首页畜牧兽医畜牧学家畜繁殖学 21 第八章 配子与胚胎生物工程10.10.ppt

21 第八章 配子与胚胎生物工程10.10.ppt

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本课件讲1976年嵌合体小鼠到1980年显微注射法获得转基因小鼠的发展概述,转基因技术的定义与转基因动物概念,在基础生物学、医学与畜牧业中的研究意义,目的基因克隆重组、导入与分子检测的基本程序,以及显微注射、逆转录病毒、胚胎干细胞、精子载体、核移植与生殖细胞转染六种方法。

转基因动物提纲页,分概述、研究意义、主要环节与主要问题四部分展开
转基因技术概述页,讲1976年嵌合体小鼠与1980年显微注射法获得转基因小鼠
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第1页:第四节转基因动物

第四节转基因技术动物Transgenic Animal

  • 一、概述
  • 二、哺乳动物转基因技术的研究意义
  • 三、哺乳动物转基因技术的主要环节
  • 四、哺乳动物转基因技术存在的主要问题

第2页:转基因技术概述

一、概述

  • 1976年Jaenisch等获得含有SV40DNA的嵌合体小鼠。
  • 1980年,Gordon应用显微注射法首次成功地将重组的外源DNA直接注入小鼠受精卵雄原核中,获得了携带外源基因小鼠。
  • 1982,Palmiter将大鼠的生长激素基因用微注射方

第3页:

第4页:表达荧光的转基因鱼

表达荧光的转基因鱼

第5页:转基因技术的定义

转基因技术:通过一定方法把人工重组的外源DNA导入受体动物的基因组中或把受体基因组中的一段DNA切除,从而使受体动物的遗传信息发生人为改变,并且这种改变能稳定地遗传给后代的技术。•通过转基因技术诱导基因组改变的动物称转基因动物(transgenic animal)。

第6页:转基因技术的研究意义

二、哺乳动物转基因技术的研究意义1、在基础生物学中2、在基础医学研究中3、在畜牧业中

第7页:制备转基因动物的程序

三、制备转基因动物的基本程序1、目的基因克隆和体外重组1)人工合成2)互补DNA(cDNA)的克隆3)DNA克隆2、外源基因的导入将目的基因转入→培养→产下后代3、外源DNA整合、转录及表达的分子检测是否是转基因动物

第8页:显微注射法

2、外源基因的导入方法1)显微注射法-微注射法(microinjection)它是创造转基因动物的有效途径。

第9页:逆转录病毒介导法

2)逆转录病毒介导法

第10页:胚胎干细胞法

3)胚胎干细胞法生产转基因动物的流程图

第11页:精子载体法

4)精子载体法意大利Lavitrano等1989年首次报道利用精子作为载体获得了转基因小鼠。

第12页:细胞核移植法

5)细胞核移植法

第13页:生殖细胞转染法

6)生殖细胞转染法

第14页:外源DNA的检测

3、外源DNA整合、转录及表达的分子检测1)外源基因的整合检测2)外源基因的转录检测3)外源基因的表达检测

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