06 第六章 吸光光度法.ppt

第1页：第六章吸光光度法

第六章吸光光度法

第六章吸光光度法

第2页：化学分析

化学分析

化学分析：常量组分(>1%), Er 0.1%～0.2%依据化学反应, 使用玻璃仪器化学分析与仪器分析方法比较仪器分析：微量组分(<1%), Er 1%～5%依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器例: 含Fe约0.05%的样品, 称0.2g, 则m(Fe)≈0.1mg重量法m(Fe2O3)≈0.14mg, 称不准容量法V(K2Cr2O7)≈0.02mL, 测不准光度法结果0.048%～0.052%, 满足要求准确度高灵敏度高

第3页：特点–灵敏度高

特点–灵敏度高

特点–灵敏度高：测定下限可达10－5～10－6mol/L, 10-4%～10-5%–准确度能够满足微量组分的测定要求：相对误差2～5％（1～2％）–操作简便快速–应用广泛一、光的基本知识吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。

第4页：1.光的基本性质电磁波的波粒二象性c－真

1.光的基本性质电磁波的波粒二象性c－真

1.光的基本性质电磁波的波粒二象性c－真空中光速2.99792458×108m/s~3.0 ×108m/sλ－波长，单位：m,cm,mm,m,nm,Å1m=10-6m, 1nm=10-9m, 1Å=10-10mν－频率，单位：赫芝（周）Hz 次/秒n－折射率，真空中为1光的传播速度:波动性

第5页：磁场向量电场向量传播方向YZX与物质作用

磁场向量电场向量传播方向YZX与物质作用

磁场向量电场向量传播方向YZX与物质作用

第6页：微粒性h－普朗克(Planck

微粒性h－普朗克(Planck

－频率E－光量子具有的能量单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 光量子，具有能量。

第7页：波粒二象性结论:一定波长的光具有一定的能量

波粒二象性结论:一定波长的光具有一定的能量

单色光

具有相同能量(相同波长)的光。

混合光

具有不同能量(不同波长)的光复合在一起。

真空中:

真空中:

第8页：82、光学光谱区远紫外近紫外可见近红外中

82、光学光谱区远紫外近紫外可见近红外中

82、光学光谱区远紫外近紫外可见近红外中红外远红外（真空紫外）10nm~200nm200nm~380nm380nm~780nm780 nm~2.5 m2.5 m~50 m50 m~300 m

第9页：可见光波长与互补光对照

可见光波长与互补光对照：下表列出相关数据。

第10页：104、物质的颜色（1）

104、物质的颜色（1）

• A. 全部吸收：黑色B: 全部反射：白色C：均等吸收：灰色D：反射某光，吸收其它光：颜色由反射光决定
• 如：红旗就是红旗表面反射红光，而吸收其它光，所以呈红色。物质的颜色由物质对光的吸收、透过、反射情况来决定。

