04 第五章 环境因子对微生物生长和代谢的影响.ppt

第1页：第五章 环境因子对微生物生长和代谢的影响

第五章环境因子对微生物生长和代谢的影响

第2页：环境因子对微生物的影响

• 环境因子对微生物的影响
• 适宜环境：微生物能正常地进行生命活动
• 不适宜环境：微生物的正常生命活动受到抑制或被迫暂时改变原有的一些特征。
• 恶劣环境：微生物死亡或发生遗传变易。

第3页：第一节 环境因子对微生物生长和生存的影响

第一节环境因子对微生物生长和生存的影响一.理化因素对生长的影响（一）温度1、温度对微生物的影响温度通过影响膜的液晶结构、酶和蛋白质的合成及活性、RNA的结构、转录等影响微生物的生命活动。

第4页：

第5页：微生物的生长温度范围

2、微生物的生长温度范围最低生长温度最高生长温度最适生长温度致死温度ACBvT ℃

第6页：微生物的生长温度类型

• 3、微生物的生长温度类型
• 按照最适生长温度范围的不同分类嗜冷微生物嗜温微生物嗜热微生物

第7页：微生物生长的温度类型

微生物生长的温度类型：下表列出相关数据。

注：低温型专性一行的「最高」温度源文件未提取到对应数值，表中以「—」占位，请对照原图核对。

第8页：不同温度下的菌例

不同温度下的菌例

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第9页：嗜冷微生物

• 1、嗜冷微生物（psychrophiles）能在5℃以下生长的微生物称为嗜冷微生物。
• 种类专性：最适温度15℃，最高温度20℃ 兼性：最适温度25~30℃，最高温度35℃左右耐冷微生物psychrotolerant 嗜冷微生物在低温下生长的原因
• 细胞膜含有大量的不饱和脂肪酸，使膜在低温下也能保持半流动状态；
• 细胞的酶在低温下能有效地起催化作用，而在30~40℃的情况下，这些酶很快失活。

第10页：嗜温微生物

• 2、嗜温微生物mesophiles
• 最适生长温度在25~37℃微生物叫嗜温微生物。
• 种类：寄生型（体温型）：最适35~40℃腐生型（室温型）：最适25~35℃。

第11页：嗜热微生物

• 3、嗜热微生物thermophiles
• 嗜热微生物：最适生长温度50~60℃
• 嗜高温微生物：最适生长温度在80℃以上嗜热微生物在高温下生长的原因
• 酶和其他蛋白质中的更具有耐热性；
• 核酸中含有较多的GC对，对热更加稳定；
• 细胞膜中饱和脂肪酸含量高，使膜具有热稳定性；
• 细胞生长速率快，能迅速合成生物大分子，以弥补由于高温造成的破坏。

第12页：嗜高温微生物

• 嗜高温微生物hyperthermophiles已发现的嗜高温微生物全都是古生细菌，它们所处的环境与普通细菌有很大区别。
• 在高温下生长的原因：一般认为它们蛋白质热稳定性与蛋白质上存在的盐桥数目增加（氨基酸带上Na+或其它阳离子生成电荷桥）及蛋白质高度密集的疏水内部区域有关；它们细胞膜中不含脂肪酸，而是由植烷（不同长度碳氢组成的五碳重复单位化合物）组成，这和膜的热稳定性有关。

第13页：最适发酵温度

4、最适发酵温度发酵速率和代谢产物积累速率最大时的温度。

第14页：极端温度对微生物的影响

• 5、极端温度对微生物的影响极端温度extreme temperature低于最低生长温度和高于最高生长温度范围的温度。
• 低温：0℃以上停止生长
• 冷冻：造成微生物细胞脱水及冰晶的机械损伤而引起微生物死亡。
• 高温：菌体蛋白变性，杀死细胞
• 应用：

第15页：微生物对热的忍受

微生物对热的忍受：下表列出相关数据。

注：「孢子」一行的具体微生物类别源文件未标明，表中以「—」占位，请对照原图核对。

第16页：水活度

• （二）水活度water activity
• 定义在相同的温度和压力下，体系中溶液的水蒸汽压与纯水的蒸汽压之比：aw=p/p0
• 水活度的决定因素：
• 固体基质：水被吸附的牢固程度
• 液体：溶质的含量和溶质的水合程度

第17页：一些溶质不同浓度的水活度

一些溶质不同浓度的水活度

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第18页：不同微生物生长的最低水活度

不同微生物生长的最低aw

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第19页：基质水活度对微生物的影响

• 1、基质水活度对微生物的影响
• 高水活度环境
• 低水活度环境2、干燥对微生物的影响干燥使代谢停止，使微生物处于休眠状态，严重时细胞脱水，蛋白质变性，进而导致死亡。
• 应用：保存物品，保藏菌种

