线
• F计算色素（mg/Kg,L）= CV/W
• c-从标准曲线上查出色素含量μg/ml,v—提取液总体积,w—样品质量（g）

第10页：食品添加剂测定作业题

作业

• 1、食品添加剂的测定方法有哪些？
• 2、防腐剂苯甲酸（钠）的测定方法有哪些？
• 3、简述抗氧化剂BHA（叔丁基对羟基茴香醚）、BHT（2.6—二叔丁基对甲酚）的测定方法。
• 4、简述发色剂—亚硝酸盐、硝酸盐的测定方法。
• 5、简述漂白剂二氧化硫及亚硫酸盐的测定方法。
• 6、简述食品合成色素的测定方法。