第11页：11（2）、透明溶液的颜色透明溶液的颜色

11（2）、透明溶液的颜色透明溶液的颜色

例如

高锰酸钾溶液呈紫红色，就是它吸收绿光（在525nm最大吸收），透过紫红光。

又如

铬酸钾呈黄色，吸收蓝光，透过黄光。

第12页：吸收光谱图示页

吸收光谱图示页

/nm350525 545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光谱350

第13页：二、光吸收的基本定律

二、光吸收的基本定律

其关系如下：

第14页：I0：入射光强度

I0：入射光强度

• I ：透射光强度
• b ：吸收层厚度
• C ：吸光物质的浓度
• a′：物质吸光能力
• 2、透光率和吸光度
• 表示溶液对光的吸收程度

第15页：透光率（透射比或透光度）

透光率（透射比或透光度）

• 溶液的透射比愈大，表示它对光的吸收愈小;
• 相反，透射比愈小，表示它对光的吸收愈大。

第16页：用这种带有指数的形式表示吸收程度并不方便

用这种带有指数的形式表示吸收程度并不方便

• 由于a′是吸光能力，在一定条件下为常数，所以可把0.434a′合并一个比例常数K
• 这样吸光度A为：A=KCb

第17页：173、摩尔吸收系数和桑德尔灵敏度*

173、摩尔吸收系数和桑德尔灵敏度*

• ε称为摩尔吸收系数，单位为L·mol-l·cm-1。
• 它表示物质的量浓度为l mol·L-1，液层厚度为l cm时溶液的吸光度。

第18页：吸光系数与摩尔吸光系数

吸光系数与摩尔吸光系数：下表列出相关数据。

第19页：桑德尔(Sandell)灵敏度

桑德尔(Sandell)灵敏度

桑德尔(Sandell)灵敏度(灵敏度指数) SS是指当仪器的检测极限A=0.001时，单位截面积光程内所能检测出来的吸光物质的最低含量，其单位为µg·cm-2，S与ε及吸光物质摩尔质量M的关系为：

第20页：

本页源文件未提取到文字内容，仅有图片。位于「桑德尔(Sandell)灵敏度」与「例题：有」之间，建议对照原课件图片补充本页要点说明。

第21页：例题：有

例题：有

求吸收系数a、摩尔吸收系数ε和桑德尔灵敏度s各为多少？

第22页：三、比色法和吸光光度法及其仪器

三、比色法和吸光光度法及其仪器

观察方向c1c2c3c4C样品

第23页：总之：方便、灵敏，准确度差

总之：方便、灵敏，准确度差

总之：方便、灵敏，准确度差。1.目视比色法优点：仪器简单，操作简便，适宜于大批试样的分析。主要缺点：准确度不高。

第24页：2. 吸光光度法(1)

2. 吸光光度法(1)

2. 吸光光度法(1). 分光光度计结构光源单色器吸收池检测系统稳压电源分光光度法的基本部件分光光度计结构示意图单色器光电管

第25页：25722型分光光度计结构方框图光源吸收

25722型分光光度计结构方框图光源吸收

25722型分光光度计结构方框图光源吸收池检测系统分光系统

第26页：分光光度计的主要部件光源

分光光度计的主要部件光源

可见光区

钨灯，碘钨灯(320～2500nm)紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm)单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。

棱镜

玻璃350～3200nm, 石英185～4000nm光栅:波长范围宽, 色散均匀,分辨性能好, 使用方便

第27页：棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同

棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同

棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同单色器入射狭缝准直透镜棱镜聚焦透镜出射狭缝白光红紫λ1λ2800600500400

第28页：光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽

光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽

M1M2出射狭缝光屏透镜平面透射光栅光栅衍射示意图原理：利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光.

第29页：吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液

吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液

可见光区

光学玻璃池紫外区：石英池检测器：利用光电效应，将光能转换成电流讯号。

光电池，光电管，光电倍增管指示器

低档仪器：刻度显示中高档仪器：数字显示，自动扫描记录

第30页：比色皿(coloritrough)也称吸收池

比色皿(coloritrough)也称吸收池

• 用于盛放试液的容器。
• 它是由无色透明、耐腐蚀、化学性质相同、厚度相等的玻璃制成的，按其厚度分为0.5cm，lcm，2cm，3cm和5cm。
• 在可见光区测量吸光度时使用玻璃吸收池，紫外区则使用石英吸收池。
• 使用比色皿时应注意保持清洁、透明，避免磨损透光面。

第31页：检测器SeAu

检测器SeAu

硒光电池Ag、Au

第32页：光电管红敏管

光电管红敏管

光电管红敏管625-1000 nm蓝敏管200-625 nmNi环（片）碱金属光敏阴极h

第33页：光电倍增管待扫描

光电倍增管待扫描

光电倍增管待扫描160-700 nm1个光电子可产生106～107个电子

第34页：34（2）、吸光光度法Spectroph

34（2）、吸光光度法Spectroph

• 标准曲线校正曲线工作曲线Standard curve-calibrated curve-working curve0 1 2 3 4 mg/mlA。
• *0.80.60.40.20

