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06 第六章 生物氧化.pptx

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本课件围绕线粒体氧化体系展开,介绍呼吸链各复合体的组成与电子传递顺序、ATP的生成方式、氧化磷酸化的偶联部位与影响因素,并补充微粒体加氧酶等其他氧化体系。

生物氧化封面,本章依次讲解生成ATP的氧化系统、其他氧化体系等内容
生物氧化的概念及特点,[教学时数]3学时[掌握内容]:生物氧化的概念及特点。呼吸链的定义,组成呼吸链的复合体,呼吸链组 分的作用及排列顺序,人体重要的两条呼吸链。氧化磷酸化的概念,氧化磷酸化的偶联部位
最终生成CO2和H2O的过程,脂肪蛋白质CO2和H2OO2 生物氧化的定义物质在生物体内进行氧化称生物氧化,主要指糖、脂肪、蛋白质等在体内分解时逐步释放能量,最终生成CO2和H2O的过程。糖能量ADP+PiATP热能
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第1页:生物氧化

生物氧化

Chapter6生物氧化BiologicalOxidation

第2页:生物氧化的概念及特点

生物氧化的概念及特点
[教学时数]3学时[掌握内容]:生物氧化的概念及特点。呼吸链的定义,组成呼吸链的复合体,呼吸链组 分的作用及排列顺序,人体重要的两条呼吸链。氧化磷酸化的概念,氧化磷酸化的偶联部位,ATP合酶结构和功能。ATP与其他高能化合物,能量与磷酸基的转移。胞液中NADH的氧化。[熟悉内容]:不需氧脱氢酶、需氧脱氢酶和氧化酶。[了解内容]:影响氧化磷酸化的因素。加单氧酶,过氧化物酶体中的氧化酶类,超氧物歧化酶,加双氧酶。[自学内容]:化学渗透假说,线粒体内膜的主要转运载体。MajorObject

第3页:最终生成CO2和H2O的过程

最终生成CO2和H2O的过程
脂肪蛋白质CO2和H2OO2 生物氧化的定义物质在生物体内进行氧化称生物氧化,主要指糖、脂肪、蛋白质等在体内分解时逐步释放能量,最终生成CO2和H2O的过程。糖能量ADP+PiATP热能

第4页:生物氧化的特点1.反应温和

  • 反应温和:37OC、pH接近中性
  • 需酶催化
  • 逐步氧化,逐步放能,可以调节;释放能量的40~55%以高能键储存
  • 生物氧化以脱氢方式为主
  • H2O的生成:代谢物脱下的氢与结合产生CO2来源:有机酸脱羧产生

第5页:糖原三酯酰甘油蛋白质葡萄糖脂酸

糖原三酯酰甘油蛋白质葡萄糖脂酸+甘油氨基酸乙酰CoATACCO22H呼吸链H2OADP+PiATP*生物氧化的一般过程

第6页:氧化磷酸化

氧化磷酸化

呼吸链 氧化磷酸化 影响氧化磷酸化的因素 ATP 通过线粒体内膜的物质转运第一节生成ATP的氧化系统

第7页:代谢物脱下的氢经这一体系传递

代谢物脱下的氢经这一体系传递
-电子传递链(electrontransferchain)(一)定义:线粒体内膜上存在着按一定顺序排列的多种酶和辅酶组成的反应体系。代谢物脱下的氢经这一体系传递,最终与氧结合生成水。由于此过程与细胞呼吸有关,所以称为呼吸链。又称电子传递链。呼吸链中传递氢的酶或辅酶称为递氢体,传递电子的酶或辅酶称为电子传递体,因此呼吸链由递氢体和电子传递体组成。一、呼吸链(respiratorychain)

第8页:用胆酸、脱氧胆酸处理线粒体内膜

用胆酸、脱氧胆酸处理线粒体内膜

1.呼吸链中的复合体:用胆酸、脱氧胆酸处理线粒体内膜,可分离得四种复合体(complex),具传递电子功能。复合体Ⅰ:NADH-泛醌还原酶(内膜)复合体Ⅱ:琥珀酸-泛醌还原酶(内膜的内侧)复合体Ⅲ:泛醌-CytC还原酶复合体Ⅳ:CytC氧化酶(内膜)(内膜)(二)呼吸链的组成泛醌和Cytc不存在于复合体中,它们是可移动电子传递体。

