13 食品添加剂的测定.ppt

第1页：食品添加剂测定的两项内容

食品添加剂的测定

1. 概述
2. 食品中添加剂的测定

第2页：食品添加剂的定义特点与功能

第一节　食品添加剂的有关知识

1.食品添加剂的定义

为了改善食品的色、香、味及防腐要求而加入食品中的少量的化学合成物质或天然物质

2.特点

物质本身不作为食用目的，也不一定有营养价值

3.功能

保持食品营养、防止腐败变质，增强食品感官性状、满足加工工艺要求，提高食品质量

第3页：食品添加剂的分类

4.食品添加剂的分类：目前我国允许使用并制订了国家标准《食品添加剂使用卫生标准》，按其用途可分为

• 酸度调节剂、抗结剂、消泡剂、抗氧化剂、漂白剂、膨松剂、胶母糖基础剂、着色剂、护色剂、乳化剂、酶制剂、增味剂
• 面粉处理剂、被膜剂、水分保持剂、营养强化剂、防腐剂、稳定剂和凝固剂、甜味剂、增稠剂、食品香料、其它

共22类1500种（世界现在有4000多种）。

第4页：按来源分类的食品添加剂

食品添加剂的种类——按其来源

天然食品添加剂

利用动、植物组织通过一系列化学手段或分泌物及以微生物所得到的有机或无机物的代谢产物为原料，经过提取、加工所得到的物质。如Vc、淀粉糖浆、植物色素等

化学合成添加剂

以化学手段合成制得的添加剂

第5页：常规检测项目与检验方法

5.食品添加剂的常规检测项目

甜味剂、防腐剂、发色剂、漂白剂、品质改良剂、着色剂、抗氧化剂等

6.食品添加剂检验方法

食品添加剂的检测也是先分离再测定。

• 分离——蒸馏法、溶剂萃取法、色层分离等
• 测定——比色法、紫外分光光度法、TLC、HPLC等

7.检测食品添加剂的意义

监督、保证和促进正确合理地使用食品添加剂，确保人民的身体健康

第6页：ADI值与每日允许摄入量

天然食品添加剂一般对人体无害，大多数合成添加剂对人体有毒性、致癌物，要控制加入量。

部分食品添加剂含量的限量指标——ADI值（Accepted Daily Intake）：成人每天每公斤允许的最大摄入量，单位mg/kg体重·日

第7页：食品限量使用指标

食品限量使用指标：加入食品中的最大使用量

第8页：糖精钠的性质

第二节　甜味剂——糖精钠的测定

糖精难溶于水，故生产中常用糖精钠。糖精钠水溶性好，在酸性条件下溶于乙醚，热稳定性比糖精好，甜度为蔗糖的200～700倍。

糖精钠、糖精对人体无营养价值，不分解、不吸收，随尿排出，致癌性有争议，ADI值0～2.5。

一、概述：糖精是应用较为广泛的人工甜味剂，其学名为邻-磺酰苯甲酰亚胺，其结构式见本页图示。

第9页：糖精钠的使用范围与限量

• 婴幼儿食品、病人食品、主食中禁用
• 果酒、露酒、黄酒、啤酒、白酒、肉类、水产类、水果蔬菜类罐头中禁止使用糖精

《食品添加剂使用卫生标准》规定：酱菜类、复合调味料、蜜饯、配料酒、雪糕、冰淇淋、冰棍、糕点、饼干和面包，糖精汁、果汁（味）型饮料按稀释倍数的80%加入；用于瓜子、用于话梅、陈皮类可与规定的其他甜味剂混合使用。