第35页：353、光电比色法通过滤光片得一窄范围的

353、光电比色法通过滤光片得一窄范围的

353、光电比色法通过滤光片得一窄范围的光(几十nm)光电比色计结构示意图灵敏度和准确度比目视比色法好

第36页：分光光度计的类型

分光光度计的类型

分光光度计的类型

第37页：§6.2 光度分析法的设计

§6.2 光度分析法的设计

§6.2 光度分析法的设计1 显色反应2 显色条件的选择3 测量波长和吸光度范围的选择4 参比溶液的选择5 标准曲线的制作

第38页：显色反应（color reaction

显色反应（color reaction

• 待测物质是无色或很浅的颜色，需要选适当的试剂与被测离子反应生成有色化合物再进行测定，此反应称为显色反应，所用的试剂称为显色剂（color reagent）。
• 例如：稀溶液Fe3+与SCN-的显色反应Fe3+＋SCN-＝Fe(SCN)n-3n=1~6（无色）（血红色）按显色反应的类型来分，主要有氧化还原反应和络合反应两大类，而络合反应是最主要的。

第39页：39（1）显色反应的选择A选择性好

39（1）显色反应的选择A选择性好

• 灵敏度高，有色物质的ε应大于104。
• B有色化合物的组成恒定，符合一定的化学式。
• C有色化合物的化学性质稳定，至少保证在测量过程中溶液的吸光度基本恒定。
• 这就要求有色化合物不容易受外界环境条件的影响。
• D有色化合物与显色剂之间的颜色差别要大，即显色剂对光的吸收与络合物的吸收有明显区别，要求两者的吸收峰波长之差Δλ(称为对比度)大于60nm。

第40页：40（2）显色剂显色剂有两大类

40（2）显色剂显色剂有两大类

• 无机显色剂不多，因为生成的络合物不稳定，灵敏度和选择性也不高。
• 如用KSCN显色测铁、钼、钨和铌；
• 用钼酸铵显色测硅、磷和钒;
• 用H2O2显色测钛等。
• 有机显色剂分子中含有生色团（chromophoricgroup）和助色团（auxochromegroup）。
• 生色团是某些含不饱和键的基团，如偶氮基、对醌基和羰基等。
• 这些基团中的π电子被激发时需能量较小，可吸收波长200nm以上的可见光而显色。
• 助色团是含孤对电子的基团，如氨基、羟基和卤代基等。
• 这些基团与生色团上的不饱和键作用，使颜色加深。

第41页：有机显色剂A磺基水杨酸OO型螯合剂

有机显色剂A磺基水杨酸OO型螯合剂

• B丁二酮肟NN型螯合显色剂，用于测定Ni2+。
• C1，10-邻二氮菲NN型螯合显色剂，测微量Fe2+。
• D二苯硫腙含S显色剂，萃取光度测定Cu2+，Pb2+，Zn2+，Cd2+，Hg2+等。
• E偶氮胂Ⅲ(铀试剂Ⅲ)偶氮类螯合剂，强酸性溶液中测Th(Ⅳ),Zr(Ⅳ)，U(Ⅳ)等；
• 在弱酸性溶液中测稀土金属离子。
• F铬天青S三苯甲烷类显色剂，测定Al3+。
• G结晶紫三苯甲烷类碱性染料，测定Tl3+。

第42页：42（3）多元络合物多元络合物是由三种或

42（3）多元络合物多元络合物是由三种或

• 目前应用较多的是由一种金属离子与两种配位体所组成的三元络合物。
• 三元络合物在吸光光度分析中应用较普遍。
• 重要的三元络合物类型。
• *三元混配络合物金属离子与一种络合剂形成未饱和络合物，然后与另一种络合剂结合，形成三元混合配位络合物，简称三元混配络合物。
• 例如，V(V)，H2O2和吡啶偶氮间苯二酚(PAR)形成1:1:1的有色络合物，可用于钒的测定，其灵敏度高，选择性好。

第43页：43*离子缔合物金属离子先与络合剂生成络

43*离子缔合物金属离子先与络合剂生成络

• 主要用于萃取光度法。
• 如，Ag+与1，10-邻二氮菲形成阳离子，再与溴邻苯三酚红的阴离子形成深蓝色的离子缔合物。
• 用F-、H2O2、EDTA作掩蔽剂，可测定微量Ag+。
• 作为离子缔合物的阳离子，有碱性染料、1，10-邻二氮菲及其衍生物、安替比林及其衍生物、氯化四苯砷(或磷、锑)等;
• 作为阴离子，有X-，SCN-，ClO4-，无机杂多酸和某些酸性染料等。