第20页：水对一些贮藏霉菌的影响

水对一些贮藏霉菌的影响

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第21页：渗透压对微生物的影响

• 3、渗透压对微生物的影响
• 等渗溶液：微生物正常生长
• 低渗溶液：细胞吸水膨胀，甚至胀破。
• 高渗溶液：细胞脱水，影响代谢活动，引起质壁分离，甚至死亡。

第22页：耐高渗与嗜高渗微生物

耐高渗与嗜高渗微生物生长速度水活度1、正常微生物2、耐高渗微生物3、嗜高渗微生物

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第23页：表面张力

（三）表面张力1、表面张力：液体表面相邻两个部分间单位长度内的相互牵引力。

单位：1N/m=1000dyn/cm水在常温下的表面张力为72 dyn/cm。

一般液体培养基的表面张力为45~65dyn/cm

第24页：表面张力对微生物的影响

• 2、表面张力对微生物的影响
• 低表面张力, 微生物在液体中均匀生长。
• 高表面张力, 微生物在液体表面形成菌膜。3、改变表面张力的方法
• 升高表面张力：添加无机盐
• 降低表面张力：添加表面活性剂

第25页：辐射的类型与作用

• （四）辐射
• 辐射是能量通过空间传播或传递的一种物理现象。
• 辐射的种类：电磁辐射和微粒辐射
• 电磁辐射的种类非电离辐射：红外线、可见光、紫外线等电离辐射：x-射线、γ-射线等。

第26页：辐射光谱的波长范围

辐射光

第27页：可见光的波长与作用

• 可见光
• 波长400-800nm的电磁辐射。
• 光能型微生物的能源
• 长时间照射有杀菌作用红外线
• 波长大于800nm的电磁辐射。
• 红外线可以发热，产生的高温具有杀菌作用。

第28页：紫外线

• 紫外线UV
• 波长为150~390nm的电磁辐射。
• 最佳作用波长为265~266nm。1.作用机理
• 诱发DNA形成T=T、阻碍DNA复制而使微生物发生变易或死亡。
• 使空气中的O2变为O3，后者分解放出的[O]具有杀菌作用。
• 应用：消毒和诱变

第29页：紫外线照射后形成

紫外线照射后形成T-T二聚体

第30页：细胞对紫外损伤的修复作用

2. 细胞对紫外损伤的修复作用光复活作用细胞中的光复活酶吸收可见光的能量而被激活后，将T=T中的共价键解开，使DNA分子恢复正常状态。

光复活过程

第31页：暗修复作用细胞中的一些修复酶在无光的情况

暗修复作用细胞中的一些修复酶在无光的情况下，也能进行有效的DNA修复作用。

作用的酶：DNA内切酶、DNA外切酶、DNA聚合酶和DNA连接酶。

第32页：电离辐射

• 电离辐射
• x射线λ1-10nm，γ射线λ0.1-1nm
• 作用机理：引起环境中或细胞中水的电离而产生的自由基作用于细胞中的敏感大分子，使之电离而失活。H2O H2O++e-OH+H+H2O+ e-H2O-H +OH+

第33页：电离辐射的氧化作用

作用于氧气分子，产生的强氧化性基团，氧化细胞中的蛋白质和酶分子的巯基，而使细胞受到损伤或死亡。

O2+ eO2-O2 + 2eO2=

第34页：pH的定义与常见溶液pH值

• （五）pH
• pH= -lg[H+]一些溶液的pH值

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第35页：环境pH值

• 1、环境pH对微生物的作用
• 改变细胞膜所带电荷状态，从而影响细胞对营养物质的吸收；
• 影响代谢过程中酶的活性；
• 改变环境中营养物质的可给性；
• 改变环境中有害物质的毒性。

第36页：微生物生长的pH范围

不同微生物的生长pH范围：下表列出相关数据。

第37页：微生物的酸碱适应类型

• 3、微生物的类型（按最适生长pH范围来分）
• 嗜酸微生物acidophile专性嗜酸菌：最适pH＜6；pH＞7时生长极差或死亡。兼性嗜酸菌：在低pH下生长，在中性pH也长。
• 嗜碱微生物alkalinophile：专性嗜碱菌：最适pH8~11，pH ≤7时生长极慢或不生长
• 嗜中性微生物neutrophile：能在pH4~9范围内生长，最适生长在pH6~8，大多数微生物属于这一类。

第38页：微生物代谢对环境pH的影响

4、微生物的代谢对环境pH影响

第39页：环境pH的调节

• 5、环境pH的控制
• 直接加酸或碱进行调节；
• 加入酸性或碱性营养物质进行调节和补充营养
• 加入缓冲性物质

第40页：微生物细胞内的pH

• 6、微生物细胞内的pH
• 细胞内部的pH值一般都接近中性
• 胞内酶的最适pH多接近中性
• 细胞内的DNA、ATP等对低pH敏感
• RNA和磷脂类等对高pH敏感。
• 细胞膜上酶及胞外酶最适pH多接近微生物最适生长pH