• 瓜子：1.2 g/kg
• 话梅、陈皮类：5.0 g/kg
• 其他类别：最大用量为0.15 g/kg

源文件中各类食品与数值的对应关系排版错乱，此处按数值出现的顺序与常见对应关系整理，建议对照标准原文复核。

第10页：糖精钠的检验方法

二、检验方法（一）糖精钠的定性鉴别

1.间苯二酚法检验　2.火焰法　3.熔点测定法

（二）糖精钠的定量测定国家标准方法 GB/T 5009.28—2003

1. 第一法：高效液相色谱法
2. 第二法：薄层色谱法
3. 第三法：离子选择电极法

第11页：紫外分光光度法测定糖精钠

（一）紫外分光光度法测定糖精钠含量　1.原理

样品前处理后，加酸使糖精钠转化为糖精，用乙醚提取糖精，再经薄层分离后，溶于碳酸氢钠溶液中，于波长270nm处测定吸光度，并与标准比较定量

2.仪器与试剂　3.操作

• ⑴样品预处理
• ⑵薄层板的制备
• ⑶点样：确定基线，距下端2cm处作一微小记号；点放样品：点状、斑状；注意点样针不能触碰薄层板
• ⑷展开：先预饱和，然后薄层板下端浸入液面0.5cm，使展开剂沿薄层上升

第12页：标准曲线的制作

⑸制作标准曲线　方法一（绘图法）

a.根据操作数据列表　b.绘图

方法二（回归法）

a.根据操作数据列表　b.计算回归直线方程 Y ＝ ax ＋ b　c.回归直线的相关性检验

r≤1，r值越接近1，说明所有点越靠近该直线，线性越好，否则越差。

第13页：糖精钠的结果计算

5.结果计算：列出计算式（按标准曲线查得的糖精钠质量与取样量折算）

• X：样品中糖精钠含量，g/kg或g/L

第14页：糖精钠测定的思考题

思考题

1.样品中如含有二氧化碳、酒精时应如何处理？　2.富含脂肪和蛋白质的样品应如何处理？

答：如含有二氧化碳、酒精时应先加热除去；富含脂肪和蛋白质的样品应除去脂肪和蛋白质，以防用乙醚萃取时发生乳化。除去的方法同糖精的测定。

第15页：防腐剂测定的三项内容

第三节　防腐剂的测定

1. 一、概论
2. 二、薄层层析法
3. 三、苯甲酸、山梨酸测定

第16页：防腐剂的定义

一、概论　1.防腐剂

指能防止食品腐败、变质，抑制食品中微生物繁殖，延长食品保存期的物质，它是人类使用最悠久、最广泛的食品添加剂

第17页：防腐剂的种类

2.防腐剂的种类

• 我国允许使用的品种主要有：苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对羟基苯甲酸乙酯和丙酯、丙酸钠、丙酸钙、脱氢乙酸、乳酸链球菌素等
• 新开发的：果胶分解产物、香辛料提取物、琼脂低聚糖、甜菜碱、日扁柏醇、类黑精、葡萄糖氧化酶、熏液、富马酸二甲酯、溶菌酶、鱼精蛋白等
• 非允许的防腐剂：硼砂、水杨酸、氯霉素、青霉素、甲醛、硼酸、β-萘酚、焦碳酸二乙酯等

第18页：苯甲酸与苯甲酸钠的性质

3.防腐剂（苯甲酸钠和山梨酸钾）的测定方法

苯甲酸又名安息香酸，为白色有丝光的鳞片或针状结晶，微溶于水，使用不便，实际生产多用其钠盐。

苯甲酸钠易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂，与酸作用生成苯甲酸。苯甲酸及其钠盐主要用于酸性食品的防腐，在pH 2.5—4其抑菌作用较强，当pH＞5.5时，抑菌效果明显减弱，对霉菌和酵母菌效果甚差。

第19页：苯甲酸与山梨酸的代谢与性质

苯甲酸进入人体后，大部分与甘氨酸结合形成无害的马尿酸，其余部分与葡萄糖醛酸结合生成苯甲酸葡萄糖醛酸甙从尿中排出，不在人体积累，苯甲酸的毒性较小。

山梨酸又名花楸酸（CH₃CH＝CHCH＝CHCOOH），为无色、无嗅的针状结晶，难溶于水。

山梨酸钾易溶于水，难溶于有机溶剂，与酸作用生成山梨酸，比苯甲酸更安全，在体内最后成CO₂和水。

第20页：苯甲酸和山梨酸的测定方法

苯甲酸（钠）和山梨酸（钾）的测定方法（GB/T 5009.29—2003）

• 气相色谱法——氢焰检测器，两种同时测
• 高效液相色谱法——同时测这两种及糖精钠
• 薄层色谱法
• 紫外分光光度法测苯甲酸

第21页：薄层色谱法的原理与流程

二、薄层色谱法

1.原理

利用样品中各组分对吸附剂吸附能力的不同，发生了无数次吸附和解吸过程。对吸附剂吸附能力弱、对展开剂溶解度大的组分随流动相迅速向前移动，可较快地随着展开剂迁移到层析板的上端；对吸附剂吸附能力强的组分移动慢，则留在层析板的下端。利用各组分在展开剂中溶解能力和被解吸能力的不同，最终将各组分彼此分开