第9页:复合体辅基作用将电子从

复合体辅基作用将电子从NADH传递给泛醌FMN、Fe-S复合体Ⅰ将电子从琥珀酸FAD、Fe-S、Cytb560复合体Ⅱ传递给泛醌将电子从泛醌传递给Cytc将电子从Cytc传递给O2Cytb562、Cytb566Cytc1、Fe-SCyta、Cyta3、2Cu2+复合体Ⅲ复合体Ⅳ四种复合体的组成和作用

第10页:胞液侧基质侧线粒体内膜

胞液侧基质侧线粒体内膜

ⅢⅠⅡⅣNADH+H+延胡索酸NAD+琥珀酸1/2O2+2H+2HO胞液侧基质侧线粒体内膜e-e-Qe-Cytce-e-复合体ⅠNADHFMN,Fe-SN-1a,bFe-SN-4Fe-SN-3bFe-SN-2Q复合体Ⅱ琥珀酸FAD,Fe-S1,Fe-S2,Fe-S3,b560Q复合体ⅢQH2CytCb562,b566,Fe-S,C1CytC复合体ⅣCuAaa3CuBO

第11页:份及作用

份及作用

(1)烟酰胺(尼克酰胺)核苷酸类NAD+(NADP+)简称CoI(CoII)功能基团:烟酰胺可逆性地加氢脱氢大多数脱氢酶以NAD+为辅酶少数脱氢酶以NADP+为辅酶2.呼吸链的组 份及作用:

第12页:传递氢和电子

传递氢和电子

烟酰胺核苷酸的作用原理HH2HeH+作用:传递氢和电子,NAD+(NADP+)可NAD(P)+NAD(P)H+H 2H-2H+RCONH2NHCHHCONH2NR+H+e+H H+接受1个电子和1个氢原子。

第13页:传递两个氢原子

传递两个氢原子

(2)黄素辅基FMN和FAD功能基团:异咯嗪(N1和N10)RN+2H-2HFMN(FAD)HNOH3CH3COHNNHNHFMNH2(FADH2)OH3CH3CONH1N10N作用:递氢体,传递两个氢原子(两个氢FAD/FMNFADH2/FMNH2+2H 2e-2H+-2e质子和两个电子)

第14页:以复合物形式存在

以复合物形式存在

(3)铁硫蛋白(Iron-suffurprotein)FMN(Fe-S)FAD(Fe-S)铁硫蛋白=铁硫中心(Fe-S、铁硫簇)+铁氧还蛋白铁硫簇含有等量的铁原子和硫原子,存在形式:Fe4S4(也有Fe2S2)铁硫蛋白常与黄酶、细胞色素结合在一起,以复合物形式存在:Fe2+Fe3+-e+e CH2SSCH2 SCH2 FeFeFeFeSSSS CH2SFe4S4中心

第15页:单电子传递体

单电子传递体

(a)Fe2-S2(b)Fe4-S4铁硫蛋白的结构作用:单电子传递体,传递e泛醌

第16页:在膜中可流动

在膜中可流动
泛醌的结构:(4)泛醌(ubiquinone,Q)也称为CoQOH3COH3COCH3CH3(CH2CH=CCH2)nHO泛醌的侧链为异戊二烯聚合物,哺乳类有10个,以CoQ10表示。脂溶性,在膜中可流动。不固定于复合体,呈游离状态。

第17页:可传递两个氢质子和两个电子

可传递两个氢质子和两个电子

作用:递氢体,可传递两个氢质子和两个电子。半醌式OO醌式2H+QH3COH3COCH3ROHOH醇式QH2H3COH3COCH3R+2H-2H作用原理:

第18页:细胞色素(30多种)b组

  • 0…c组:c、c
  • c
  • c3…①Cyt的本质细胞色素是一类辅基为铁卟啉的色蛋白细胞色素=酶蛋白+铁卟啉②Cyt的分类a组:a、a
  • a
  • a3…(5)细胞色素(Cytochrome、Cyt)各种细胞色素的主要差别在于铁卟啉辅基的侧链以及铁卟啉与蛋白质部分的连接方式。