第44页：显色条件的选择显色反应

显色条件的选择显色反应

（1）溶液的酸度显色反应：M + HR === MR + H+（被测金属离子）（显色剂）（显色络合物)* 酸度影响显色剂的平衡浓度和颜色* 酸度影响被测金属离子的存在状态* 酸度影响络合物的组成

第45页：酸度对显色反应的有较多的影响

酸度对显色反应的有较多的影响

pHpH值选择在pH1~pH2范围内，酸度对吸光度影响不大。

第46页：46（2）显色剂的用量M(被测组分

46（2）显色剂的用量M(被测组分

• 显色剂不是越多越好。
• 有些显色反应，显色剂加入太多，反而会引起副反应，对测定不利。
• 在实际工作中根据实验结果来确定显色剂的用量，即通过作A~R显色剂曲线来确定R的用量。

第47页：对（a）图

对（a）图

对（b）图：应选择在吸光度最大的小范围之间对（c）图：无法选择，严格控制R量。

第48页：48（3）显色反应时间有些显色反应瞬间完成

48（3）显色反应时间有些显色反应瞬间完成

• 有些显色反应虽能迅速完成，但有色络合物的颜色很快开始褪色;
• 有些显色反应进行缓慢，溶液颜色需经一段时间后才稳定。
• 在实际工作中根据实验结果来确定显色反应时间，即通过作A~t曲线来确定适宜时间。
• （4）显色反应温度：显色反应大多在室温下进行。
• 但是，有些显色反应必需加热至一定温度完成。
• 在实际工作中根据实验结果来确定显色反应温度，即通过作A~T曲线来确定适宜反应温度。

第49页：如在Fe(SCN

如在Fe(SCN

• 如在Fe(SCN)3的溶液中加入丙酮颜色加深。
• 还可能提高显色反应的速率，影响有色络合物的溶解度和组成等。

第50页：50（6）干扰及其消除方法试样中存在干扰

50（6）干扰及其消除方法试样中存在干扰

• A.干扰物质本身有颜色或与显色剂反应，在测量条件下也有吸收，造成正干扰。
• B.干扰物质与被测组分反应或与显色剂反应，便显色反应不完全，也会造成干扰。
• C.干扰物质在测量条件下从溶液中析出，便溶液变混浊，无法准确测定溶液的吸光度。
• 为消除以上原因引起的干扰，可采取以下几种方法。

第51页：a.控制溶液酸度b.加入掩蔽剂选取的条件

a.控制溶液酸度b.加入掩蔽剂选取的条件

• c.利用氧化还原反应，改变干扰离子的价态d.利用校正系数e.用参比溶液消除显色剂和某些共存有色离子的干扰。
• f.选择适当的波长g.当溶液中存在有消耗显色剂的干扰离子时，可通过增加显色剂的用量来消除干扰。
• h.分离以上方法均不奏效时，采用预先分离的方法。

第52页：测量波长和吸光度范围的选择（

测量波长和吸光度范围的选择（

选用这种波长的光进行分析，不仅灵敏度高，且能减少或消除由非单色光引起的对朗伯-比尔定律的偏离。

第53页：/nm350525

/nm350525

/nm350525 Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光谱350但是，在最大吸收波长处有其他吸光物质干扰测定时，则应根据“吸收最大，干扰最小”的原则选择入射光波长。

第54页：例丁二酮肟光度法测钢中镍

例丁二酮肟光度法测钢中镍

• 但试样中的铁用酒石酸钠掩蔽后，在470 nm处也有一定吸收，干扰镍的测定。
• 为避免铁的干扰，可以选择波长520 nm进行测定，虽然测镍的灵敏度有所降低，但酒石酸铁不干扰镍的测定。