2.实验流程

制板→活化→点样→展开→定性或定量

第22页：薄层板的制备与吸附剂

2.1薄层板制备

制板——吸附剂均匀地涂在玻璃板上作为固定相，经干燥、活化后称薄层板；将吸附剂均匀地涂在玻璃板上这个过程称制板

吸附剂

• 分离效果及层析速度主要取决于吸附剂粒度的大小，而吸附作用则与颗粒本身的微孔大小有关
• 吸附剂的活性：对于同一吸附剂，若以不同的方法制备处理，其吸附能力也有强弱的变化，一般常以「活性」表示吸附力的强弱，分为五级，一级活性最强，五级活性最弱，一般用二～三级
• 吸附剂的常用种类有：硅胶、聚酰胺

第23页：制板的两种方法

方法

• 1.平铺法：用购置或自制的薄层涂布器进行制板，涂层既方便又均匀，是科研中常用的方法
• 2.倾注法：将调好的浆料倒在玻璃板上，用手摇晃，使其表面均匀平整，然后放在水平的平板上晾干，这种制板方法厚度不易控制

第24页：制板的注意事项

制板注意事项

• ⑴用湿法制薄层，应放在水平的台面上，否则由于台面不平而使吸附剂糊状体向低处流动，造成薄层厚度不一致
• ⑵晾干时应放在通风良好的地方，无灰尘，以防薄层被污染
• ⑶烘干后应放在干燥器中冷却、贮存

第25页：薄层板的活化

2.2活化

活化的目的：是为了增加吸附剂的吸附能力，即增加活性。操作：湿法制板都应进行晾干、烘干干燥，薄层板经过自然干燥后，失去了大部分水分才能进行活化处理，活化的温度为105～110℃

观察与思考

将含水分过多的薄层板立即放入烘箱（105～110℃）中活化，会出现什么现象？由于水分突然大量蒸发则造成板面断裂或龟裂，而使薄层板不能使用

第26页：薄层板的点样

2.3点样

点样——把含有不同组成的被测样品，点在涂有吸附剂的薄层板上，称点样。点样技术直接影响到分离效果和检出灵敏度

点样仪器

玻璃毛细管（一般用于定性）、生化用血色素管（一般用于定性）、微量注射器（一般用于定量）

在薄板一端1.5厘米处开始每隔2厘米作一记号（铅笔轻轻点一下，切勿刺破薄层）共六点，用0.5毫米直径的毛细管吸取样品，各样品按右图点样二次（样品量5～50微克，点子直径不超过2毫米）。

第27页：薄层板的展开

2.4展开

展开——由于物质中各组分受到吸附剂的吸附力和溶剂的解吸附力的反复作用，各组分在层析板上向前迁移过程称为展开，所用有机溶剂称为展开剂（流动相）

• 将选择的展开剂倒入层析槽或层析缸中（液层高度约为0.5cm），待容器内溶剂蒸气达到饱和后，将点好样的薄层板放入槽或缸中进行展开（注意：点样的位置必须要在展开剂液面之上）
• 展开至溶剂前沿顶端0.5～1厘米处时取出薄板（展开时间约1小时），在溶剂前沿处作记号并放在空气中晾干，以除去溶剂
• 当展开剂前沿上升到板顶端5～10mm处时，取出薄层板，用铅笔划出前沿的位置、晾干