第19页:单电子传递体线粒体

单电子传递体线粒体

CytaCytbCytcCyt(线粒体)b560、b562、b566cc1↑单电子传递体线粒体(a、a3、b、c、c1)微粒体(b5、 0)③Cyt的存在部位aa3←细胞色素C氧化酶

第20页:并含铜离子称为细胞色素C氧化酶

并含铜离子称为细胞色素C氧化酶
Cyt-Fe3 2e2Cytaa3-Fe2 1/2O22Cyt-Fe2+2Cytaa3-Fe3 O2-④作用:单电子传递体Cyta3辅基是血红素A,并含铜离子称为细胞色素C氧化酶,可记为Cytaa3直接将e传递给O2氰化物、CO、H2S、N3-可抑制该酶活性水溶性,游离存在Cytc

第21页:Cyt传递电子顺序是

Cyt传递电子顺序是

呼吸链中Cyt传递电子顺序是:b→c1→c→aa3→o2bc1c2Fe2+2Fe3+2Fe2+2Fe3+2Fe3+aa32Fe2+2Fe2+2e2Fe3+1/2O2O2-2H+2HO2e2e2e2e2Cu2+2Cu+2e

第22页:呼吸链的组分及其作用小结

呼吸链的组分及其作用小结(一)尼克酰胺核苷酸类NAD+、NADP+(二)黄素辅基FMN、FAD(三)铁硫蛋白(四)泛醌(辅酶Q)(五)细胞色素 单电子传递体递氢体单电子传递体呼吸链中cyta3可将电子传递给O2,其余则不行

第23页:鉴定四种复合体的组成与排列

鉴定四种复合体的组成与排列

(三)呼吸链成分的排列顺序1.排列顺序确定的根据(1)标准氧化还原电位低 高(2)在体外将呼吸链拆开和重组,鉴定四种复合体的组成与排列。(3)用抑制剂阻断呼吸链方法确定排列顺序抑制剂阻断部位以前为还原态,后为氧化态。(4)根据吸收光谱判定

第24页:琥珀酸

琥珀酸

SH2NAD+–0.32QbC1Caa3O2FADFe S琥珀酸FMNFe S0.070.04–0.06–0.300.820.550.290.250.2

第25页:由复合体ⅠⅢⅣ构成

由复合体ⅠⅢⅣ构成

NADH氧化呼吸链:由复合体Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ构成NADH复合体ⅠQ复合体ⅢCytc复合体ⅣO22琥珀酸氧化呼吸链(FADH2氧化呼吸链):由复合体Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ构成琥珀酸复合体ⅡQ复合体ⅢCytc复合体ⅣO22.两条重要的呼吸链

第26页:两条呼吸链组成不同泛醌是两条呼吸链

两条呼吸链组成不同泛醌是两条呼吸链

NADH氧化呼吸链FADH2氧化呼吸链总结:两条呼吸链组成不同泛醌是两条呼吸链的汇合点偶联部位不同产生ATP的数量不同Cytc

第27页:此能量在ATP合酶催化下

此能量在ATP合酶催化下
二、氧化磷酸化(oxidativephosphorylation)底物水平磷酸化ATP的生成方式氧化磷酸化(最主要)(一)氧化磷酸化定义代谢物脱下的氢经呼吸链传递给氧生成水的同时,释放能量,此能量在ATP合酶催化下,使ADP磷酸化为ATP。这种物质的氧化和ADP磷酸化相偶联的过程称为氧化磷酸化。

第28页:故称之为氧化磷酸化能量偶联

故称之为氧化磷酸化能量偶联

代谢物产物+1/2O2氧化H2O(放能)2HADP+PiATP磷酸化(吸能)在线粒体上二者被偶联,故称之为氧化磷酸化能量偶联FADH2NADH

第29页:氧化磷酸化偶联部位

氧化磷酸化偶联部位

NADHQQCytCCytaa3O2NADH氧化呼吸链(生成3个ATP)(二)氧化磷酸化偶联部位(ATP的生成部位)琥珀酸氧化呼吸链(生成2个ATP)

