首页畜牧兽医畜牧学家畜繁殖学 18 第八章 配子与胚胎生物工程7.7.ppt

18 第八章 配子与胚胎生物工程7.7.ppt

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本课件讲早期胚胎体外培养的培养液与培养系统、牛猪羊体外受精效果数据与存在问题、透明带下注射等辅助受精技术与卵胞质内精子注射的应用前景，随后讲克隆的定义、牛胚胎分割与囊胚分割、卵裂球培养，以及细胞核移植的概念、核供体类型与技术程序。

早期胚胎体外培养页，讲培养液成分、三类培养系统与受精24小时后的培养方法
胚胎体外培养阶段图注，展示1细胞到2细胞、4至8细胞、桑椹胚与囊胚的发育顺序
牛、羊、猪体外受精效果对照表，比较卵裂率、囊胚率与移植后产仔率
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第1页：早期胚胎的体外培养

（三）早期胚胎的体外培养（IVC）1、培养液：基本成分主要包括无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物和蛋白质等。

  • 2、胚胎体外培养系统：常规培养系统、输卵管离体培养系统、与体细胞共培养系统。
  • 3．培养方法：卵子在受精24h后，转移到预先制备好

第2页：胚胎体外培养阶段

1--cell2--cell4--8cell桑椹胚囊胚体外受精体外培养

第3页：家畜体外受精发展现状

家畜体外受精技术发展现状
动物卵裂率囊胚率冷冻后存活率鲜胚移植后的产仔率
牛80%~90%40%~50%80%30%~40%
羊80%~90%30%~40%80%50%
猪90%60%~70%—50%

说明：原页未列出猪胚胎冷冻后的存活率数据，表中以“—”标注。

第4页：体外受精的问题与方向

（二）存在的问题和发展方向

  • 1、存在的问题
  • １）囊胚发育率低，细胞数少。
  • ２）产仔率低，胎儿初生重高。
  • 2、发展的方向
  • １）深入研究卵母细胞成熟和胚胎发育的分子机理；
  • ２）加强腔前卵泡的培养研究，充分利用优良母畜的遗传资源；
  • ３）加强体外受精与其他生物技术的结合。

第5页：辅助受精技术

四、辅助受精技术(assisted fertilization)透明带下注射(Subzonal injection,SUZI)透明带钻孔(Zona drilling, ZD)活精子透明带部分切口(Partial zona dissection, PZD)卵母细胞质内注射

第6页：卵胞质内精子注射

精子显微注射体外受精技术IntracytoplasmicSpermInjection:ICSI

第7页：显微受精技术的应用前景

显微受精技术在动物受精和发育机理研究、畜牧业生产及人医临床实践中有着广阔的应用前景：

  • 精液的利用率可成百万倍的提高，可以使优良种公畜得到最充分的应用；
  • 精子的保存技术将大为简化，将来或许只要精子核物质完整就可以达到受精的目的，这对世界珍稀动物资源的保护将产生深远的影响；

第8页：第三节克隆技术

第三节克隆技术Animal cloning

  • 一、概述
  • 二、胚胎分割
  • 三、单个卵裂球分离培养
  • 四、细胞核移植

第9页：克隆的定义

一、概述“克隆”的定义

  • 动物克隆：是指由一个动物经无性繁殖（asexualreproduction）或孤雌生殖而产生的多个具有与亲本相同遗传信息的同质性后代，包括孤雌激活生殖、卵裂球分离与培养、胚胎分割以及核移植等。
  • 胚胎分割：人为的将早期胚胎分割成两个或几个，

第10页：牛胚胎分割

二、牛胚胎分割

第11页：囊胚的分割

二、囊胚的分割（续）

第12页：卵裂球培养示意图

三、卵裂球培养示意图

第13页：细胞核移植的概念

四、细胞核移植（nuclear transplantation or nucleartransfer，NT，记忆）：核移植（nucleartransplantation or nuclear transfer, NT），也称作细胞核移植，是指将一个核供体通过显微操作方法移植到一个核受体中，组成核质杂合细胞，这种核质杂合细胞也叫作重构胚。

•核供体：①初期胚胎细胞；•②ES细胞；

第14页：

第15页：

第16页：细胞核移植的方法

胚胎细胞核移植体细胞核移植细胞核移植的方法

第17页：动物核移植技术程序

动物核移植技术程序

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