第28页：薄层板的显色

2.5显色

用喷雾器显色，均匀喷雾在薄层上，放烘箱中保持85℃加温至层析斑点显现

第29页：薄层色谱的定性

2.6定性

展开后使各组分分离，再根据比移值进行定性

第30页：薄层色谱的定量与比移值

2.7定量

展开后使各组分分离，再根据比移值和斑点的大小进行定量；用各种显色方法使斑点出现后，应立即用铅笔或小针划出斑点的位置，并计算R值

R值 ＝ 化合物移动的距离（斑点中心到原点的距离）／溶剂的移动的距离（溶剂前沿到原点距离）

第31页：苯甲酸和山梨酸测定的原理与步骤

三、苯甲酸和山梨酸测定（薄层层析法）

1.原理

样品酸化后，用乙醚提取苯甲酸、山梨酸。将样品提取液浓缩，点于聚酰胺薄层板上，展开。显色后，根据薄层板上苯甲酸、山梨酸的比移值，与标准比较定性，并可进行概略定量

2.步骤

制板 → 样品处理→点样→展开→显色→定性或定量

第32页：聚酰胺板的制备

2.1聚酰胺板的制备

称取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加约7mL水，研磨3～5min，立即倒入涂布器内制成0.3mm的薄层板两块，室温干燥后，于80℃干燥1h，取出置于干燥器中保存

注意事项

聚酰胺薄层板，烘干温度不能高于80℃，否则聚酰胺变色

第33页：样品的提取流程

2.2样品提取　操作流程图

2.5g样品→于25mL具塞量筒→加0.5mL盐酸→用15mL乙醚萃取，振摇1min→用10mL乙醚萃取→合并两次萃取液→于另一25mL具塞量筒

思考题：酸化的目的是什么？

使苯甲酸钠、山梨酸钾转变为苯甲酸或山梨酸，用乙醚提取

第34页：提取液的洗涤与浓缩

• 另一25mL具塞量筒→NaCl洗涤两次→静止10min →通过无水Na₂SO₄层过滤→于25mL容量瓶→加乙醚定容至25mL
• 吸取10.0mL乙醚提取液→分次置于10mL具塞离心管中→40℃水浴上挥干→加0.1mL乙醇溶解残渣→备用

第35页：苯甲酸和山梨酸的测定

2.3测定

点样：在薄层下端2cm的基线上，用微量注射器点样品液，同时各点苯甲酸、山梨酸标准溶液

展开与显色

将点样后的薄层板放入预先盛有展开剂的展开槽内，展开槽周围贴有滤纸，待溶剂前沿上展至10cm，取出挥干，喷显色剂，斑点成黄色，背景为蓝色。样品中所含苯甲酸、山梨酸的量与标准斑点比较定量（苯甲酸、山梨酸的比移值见本页图示）

第36页：薄层测定的操作技术要点

操作技术要点

• 点样：少量多次，大小要均匀
• 展开：展开剂倒入展开槽中，展开剂液层约为0.5cm，并盖盖一段时间，使之预先达到饱和状态，再放入薄层板
• 显色：均匀喷洒显色剂

第37页：苯甲酸和山梨酸的计算

2.4计算：X ＝ m₅ × 1000 / [m₆ × (10／25) × (V₆／V₅) × 1000]

源文件中该计算式排版错乱，且未给出 m₅、m₆、V₅、V₆ 等符号的说明，此处按原式结构整理，建议对照教材或标准原文确认各符号含义后再使用。

第38页：护色剂与常用护色剂

第四节　护色剂——硝酸盐和亚硝酸盐的测定

一、护色剂

是能够使肉与肉制品呈现良好色泽的物质

二、常用的护色剂

亚硝酸盐、硝酸盐

第39页：护色剂的作用机理

三、作用机理

• 亚硝酸盐和硝酸盐 → 亚硝基（NO）＋肌红蛋白 → 亚硝基肌红蛋白（MbNO）；＋巯基（—SH）→ 亚硝基血色原（鲜红色）
• 亚硝酸盐对抑制微生物的增殖有一定作用，与食盐并用可增加抑菌，对肉毒梭状芽孢杆菌有特殊抑制作用