第41页：微生物最适生长和最适发酵

7、微生物最适生长和最适发酵pH

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第42页：氧化还原电位

(六) 氧化还原电位EhEh 值的测定方法：用一个铂电极与一个标准电极同时插入体系中，从敏感的伏特计上读出电位差值。

1、影响Eh的主要因素：氧分压、环境的pH值2、标准氧化还原电位Eh’：pH=7时测得的Eh值Eh’值的变化范围：+0.82v ~ -0.42v

第43页：Eh的改变方法

• 3、Eh的改变方法
• 降低Eh除氧及向培养基中添加还原性物质：H2S、抗坏血酸、含巯基化合物（半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等）
• 升高Eh通空气或氧及向培养基中添加氧化性物质：Fe(OH)3等

第44页：微生物与氧的关系

4、微生物与氧的关系好氧微生物aerobes专性好氧菌兼性厌氧菌微好氧菌厌氧微生物anaerobes耐氧厌氧菌专性厌氧菌

第45页：专性好氧菌

• （1）专性好氧菌strict aerobes
• 必须在高浓度分子氧(~0.2巴）的条件下才能生长的微生物
• Eh＞+0.1v 可生长，最适在+0.3~+0.4v
• 霉菌、大部分放线菌及部分细菌
• 有完整的呼吸链，分子氧作为最终电子受体，氧参与合成固醇及不饱和脂肪酸；
• 细胞含有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶超氧化物歧化酶: superoxide dismutase SOD过氧化氢酶: catalase

第46页：兼性厌氧菌

• (2) 兼性厌氧菌：facultative anaerobes
• 以在有氧的条件下生长为主，也可兼在厌氧条件下生长的微生物
• Eh＞+0.1v 通过好氧呼吸获取能量Eh＜+0.1v 通过发酵或无氧呼吸获取能量
• 酵母和部分细菌
• 细胞含有SOD和过氧化氢酶

第47页：微好氧菌

（3）微好(嗜)氧菌microaerophilic bacteria只能在较低的氧分压（0.01~0.03巴）下才能正常生长；

也通过有氧呼吸获取能量。

如：霍乱弧菌、氢单胞菌属等

第48页：耐氧厌氧菌

• （4）耐氧厌氧菌：aerotolerant anaerobe
• 可在分子氧存在条件下进行厌氧生活的厌氧菌。
• 生长不需要氧，但分子氧对他们也无害
• 仅依靠发酵或底物水平磷酸化获得能量
• 细胞内有SOD和过氧化物酶，但无过氧化氢酶。如：乳链球菌、乳酸乳杆菌、膜明串珠菌

第49页：厌氧菌

• （5）厌氧菌：anaerobe
• 只能在无氧或低Eh(Eh<+0.1V)值时, 才能生长。
• 分子氧对细胞有毒
• 通过发酵或无氧呼吸等获取能量
• 细胞内缺乏SOD、细胞色素氧化酶、大多数还缺乏过氧化氢酶
• 梭状芽孢杆菌属、双歧杆菌属、产甲烷菌

第50页：微生物与氧的关系类型

微生物与氧的关系：下表列出相关数据。

第51页：厌氧菌的氧毒害机制

厌氧菌的氧毒害机制：超氧化物歧化酶学说2O2+2H+SOD(一切好氧微生物及耐氧菌)H2O2+O2H2O+1/2O22H2O-·过氧化氢酶(一切好氧微生物)过氧化物酶(耐氧菌)NADH2NAD

第52页：第二节 微生物营生环境条件的优化

• 第二节微生物营生环境条件的优化
• 营养物质及其浓度
• 环境条件
• pH值
• 温度
• 溶解氧
• 离子强度
• 二氧化碳分压

第53页：第三节 污染微生物的控制

• 第三节污染微生物的控制一、灭菌与消毒
• 灭菌sterilization采用强烈的理化因素使物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
• 消毒disinfection采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害的措施。

第54页：灭菌和消毒方法

（一）灭菌和消毒方法1、高温灭菌和消毒方法

第55页：干热灭菌法

（1）干热灭菌法dryheatsterilization①灼烧灭菌法适用：接种工具，污染物品，实验动物尸体等。

②干热灭菌法适用：玻璃、陶瓷器皿，金属用具等耐高温的物品。

处理：150~170℃1~2小时电热恒温干燥箱

第56页：湿热灭菌法

（2）湿热灭菌法moistheatsterilization同样温度和相同作用时间下，湿热灭菌比干热灭菌效果好的原因①热蒸汽穿透力强；

②细胞物质在含水量高时容易变性凝固；

③蒸汽凝固时释放的大量蒸汽潜热可迅速提高灭菌物品的温度。

第57页：常压灭菌法

• A.常压法①巴氏消毒法pasteurization
• 是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法。
• 低温维持法lowtemperatureholdingmethod，LTH，牛奶：63℃，30分
• 高温瞬时法hightemperatureshottime，HTST，牛奶：72℃，15秒
• 巴氏消毒单位：在60℃经历1分钟所引起的消毒效应称一个巴氏消毒单位。Pu=Z·1.393(t-60)