第30页:物质氧化时

物质氧化时
1.P/O比值定义:物质氧化时,每消耗1mol氧原子所消耗的无机磷的mol数,称为该物质的P/O比值,即生成ATP的mol数。P/O≈1,(>0.5)P/O>1.5,≈2,P/O>2.5,合成1个ATP合成2个ATP合成3个ATP氧化磷酸化偶联部位的确立:

第31页:线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值

线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值:下表列出相关数据。

表6-3 线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值
底物呼吸链的组成物生成ATP数P/O比值
β-羟丁酸NAD+→复合体Ⅰ→Q→复合体Ⅲ→Cyt c→复合体Ⅳ→O232.4~2.8
琥珀酸复合体Ⅱ→Q→复合体Ⅲ→Cyt c→复合体Ⅳ→O221.7
抗坏血酸Cyt c→复合体Ⅳ→O210.88
Cyt c(Fe2+)复合体Ⅳ→O210.61~0.68

原文数值与底物名称交叉排列,表格按教材标准结构还原。

第32页:自由能变化

自由能变化

ATPADP+PiATP中~P:G0 =–30.5KJ/molG0 =–nFE0 =–296.5E0 令上式=–30.5,NADHQQCaa3O2则E0 =0.16E0=0.36E0 =0.21可合成ATPE0 =0.532.自由能变化

第33页:脱氢酶琥珀酸脱氢酶呼吸链全貌

脱氢酶琥珀酸脱氢酶呼吸链全貌

苹果酸脱氢酶异柠檬酸脱氢酶α-酮戊二酸脱氢酶丙酮酸脱氢酶NADHβ-羟丁酸脱氢酶β-羟脂酰CoA脱氢酶FMNFe-SADPATPCytcCytaa3O2ADPATPFADFe-SQCytbCytc1ADPATP3-磷酸甘油脱氢酶脂酰CoA脱氢酶琥珀酸脱氢酶呼吸链全貌

第34页:将H+泵至膜外侧

将H+泵至膜外侧

H+eOH+ADP+PiATP胞液面内膜线粒体基质 电子传递给氧释出的能量推动质子泵 将H+泵至膜外侧,形成化学梯度(势能) 当H+顺梯度回到基质面时,释出的能量使ADP磷酸化为ATP(三)氧化磷酸化偶联机制1.化学渗透假说(chemiosmotichypothesis)

第35页:图6-4复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ具有质子泵作用化

图6-4复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ具有质子泵作用化

FMNH22H+2H+NADH+H+NAD+2H+2H+QH22e-b566b562FeSFes2H+2e-QH221/2O+2H+H2OFeS2e-c1caCua3Cu胞液侧基质侧线粒体内膜 图6-4复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ具有质子泵作用化学渗透假说

第36页:具酶活性亚基有催化部位

具酶活性亚基有催化部位

ATP合酶的结构由F1和F0两部分组成F1:(亲水部分)由33亚基组成,具酶活性亚基有催化部位,但必须与亚基结合才有活性F0:(疏水部分)在膜内,由a1b2c9~12组成,形成质子通道2ATP合酶的功能:催化合成ATP2.ATP合酶(ATPsynthase)

第37页:

第38页:抑制剂抑制电子传递

抑制剂抑制电子传递

(一)抑制剂抑制电子传递,阻断呼吸链琥珀酸FAD(FeS)NAD+FMN(Fe-S)Qbc1caa3O2鱼藤酮异戊巴比妥粉蝶霉素A抗霉素A二巯基丙醇H2SCOCN三.影响氧化磷酸化的因素

第39页:物质氧化可以进行

物质氧化可以进行

、解偶联剂使氧化与磷酸化过程脱离,物质氧化可以进行,但不能合成ATP。例:二硝基苯酚(DNP)3、氧化磷酸化抑制剂这类抑制剂对电子传递及ADP磷酸化均有抑制作用。例: 与F0的OSCP结合,阻止质子从F0→F1,抑制ATP的合成。此时,由于线粒体内膜两侧电化学梯度增高,影响呼吸链质子泵的功能,继而抑制电子传递。

第40页:促进氧化磷酸化

促进氧化磷酸化

ADP:促进氧化磷酸化ADPADPADP底物氧浓度0时间(分)底物线粒体(二)ADP的调节作用(主要)