源文件本页末尾另注：硝酸盐固体加热放出氧，亚硝酸盐分解退热后放出。

第40页：亚硝酸盐的毒性与解毒作用

4.亚硝酸盐和硝酸盐的毒害作用

作为食品添加剂过多地使用对人体产生毒害作用，亚硝酸盐与仲胺反应生成具有致癌作用的亚硝胺

5.解毒作用

亚硝酸盐对氰化物中毒者是最好的解毒剂

第41页：亚硝酸盐与硝酸盐的检验方法

亚硝酸盐、硝酸盐的检验（GB/T 5009.33—2003）

• 盐酸萘乙二胺法——亚硝酸盐测定，相对偏差＜10%
• 镉柱法——硝酸盐的测定，相对偏差＜10%
• 示波极谱法——亚硝酸盐测定，相对偏差＜10%

第42页：盐酸萘乙二胺法测亚硝酸盐

（一）盐酸萘乙二胺法——亚硝酸盐的测定（格里斯试剂比色法）

1.原理：样品先除蛋白质、脂肪，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化反应后，再与盐酸萘乙二胺偶合反应，形成紫红色物质，538nm为最大吸收，测定吸光度并与标准比较定量

2.试剂、仪器

第43页：亚硝酸盐测定的操作步骤与计算

3.操作步骤

• ⑴样品处理：样品＋饱和硼砂溶液，70℃、300mL水洗，水浴15min，吸取脂肪，过滤，收集滤液
• ⑵制作标准曲线：吸取0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50mL 5.0μg/mL NaNO₂标准液，定容50mL，以亚硝酸钠总含量为横坐标，吸光度为纵坐标
• ⑶样液测定：40mL样液，定容50mL

4.计算：按标准曲线查得亚硝酸钠含量后折算为样品中亚硝酸盐含量（X）。

源文件中结果单位标注为 g/kg，此处更正为 mg/kg。

第44页：漂白剂的概述

第五节　漂白剂——二氧化硫和亚硫酸盐的测定——一、概述

• 漂白剂的定义
• 亚硫酸盐类的漂白作用原理
• 其他作用：防腐、抗氧化
• 使用的漂白剂：SO₂、亚硫酸钠、低亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、熏硫
• 使用限量指标，残留量指标

第45页：亚硫酸钠的测定方法

二、亚硫酸钠的测定（GB/T 5009.34—2003）

• 第一法盐酸副玫瑰苯胺比色法
• 第二法蒸馏法

第一法盐酸副玫瑰苯胺比色法　1.原理

亚硫酸盐与四氯汞钠反应生成稳定的络合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色物质，其颜色的深浅与亚硫酸盐含量成正比，可通过比色测定

第46页：盐酸副玫瑰苯胺的结构式

盐酸副玫瑰苯胺　黄色副玫瑰苯胺（本页为化学结构式图示）

第47页：α—羟基磺酸的结构式

α—羟基磺酸（本页为化学结构式图示）

第48页：比色法所用试剂

2.试剂

• 0.1mol/L四氯汞钠溶液
• 0.1%盐酸副玫瑰苯胺溶液
• 1.2%氨基磺酸铵溶液
• 0.2%甲醛溶液
• 二氧化硫标准使用液：2μg/mL
• 0.5mol/L氢氧化钠溶液
• 0.5mol/L硫酸溶液

第49页：二氧化硫测定的样品处理

3.操作　⑴样品处理

称取5～10g砂糖，以少量水溶解，移入100mL容量瓶中，加0.5mol/L氢氧化钠溶液4mL，5分钟后加入0.5mol/L硫酸溶液4mL，然后再加入四氯汞钠吸收液20mL，用水定容

第50页：二氧化硫标准曲线的绘制

⑵标准曲线绘制

吸取二氧化硫标准使用液0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00mL，分别加入25mL带塞比色管中，加入四氯汞钠溶液体积达到10mL，然后各加入1mL 1.2%氨基磺酸铵溶液、1mL 0.2%甲醛溶液、1mL 0.1%盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，静置20分钟，用1cm比色皿，以零管为空白，在波长550nm处测吸光度，以SO₂含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线

第51页：二氧化硫样液的测定

⑶样液的测定

吸取样品处理液0～5.00mL置于25mL带塞比色管中，按绘制标准曲线操作进行，并测出吸光度，从标准曲线上查得样品处理液的SO₂含量

第52页：二氧化硫的结果计算

4.计算：二氧化硫含量（g/kg） ＝ C × 1000 / (m × V／100 × 1000 × 1000)