第58页：煮沸消毒法

• ②煮沸消毒法：在100℃下煮沸数分钟的方法，常用于饮用水的消毒③间歇灭菌法fractionalsterilization：适用于不耐热培养基的灭菌
• 设备：蒸笼，高压灭菌锅
• 原理：常压蒸汽（100℃）处理杀死营养细胞，残留的芽孢等耐热的孢子体经过夜培养即可萌发，再加热处理杀死之，如此反复处理三次，可达到无菌状态。
• 对象：含有不耐高温的营养物质的培养基或无高压蒸汽灭菌锅时处理一般培养基。
• 方法：80~100℃蒸煮15~60分钟→37℃培养过夜，连续重复三天
• 控制：芽孢杆菌芽孢制剂
• 注意：不含营养物质的物品不宜适用此法。

第59页：加压灭菌法

• B.加压法①高压蒸汽灭菌法（常规加压蒸汽灭菌法）autoclaving：是一种利用高温进行湿热灭菌的方法。
• 设备：高压蒸汽灭菌锅
• 原理：在加压条件下，水的沸点超过100℃，由此可提供高于100℃的水蒸气。
• 对象：耐高温物品，一般培养基，生理盐水，缓冲溶液，玻璃、陶瓷器皿等
• 控制：嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢制剂，热变色纸带②连续加压蒸汽灭菌法continuousautoclaving适用于大型发酵厂的大批培养基灭菌135~140℃下维持5~15秒

第60页：手提式高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器

手提式高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器

第61页：过滤除菌法

• 2、过滤除菌法：
• 用具：过滤器，如硝化纤维素滤膜
• 原理：将微生物过滤去除
• 对象：空气，热敏物质，蛋白质，酶，血清，纤维素，氨基酸等
• 注意：病毒等小于0.2mm的非细胞微生物无法去除

第62页：膜滤装置

膜滤装置

第63页：辐射灭菌

• 3、辐射灭菌（放射线灭菌法）
• 原理：
• 微波、紫外线、g-射线、X-射线的杀菌作用。
• g-射线的穿透力非常强，可对密封包装后的物品进行灭菌。
• 对象：不耐热或受热易变质、变味的物品。

第64页：常用的化学消毒剂

• （二）常用的化学消毒剂消毒剂：能杀死微生物的化学制剂防腐剂：能抑制微生物生命活动的制剂
• 理想消毒剂应具备的条件杀菌力强；适用方便；价格低廉；对人蓄无害；无味无嗅；
• 石炭酸系数phenol coefficient, PC衡量化学消毒剂相对杀菌强度的常数定义：在一定的时间内，被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度与达到同样效果的石炭酸的最高稀释度之比。

第65页：

第66页：影响灭菌和消毒效果的因素

• (三）影响灭菌和消毒效果的因素1、影响高压蒸汽灭菌的因素
• 灭菌物体的含菌量
• 灭菌锅内空气的排除程度

本页为表格内容，源文件未提取到表体数据，请对照原课件图片补充表格。

第67页：灭菌对象的

• 灭菌对象的pH：pH在6.0~8.0时，微生物不易死亡
• 培养基中蛋白质的含量
• 灭菌对象的体积
• 加热与散热速度2、影响化学消毒剂消毒效果的因素
• 消毒对象
• 化学消毒剂的性质及浓度
• 消毒时的环境条件

第68页：高温对培养基成分的有害影响

• （四）高温对培养基成分的有害影响及其防止1、有害影响2、防止法：
• 采用特殊处理方法：分别灭菌；低压灭菌；连续加压蒸汽灭菌
• 过滤除菌法：

第69页：抗生素

二、抗生素antibiotics1、定义：抗生素是一类由微生物或其他生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物，它们在很低浓度时就能抑制或破坏其它微生物的生长。

是一类化学治疗剂。

2、种类与制菌谱

第70页：

第71页：

第72页：发酵工厂的灭菌消毒

三. 发酵工厂的灭菌消毒原料及发酵罐：实罐灭菌法，连续灭菌法管道：蒸汽灭菌法；

化学消毒剂---甲醛、商品化消毒剂空罐：蒸汽灭菌化学消毒剂空气：过滤除菌空气过滤器：蒸汽灭菌，化学消毒剂水：过滤除菌、紫外线杀菌、加氯杀菌等