第55页：55（2）吸光度范围的选择从仪器测量误差的角度来看

55（2）吸光度范围的选择从仪器测量误差的角度来看

可通过控制溶液的浓度或选择不同厚度的吸收池来达到目的。

第56页：4. 参比溶液的选择A = A1 +

4. 参比溶液的选择A = A1 +

(1) 什么是参比溶液在光度分析中用作调零点的任何溶液称参比溶液，简称参比。

第57页：用参比溶液调T=100%（A=0）

用参比溶液调T=100%（A=0）

A = A1 + A2 + … +An

第58页：利用参比溶液来调节仪器的零点

利用参比溶液来调节仪器的零点

• 参比溶液选择：a试液及显色剂均无色，蒸馏水作参比溶液。
• b显色剂为无色，被测试液中存在其他有色离子，用不加显色剂的被测试液作参比溶液。
• c显色剂有颜色，可选择不加试样溶液的试剂空白作参比溶液。

第59页：d 显色剂和试液均有颜色

d 显色剂和试液均有颜色

e 改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，可以此溶液作为参比溶液消除干扰。

第60页：§6.3 光度分析法的误差

§6.3 光度分析法的误差

§6.3 光度分析法的误差1. 对朗伯-比尔定律的偏离2. 吸光度测量的误差

第61页：1. 对朗伯-比尔定律的偏离在吸光光度分析中

1. 对朗伯-比尔定律的偏离在吸光光度分析中

• 这种情况称为偏离朗伯-比尔定律。
• 若在曲线弯曲部分进行定量，将会引起较大的误差。
• 偏离朗伯－比尔定律的原因主要是仪器或溶液的实际条件与朗伯-比尔定律所要求的理想条件不一致。

第62页：62（1）非单色光引起的偏离*朗伯-比尔

62（1）非单色光引起的偏离*朗伯-比尔

由于物质对不同波长光的吸收程度的不同，因而导致对朗伯－比尔定律的偏离。

第63页：63* 克服非单色光引起的偏离的措施

63* 克服非单色光引起的偏离的措施

• 使用比较好的单色器，从而获得纯度较高的“单色光”，使标准曲线有较宽的线性范围。
• 入射光波长选择在被测物质的最大吸收处，保证测定有较高的灵敏度，此处的吸收曲线较为平坦，在此最大吸收波长附近各波长的光的ε值大体相等，由于非单色光引起的偏离要比在其他波长处小得多。
• 测定时应选择适当的浓度范围，使吸光度读数在标准曲线的线性范围内。

第64页：64（2）介质不均匀引起的偏离不均匀介质

64（2）介质不均匀引起的偏离不均匀介质

• 如果被测溶液不均匀，是胶体溶液、乳浊液或悬浮液时，入射光通过溶液后，除一部分被试液吸收外，还有一部分因散射现象而损失，使透射光(I)减少，因而实测吸光度增加，便标准曲线偏离直线向吸光度轴弯曲。
• 故在光度法中应避免溶液产生胶体或混浊。

第65页：65（3）由于溶液本身的化学反应引起的偏

65（3）由于溶液本身的化学反应引起的偏

A.解离大部分有机酸碱的酸式、碱式对光有不同的吸收性质，溶液的酸度不同，酸(碱)解离程度不同，导致酸式与碱式的比例改变，使溶液的吸光度发生改变。

第66页：B .络合显色剂与金属离子生成的是多级络合物

B .络合显色剂与金属离子生成的是多级络合物

• c . 缔合例如在酸性条件下，CrO42-会缔合生成Cr2O72-，而它们对光的吸收有很大的不同。
• 在分析测定中，要控制溶液的条件，使被测组分以一种形式存在，以克服化学因素所引起的对朗伯－比尔定律的偏离。

第67页：对于同一仪器

对于同一仪器

• 但由此引起的△A并不相同，因而产生△A/A 也不相同2 吸光度测量的误差在吸光光度分析中，仪器测量不准确也是误差的主要来源。
• 任何光度计都有一定的测量误差。
• 这些误差可能来源于光源不稳定，实验条件偶然动，读数不准确等。
• 在光度计中，透射率的标尺刻度均匀。
• 吸光度标尺刻度不均匀。

