20 第八章 配子与胚胎生物工程9.9.ppt

第1页：挤压法去核

8）、挤压法去核：在PB1附近，将透明带切开，调准切口，固定卵母细胞，使切割针与其成垂直方向，向下挤压除去PB1连同下面的一小部分细胞质。

第2页：点击法去核

9）、点击法去核：在PB1附近，将卵母细胞透明带切开1/3，调准切口，使其与切割针成垂直方向，固定卵母细胞，用显微针点击透明带，除去PB1连同下面的一小部分细胞质。

第3页：激活系统

5、激活系统1）、化学激活⑴7%乙醇：处理时间5～7min⑵离子霉素：4umol/L，5min⑶钙离子载体（A23187）：5umol/L，5min⑷6-DMAP：1.9～2.0mmol/L；

3～5h或更长⑸星形胞菌素：2umol/L；15～30min2）、电激活

第4页：带下注射移核法

3、移核1）、带下注射移核法

第5页：

第6页：细胞融合系统

4、细胞融合系统1）、化学法2）、仙台病毒法3）、电融合法

第7页：

第8页：重构胚的培养

6、核移植重构胚的培养

• 体内培养：用琼脂包埋，移入暂时的中间受体（如羊、兔）的输卵管内，培养4～5d后，然后回收胚胎进行移植。
• 体外培养：重组胚激活后，在现有的胚胎体外培养系统中进行培养。7、继代细胞核移植又叫连续细胞核移植，即将核移植胚胎的卵裂球分开，

第9页：核移植存在的问题

（三）、核移植技术（克隆技术）存在的问题：

• 结果不稳定，效率低（1～6%）；
• 克隆动物怀孕期长、出生体重异常偏大、生后对环境的适应性差；
• 存活率低；
• 细胞质的遗传问题。

第10页：核移植的应用前景

（四）、核移植的应用前景1、扩大优良畜种和稀有动物的数量2、提高转基因动物效率3、核-质间互作关系的研究4、克隆技术的医学价值

第11页：核移植产生的猕猴

核移植产生的弥猴美国俄勒岗州灵长类研究中心通过早期胚胎卵裂球移植入卵母细胞后产生的幼猴。