22 第八章 配子与胚胎生物工程11.11.ppt

第1页：转基因技术的主要问题

四、哺乳动物转基因技术存在的主要问题

• 1、效率低，成本高
• 2、外源基因的随机整合和异常表达
• 3、转基因与动物保护的矛盾
• 4、转基因动物释放及生物安全

第2页：转基因技术的发展趋势

四、哺乳动物转基因技术的发展趋势

• 1、提高效率，降低成本
• 2、加强基因顶点郑和技术研究
• 3、转基因技术的发展将对人类产生深刻的影响

第3页：第五节性别控制

第五节性别控制技术Sex control

• 一、性别控制技术定义和意义
• 二、性别控制技术的发展概况
• 三、哺乳动物的性别控制技术
• 四、性别控制技术的发展前景

第4页：性别控制的定义

一、性别控制的定义和意义（一）定义：指通过对动物正常生殖过程进行人为干预，使成年雌性动物产出人们期望性别后代的一种繁殖新技术。受精之前——通过在体外对精子进行干预，使在受精之前便决定后代的性别。

受精之后——通过对胚胎性别鉴定，从而获得所需性别的后代。

第5页：性别控制的意义

（二）性别控制的意义：1、可使受性别限制的生产性状（如泌乳性状）和受性别影响的生产性状（如肉用,毛用性状等）能获得更大的经济效益。

• 2、可增强良种选种中的强度和提高育种效率,以获得最大的遗传进展。
• 3、对人类来说,通过精子性别的选择,可以避免怀孕一个与X

第6页：性别控制的应用

畜牧业：提高畜牧业生产的效率人类：避免患上与性别相关的遗传疾病

第7页：性别控制发展概况

二、性别控制技术的发展概况

• 1、1906年Stevens和Wilson，以昆虫为研究对象，首先发现精子中X染色体,Y染色体。
• 2、1923年Painter发现人精子中的X染色体,Y染色体。
• 3、1959年Welshons和Jacobs等提出Y染色体决定雄性的理论。
• 4、1966年Jacobs发现雄性性别决定因素位于Y染色体的短臂
• 5、1989年Palmer

第8页：X、Y精子的差异

三、哺乳动物的性别控制技术（一）

• X、Y精子的分离1、
• X、Y精子的差异DNA含量DNA含量的差异是由于性染色体的不同所引起，但因测定方法的不同而引起测定值各异。1968年，Schilling

第9页：X精子与Y精子分离技术

2、X精子与Y精子的分离技术

• 流式细胞分离法：
• 用流式细胞分离法测量DNA的含量能将含X染色体和Y染色体的精子分开，分离后的精子纯度超过90％。此法分离X精子、Y精子的依据是两条性染色体DNA含量不同。哺乳动物的X精子比Y精子一般大2.9％～4.2％，且X精子带的DNA比Y精子多2.8％～7.5％(猪为3.5％、牛为3.9％、羊为4.2％)。

第10页：X、Y染色体DNA含量差异

各种动物X、Y染色体DNA含量差异

第11页：精子分离流程示意图

精子分离流程示意图

第12页：精子分离Chamber

精子分离Chamber

第13页：早期胚胎的性别鉴定

（二）早期胚胎的性别鉴定1、核型分析法：细胞遗传学方法又称为核型分析法。常采用切割胚，一半用于鉴定性别，一半用于冷冻或移植。其基本原理是取一部分细胞，先用秋水仙素处理，再固定染色，检查性染色体，根据人色体中期的谱带差异、Y染色体的大小及形态判断性别，准确绿达100%

第14页：SRY-PCR胚胎性别鉴定

胚胎性别鉴定2、SRY—PCR鉴

第15页：免疫学方法鉴定性别

3、免疫学方法

• 免疫学方法是指利用H-Y抗血清或H-Y单克隆抗体检测胚胎上是否存在雄性特异性H-Y抗原，从而进行胚胎性别鉴定的一种方法。细胞毒性分析法、间接免疫荧光法和囊胚形成抑制法。
• 1、细胞毒性分析法：在补体（豚鼠血清）存在的情况下，H-Y抗体可以与H-Y阳性雄性胚胎结合，使卵裂球溶解，破坏胚胎的发育。
• 2、间接免疫荧光法：间接免疫荧光法是以H-Y

第16页：性别控制的发展前景

四、性别控制技术的发展前景

• 提高精子分离的速度。
• 提高SRY-PCR的灵敏度和可操作性。