第68页：浓度误差与△A或△T的关系

浓度误差与△A或△T的关系

浓度误差与△A或△T的关系：

第69页：从以上可看出

从以上可看出

那么与T之间关系如何呢？见图

第70页：

本页源文件未提取到文字内容，仅有图片。位于「从以上可看出」与「总结：待测溶液的透射率T在15%~65%」之间，建议对照原课件图片补充本页要点说明。

第71页：总结：待测溶液的透射率T在15%~65%

总结：待测溶液的透射率T在15%~65%

当A=0.434(或透射比T=36.8%)时，测量的相对误差最小。

第72页：硅标准溶液浓度与吸光度数据

硅标准溶液浓度与吸光度数据：下表列出相关数据。

题干另给出：称取钢样 0.500 g，溶解后转入 50 mL 容量瓶，同条件下测得吸光度 A = 0.522，用于求试样中硅的质量分数。末点吸光度 1.01 略偏离线性，属原文数据，未作修改。

第73页：§6.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用

§6.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用

§6.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用1 示差吸光光度法2 双波长吸光光度法3 弱酸和弱碱解离常数的测定4 络合物组成的测定

第74页：示差吸光光度法

示差吸光光度法

• 示差吸光光度法可克服这一缺点。
• 目前，主要有高浓度示差吸光光度法、低浓度示差吸光光度法和使用两个参比溶液的精密示差吸光光度法。
• 它们的基本原理相同，且以高浓度示差吸光光度法应用最多，仅介绍高浓度示差吸光光度法。

第75页：原理假设分别以c0和cx表示参比溶液和被测试液的浓度

原理假设分别以c0和cx表示参比溶液和被测试液的浓度

原理假设分别以c0和cx表示参比溶液和被测试液的浓度，且cx＞c0，根据朗伯－比耳定律可得：

第76页：所测得吸光度差与这两种溶液的浓度差成正比

所测得吸光度差与这两种溶液的浓度差成正比

• 作ΔA和Δc的标准曲线，根据测得的ΔA求出相应的Δc值。
• 从cx=co+∆c可求出待测试液的浓度，这就是示差吸光光度法定量的基本原理。
• ∆C∆A。
• *0.80.60.40.20

第77页：双波长吸光光度法

双波长吸光光度法

双波长吸光光度法（dual-wavelength）（1）双波长吸光光度法的原理从光源发射出来的光线分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长的单色光，使两束不同波长的单色光以一定的时间间隔交替地照射同一吸收池，测量并记录两者吸光度的差值∆A。

第78页：设波长为λ1和λ2的两束单色光的强度相等

设波长为λ1和λ2的两束单色光的强度相等

设波长为λ1和λ2的两束单色光的强度相等，则有：可见ΔA与吸光物质浓度成正比，这是双波长吸光光度法定量分析的理论依据。

第79页：本章内容收尾页

本章内容收尾页

谢谢合作！

第80页：

本页源文件未提取到文字内容，仅有图片。位于「谢谢合作！」与「7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用」之间，建议对照原课件图片补充本页要点说明。

第81页：7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用

7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用

• *单组分的测定：进行单组分的测定，以络合物吸收峰作测量波长，参比波长的选择有：以等吸收点为参比波长;
• 以有色络合物吸收曲线下端的某一波长作为参比波长；
• 以显色剂的吸收峰为参比波长。

第82页：7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用*

7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用*

对于相互干扰的双组分体系，它们的吸收光谱重叠，选择参比波长和测定波长的条件是:待测组分在两波长处的吸光度之差ΔA要足够大，干扰组分在两波长处的吸光度应相等，这样用双波长法测得的吸光度差只与待测组分的浓度成线性关系，与干扰组分无关，从而消除了干扰。

第83页：7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用测

7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用测

• 当选择λ2为测量波长，三氯苯酚在此波长处也有较大吸收，产生干扰。
• 选择波长λ1或λ1‘（等吸收点）作为参比波长，则可以消除三氯苯酚对苯酚测定的干扰。

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7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用

7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用3 弱酸和弱碱解离常数的测定HB==H++B-

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7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用

以吸光度A为纵坐标，[R]/[M]为横坐标作图。

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7.4 其他吸光光度法及吸光光度法应用

当溶液中络合物MRn浓度最大时

当溶液中络合物MRn浓度最大时，cR/cM比值为n。

当cM/c为0.5时，络合比为1

1；

当cM/c为0.33，络合比为1

2；

当cM/c=0.25时，络合比为1

3。

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本章作业图示页

本章作业p238 4 ，5p239 11，13

第88页：

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