04 第四章 有害物质的测定.ppt

第1页：第四章有害物质的测定目录

第四章有害物质的测定

• 一、测定意义
• 二、农药残留量的测定
• （一）有机氯农药残留量的测定
• 1、气相色谱法
• 2、薄层色谱法
• 3、高效液相色谱法
• （二）有机磷农药残留量的测定
• 1、气相色谱法
• 2、薄层色谱法
• 3、高效液相色谱法

第2页：有害元素的测定

三、有害元素的测定

• （一）铅的测定
• 1、双硫腙比色法
• ①原理：样品经消化后，在pH=8～9时Pb2++双硫腙→红色螯合物，可被三氯甲烷、四氯化碳等有机溶剂萃取，加入盐酸羟胺、氰化钾、柠檬酸铵，可防止Fe、Cu、Zn等干扰，比较颜色深浅可测Pb浓度
• ②测定
• 吸取10μg/ml Pb标准溶液0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5ml分液漏斗中，加入1％HNO320ml加入柠檬酸铵/盐酸羟胺/氰化钾/三氯甲烷于λ=510nm测A
• 同样测待测液，绘制标准溶液
• 2、原子吸收分光光度法（259-262）

第3页：黄曲霉毒素AFTB1的测定

四、黄曲霉毒素AFTB1的测定（P236-239)

• （一）方法原理（薄层色谱法）
• 经有机溶剂提取、净化、浓缩，经薄层色谱分离，在365nm紫外光下产生蓝紫色荧光，据薄层板上显示荧光的最低检出量测定黄曲霉毒素B1的含量。
• （二）样品预处理
• 1、提取：根据性质，可选用甲醇、氯仿为溶剂。
• 油脂高的需用己烷、石油醚脱除。
• 用甲醇：水=55：45萃取（AFT B1易与蛋白质大分子包围）AFT B1
• 2、净化：用乙醚、己烷去油脂、色素、用甲醇、氯仿洗下AFT,采用液—液分配萃取法
• 3、浓缩：蒸发皿中挥干后再溶解,溶解液为苯—乙腈液
• （三）样品测定
• 1、薄层板的制备选择吸附剂（硅胶G）加水成糊，涂布薄层
• 2、点样（P238) 3、展开4、观察5、验证试验6、定量（四）计算(239)
• XB1= (0.0004×1000) / [(V1×w) / V2]

第4页：食品分析方法的建立

食品分析方法的建立

• 食品分析方法的建立主要从两个方面考虑
• 1、样品处理
• 是食品分析的前提
• 应根据不同样品采用不同方法进行样品处理，采取的措施：分离、掩蔽
• A.待测组分的性质
• 如黄曲霉毒素AFT B1,难溶于水、己烷、戊烷、石油醚、乙醚
• 易溶于氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、油对光、热、酸稳定,对碱、氧化剂不稳定,在365nm紫外光照射下（激发λ=425nm）
• B.被测食品样品的特征
• 根据不同食品样品的不同特征，采取相应的样品处理方法;提取：根据性质，可选用甲醇、氯仿为溶剂。
• 油脂高的需用己烷、石油醚脱除。
• 用甲醇：水=55：45萃取（AFT B1易与蛋白质大分子包围）AFTB1
• 净化：用乙醚、己烷去油脂、色素、用甲醇、氯仿洗下AFT,采用液—液分配法,色谱柱分离
• 浓缩：蒸发皿中挥干后再溶解,溶解液为苯—乙腈液

第5页：选择适宜的测定方法

2、选择适宜的测定方法

• ①建立测定方法的依据
• 根据待测组分的性质特点及要求进行选择
• ②建立分析方法的原理及技术
• A.分离方法、分析方法的确定
• 一般采用提取、净化、浓缩步骤
• 如：AFTB1可采用荧光分光光度法进行测定。
• 激发λ=365nm，发射λ425nm
• 可采用薄层色谱法进行定性、定量分析。关键是选择良好的吸附剂（硅胶G）和适宜的展开剂（乙醚、丙酮+氯仿）
• B.进样量的确定
• 稀释定量：样液中AFTB1荧光点强度与AFTB1标准点最低检出量（0.0004μg）的荧光强度一致（5μg/Kg）若不一致，再稀释至一致为止。
• C.论证所用方法的可靠性
• 通常采用测定回收率方法。还可与仲裁方法（或标准方法）比较。（如不溶性膳食纤维测定）

第6页：有害物质测定思考题

思考题：

• 1、简述有机氯农药残留量的测定方法。
• 2、简述有机磷农药残留量的测定方法。
• 3、简述有害元素的测定方法。
• 4、简述铅的测定方法。
• 5、简述黄曲霉毒素AFTB1的测定方法。