• C：测定时样品处理液SO₂含量，μg
• m：样品质量，g
• V：测定用样液体积，mL

第53页：比色法的四点说明

5.说明

• ①颜色较深样品，需用活性炭脱色
• ②样品中加入四氯汞钠吸收液以后，溶液中的二氧化硫含量在24小时之内稳定，测定需在24小时内进行；四氯汞钠作为萃取剂，如果用水萃取，易造成SO₂的丢失（20℃时，1体积水溶解40体积SO₂）
• ③此方法适用于含SO₂＜50ppm，含量高时适于用碘量法及中和法测定
• ④四氯汞钠毒性甚大，有人研究用EDTA代替

第54页：抗氧化剂的概述

第六节　抗氧化剂（BHA、BHT）的检验——一、概述

• 抗氧化剂的定义
• 常用抗氧化剂：BHA、BHT、PG、对羟基苯甲酸酯类
• 限量使用指标

第55页：BHA与BHT的测定方法

二、食品中BHA与BHT的测定（GB/T 5009.30—2003）

1. 第一法气相色谱法
2. 第二法薄层色谱法
3. 第三法比色法

第56页：比色法测定BHT的原理

第三法比色法——测油脂中BHT的含量　1.原理

水蒸气蒸馏分离BHT，用甲醇吸收，加邻联二茴香胺与亚硝酸钠溶液生成橙红色物质，用三氯甲烷提取后比色定量

第57页：比色法所用试剂

2.试剂

• 无水氯化钙
• 甲醇
• 三氯甲烷
• 甲醇（50%）
• 亚硝酸钠溶液：3g/L，避光保存
• 邻联二茴香胺溶液：称取125mg邻联二茴香胺于50mL棕色容量瓶中加25mL甲醇，振摇使其溶解，加50mg活性炭，振摇5min过滤，取20.0mL滤液置于另一50mL棕色容量瓶中，加盐酸（1＋11）至刻度，临用时现配并避光保存

第58页：BHT标准溶液的配制

• BHT标准溶液：准确称取0.050g BHT，用少量甲醇溶解，移入100mL棕色容量瓶中，并稀释至刻度，避光保存。此溶液每毫升相当于0.50mg BHT
• BHT标准使用液：临用时吸取1.0mL BHT标准溶液，置于50mL棕色容量瓶中加甲醇至刻度，混匀，避光保存。此溶液每毫升相当于10.0μg BHT

第59页：比色法所用仪器

3.仪器

• 水蒸气蒸馏装置
• 甘油浴
• 分光光度计

第60页：BHT测定的试样处理

4.测定步骤　⑴试样处理

称取2g～5g粉碎试样（约含0.40mg BHT）于100mL蒸馏瓶中，加16.0g无水氯化钙粉末及10.0mL水，当甘油浴温度达到165℃恒温时，将蒸馏瓶浸入甘油浴中，连接好水蒸气发生装置，冷凝管下端浸入有50mL甲醇的200mL容量瓶中，进行蒸馏，蒸馏速度1.5～2mL/min，在50～60min内收集约100mL馏出液（连同原有的甲醇共约150mL，蒸汽压不可太高，以免油滴带出），以温热的甲醇分次洗涤冷凝管，洗液合并于容量瓶中并稀释至刻度

第61页：BHT的显色与比色测定

⑵测定

准确吸取25.0mL上述处理后的试样溶液，移入用黑纸（布）包扎的100mL分液漏斗中；另准确吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL BHT标准使用液，分别置于用黑纸（布）包扎的60mL分液漏斗中，加入甲醇（50%）至25mL；分别加入5mL邻联二茴香胺溶液，混匀，再各加2mL亚硝酸钠溶液，振摇1min，放置10min，再加入10mL三氯甲烷，剧烈振摇1min，静置3min后，将三氯甲烷层移入用黑纸（布）包扎的10mL比色管中，管中预先放入2mL甲醇，混匀；用1cm比色皿以三氯甲烷为参比，于波长520nm处测定吸光度，制作标准曲线，比较定量

第62页：BHT的结果计算

5.结果计算：X ＝ m₂ × 1000 / (m₁ × V₂／V₁ × 1000 × 1000)

• X：试样中BHT的含量，g/kg
• m₂：测定用样液中BHT的质量，μg
• m₁：试样质量，g
• V₁：蒸馏后样液总体积，mL
• V₂：测定用吸取样液的体积，mL

第63页：