第41页:促进线粒体的氧化磷酸化

促进线粒体的氧化磷酸化

、促进线粒体的氧化磷酸化,ATP生成2、促进线粒体膜上Na+K+-ATP酶的合成,使ATPADP+Pi总效应:ATP合成,ATP分解也表现为氧耗,产热甲亢:易热,易喘,情绪激动(四)线粒体DNA(mtDNA)突变线粒体DNA突变可影响氧化磷酸化的功能,使ATP生成减少而致病(三)甲状腺激素:

第42页:高能磷酸键

高能磷酸键
(一)高能键和高能化合物高能键:化合物水解时G>21kJ/mol的化学键称为高能键,用“~”表示。高能磷酸键:~P高能硫酯键:~S高能化合物:含有高能键的化合物,如:ATP,GTP等,以高能磷酸键多见。见 表6-4四.ATP

第43页:参与糖异生、蛋白质合成

参与糖异生、蛋白质合成

(二)能量的利用形式和储存形式:肌酸+ATP磷酸肌酸+ADP肌酸激酶·利用形式:ATPATP的转移:ATP+NMPADP+NDPATP+NDPADP+NTPUTP:参与糖原合成CTP:参与磷脂合成GTP:参与糖异生、蛋白质合成·储存形式:磷酸肌酸(主要存在于肌肉、脑组织)结构见 5

第44页:底物水平磷酸化机械能渗透能化学能电能热能

底物水平磷酸化机械能渗透能化学能电能热能

氧化磷酸化~PATP肌酸磷酸肌酸ADP~P底物水平磷酸化机械能渗透能化学能电能热能(三)ATP循环:是生物体内能量转换的最基本方式ATP的合成ATP的利用

第45页:五、通过线粒体内膜的物质转运

五、通过线粒体内膜的物质转运

  • -磷酸甘油穿梭作用1部位脑、骨骼肌2过程
  • 苹果酸-天冬氨酸穿梭作用1部位肝、心肌2过程:五、通过线粒体内膜的物质转运

第46页:磷酸甘油脱氢酶呼吸链

磷酸甘油脱氢酶呼吸链

NADH+H+FADH2NAD+FAD线粒体内膜线粒体外 间隙线粒体基质α-磷酸甘油脱氢酶呼吸链CH2O-Pi磷酸二羟丙酮CH2OHC=OCH2O-PiCH2OHC=OCH2O-Piα-磷酸甘油CH2OHCHOHCH2O-PiCHOH磷酸甘油穿梭α-磷酸甘油脱氢酶CH2OH胞液

第47页:天冬氨酸穿梭

天冬氨酸穿梭

苹果酸 天冬氨酸穿梭NADH+H+草酰乙酸NADH+H+草酰乙酸NAD+苹果酸呼吸链0苹果酸脱氢酶e谷草转氨酶O酸性氨基酸载体0酮戊二酸@酮戊二酸载体胞液线粒体eAspGlu0酮戊二酸O载体AspGlue载体@NAD+苹果酸

第48页:腺苷酸转运蛋白

腺苷酸转运蛋白

ATP,ADP,Pi的转运H2PO4–H2PO4–H+H+ADP3–ADP3–2HOATP4–ATP4–胞液内膜基质磷酸盐转运蛋白腺苷酸转运蛋白(二)腺苷酸转运蛋白

第49页:生物氧化的主要酶类

生物氧化的主要酶类 过氧化物酶体中的酶类 超氧物歧化酶 微粒体中的酶类第二节其他氧化体系

第50页:结合酶辅基

结合酶辅基
O2-2Cu2+H2O2Cu+1O221、定义是一类结合酶,辅基中含铜离子,该酶能+2e-2e+2e2eRH2R催化底物脱氢,以氧为直接受氢体,生成H2O。酶蛋白2、组成:结合酶辅基:Cu2+3、举例:细胞色素C氧化酶、酚氧化酶等2H+(一)氧化酶(oxidase)一、生物氧化主要的酶类

第51页:该酶能使底物脱氢

该酶能使底物脱氢

  • 举例:L-氨基酸脱氢酶、黄嘌呤氧化酶2HRH2FMN/FADH2O2RFMNH2/FADH2O2(二)需氧脱氢酶(aerobicdehydrgenase)
  • 定义是以FMN或FAD为辅基的一类黄素蛋白,又称黄酶。该酶能使底物脱氢,以氧为直接受氢体,生成H2O2。

第52页:蛋白辅因子辅酶

蛋白辅因子辅酶

  • 定义:催化底物脱氢后,不能以O2为直接受氢体,而以NAD+、NADP+、FMN或FAD等辅酶为直接受氢体,然后再将氢经呼吸链传递给氧生成H2O。
  • 组成:结合 蛋白辅因子辅酶:NAD+、NADP+辅基:FMN、FAD

第53页:催化的反应

催化的反应

RH2FMN/FADXH2RFMNH2/FADH2XRH2NAD+(NADP+)XH221ORNADH+H+(NADPH+H+)XH2O22H2H2H2H2H2H12O2H2O3、催化的反应:

第54页:生物氧化的主要酶类酶受氢体辅酶

生物氧化的主要酶类酶受氢体辅酶(辅基)产物不需氧脱氢酶辅酶FMN,FAD终产物H2ONAD+,NADP+需氧脱氢酶O2O2FMN或FAD含CuH2O2H2O氧化酶

第55页:氧化杀菌甲状腺细胞

氧化杀菌甲状腺细胞

二、过氧化物酶体中的酶类R+H2O2RH2+H2O2RO+H2OR+2H2O(一)过氧化氢酶(catalase)辅基:血红素2H2O22H2O+O2H2O2的作用:粒细胞、吞噬细胞:氧化杀菌甲状腺细胞:2I-I酪氨酸碘化甲状腺素2(二)过氧化物酶(perioxidase)辅基:血红素

第56页:三、超氧物歧化酶

三、超氧物歧化酶

(superoxidedismutase,SOD)2O2·+2H+SODH2O2+O2胞液:CuZn-SOD线粒体:Mn-SODSOD是人体防御内、外环境中超氧离子损伤的重要酶。三、超氧物歧化酶

第57页:谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽过氧化物酶

谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽过氧化物酶H2O22G-SH(ROOH)NADP+G-S-S-GH2O(ROH+H2O)NADPH+H+

第58页:使底物羟化

使底物羟化

  • 定义:能催化氧分子中一个氧原子加入底物,使底物羟化,另一个氧原子被还原成水的酶称为加单氧酶。
  • 辅基:Cyt 0(与CO结合后在450nm有特异吸收峰)组织定位:肝、肾
  • 催化的反应:RH+NADPH+H O2→ROH+NADP H2O四、微粒体中的酶类

第59页:甲酰犬尿酸原

甲酰犬尿酸原

(二)加双氧酶(dioxygenase)OC-CCHCOOHH2NH2C-CH2-CHCOOHNH2NHN—CHOH甲酰犬尿酸原[O2]色氨酸

第60页:定义及特点

定义及特点
·生物氧化 定义及特点 呼吸链营养物H2O+CO2+能量O2组成四种 Ⅰ复合体Ⅱ复合体Ⅲ复合体ⅣNADH泛醌还原酶琥珀酸泛醌还原酶泛醌CytC还原酶CytC氧化酶概念存在部位:线粒体内膜组成:按一定顺序排列的递氢体和电子传递体作用:将代谢物脱下的氢传递给氧生成水呼吸链组 分及作用两种可移动电子传递体(泛醌和Cytc)尼克酰胺核苷酸(NAD+、NADP+)黄素辅基类(FMN、FAD)铁硫蛋白(Fe-S)泛醌(Q)细胞色素类(Cyt)

第61页:分、排列顺序

分、排列顺序

  • 呼吸链的概念、呼吸链的复合体及作用、呼吸链组 分及作用、人体重要的两条呼吸链(定义、组 分、排列顺序)。
  • 氧化磷酸化的定义、偶联部位、p/o比值。
  • ATP合酶的结构与功能
  • 能量的利用形式和储存形式、ATP循环
  • 胞液中NADH的氧化
  • 氧化酶、需氧脱氢酶、不需氧脱氢酶及加单氧酶61KeyPoints
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