第1页：第六章抗体
第六章抗体
第2页：抗体（antibody, Ab）
- 抗体（antibody, Ab）
- 是B细胞受抗原激活后，分化成浆细胞,合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。免疫球蛋白（immunoglobulin, Ig）:是指具有抗体活性或化学结构与抗体分子相似的球蛋白。
第3页：免疫球蛋白的存在形式
- 免疫球蛋白的存在形式
- 膜型（membrane immunoglobulin,mIg）---B细胞膜上的抗原受体分泌型(secreted immunoglobulin, sIg)---分泌进入体液,介导体液免疫应答
第4页：第一节免疫球蛋白的结构
第一节免疫球蛋白的结构
- 基本结构
- 重链（heavy chain，H链）轻链（light chain，L链）
第5页：
第6页：（二）可变区
（二）可变区（variable region, V区）恒定区（constant region, C区）
第7页：
第8页：（三）超变区
(三)超变区(hyper-variable region, HVR),又称互补决定区(complementarydetermining region, CDR）骨架区（framework region, FR）
第9页：
第10页：（四）铰链区
（四）铰链区（hinge region）
第11页：
第12页：二、功能区（domain）轻链:VL
- 二、功能区（domain）轻链
- VL，CL重链:VH，CH1，CH2，CH3(IgG、IgA和IgD)多一个CH4（IgM和IgE）
第13页：
第14页：功能区的主要功能
- 功能区的主要功能
- VH和VL---抗原结合部位；CH1～3和CL---Ig遗传标志所在；CH2(IgG)、CH3(IgM)---C1q结合部位；CH2-CH3(IgG)---结合并通过胎盘；CH3 (IgG)---FcγR结合部位；CH4(IgE)---FcεR结合部位。
第15页：三、水解片段木瓜蛋白酶（Papain）
- 三、水解片段木瓜蛋白酶（Papain）
- →IgGFab段（fragment of antigen-binding,抗原结合片段）Fc段（fragment crystalizable,可结晶片段）
第16页：胃蛋白酶
- 胃蛋白酶（Pepsin）
- →IgGF(ab′)2pFc ′
第17页：
第18页：四、其它成分
- 其它成分
- 连接链（joining chain，J链)：IgM---J链连接5个单体SIgA---J链连接2个单体
- 分泌片（secretory piece, SP）又称分泌成分（secretorycomponent, SC）：---分泌型IgA的成分
第19页：
第20页：
第21页：第二节免疫球蛋白的类型双重特性
- 第二节免疫球蛋白的类型双重特性
- 抗体活性免疫原性（抗原物质）
第22页：一、同种型（isotype）
- 同种型（isotype）
- 类和亚类（根据H链的抗原性不同）五类：IgG---γ(gamma)IgA---α(alpha)IgM---μ(mu)IgD---δ(delta)IgE---ε(epsilon)
第23页：
第24页：亚类：IgG：IgG1, IgG2
- 亚类
- IgG：IgG1, IgG2, IgG3, IgG4IgA：IgA1, IgA2IgM: IgM1, IgM2
第25页：2.型和亚型(根据轻链C区抗原特异性不同
- 2.型和亚型(根据轻链C区抗原特异性不同分型)
- κ(kappa)型λ(lambda)型亚型(λ链)：OZ(+) (或λ1 )：第190位(亮氨酸)OZ(-) (或λ2)：第190位(精氨酸)Kern(+)(或λ3)：第154位(甘氨酸)Kern(-)(或λ4)：第154位(丝氨酸)
第26页：二、同种异型（allotype）CH
二、同种异型（allotype）CH和CL上的一个或数个氨基酸残基的差异---遗传标志(genetic markers)Gm因子：Gm1～30Am因子：A2m1，A2m2Km因子：Km1，Km2，Km3
第27页：三、独特型（idiotype）指在同一个
- 独特型（idiotype）指在同一个体内，不同B细胞克隆所产生的免疫球蛋白分子V区以及
- B细胞表面抗原受体V区所具有的抗原特异性不同。
第28页：
第29页：第三节免疫球蛋白的基因结构
第三节免疫球蛋白的基因结构及其表达一.免疫球蛋白的基因库H基因库（重链基因连锁群）：---第14号染色体κ基因库（κ链基因连锁群）：---第2号染色体λ基因库（λ链基因连锁群）：---第22号染色体
第30页：二. Ig的基因结构及其重排和表达κ链
- 二. Ig的基因结构及其重排和表达κ链
- Vκ(100个)Jκ(5个)Cκ(1个)→C区λ链：Vλ(30个)Jλ-Cλ(4个)→V区
第31页：H链：V基因(约95个)D基因
- H链
- V基因(约95个)D基因(27个)J基因(6个)C基因(9个)→C区→V区
第32页：
第33页：
第34页：三. Ig的类别转换
三. Ig的类别转换（class switching）一个B细胞克隆在分化过程中V-D-J功能性基因片段保持不变，而发生C基因重排，使其表达的抗体分子发生H链类的改变，称为类别转换。B细胞克隆→IgM→IgGIFN-γIL-4IgE
第35页：第四节抗体的功能
第四节抗体的功能
- V区的功能-----识别并特异性结合抗原。抗体分子：单体（IgG, IgE)---2价二聚体(分泌型IgA)---4价五聚体(IgM)---5价实际意义
- 与Ag结合---促吞噬细胞吞噬
第36页：二、C区的功能
- C区的功能
- 激活补体系统Ab(Ig
- IgG) + Ag→C1q→补体经典途径。IgG4、IgA和IgE的凝聚物→补体旁路途径。
第37页：2.介导免疫细胞活性(1).调理作用
2.介导免疫细胞活性(1).调理作用（opsonization）：IgG +抗原(颗粒性)→FcγR（单核细胞、巨噬细胞及中性粒细胞）→促吞噬细胞吞噬(2).ADCC：IgG +抗原(靶细胞)→FcγR（NK细胞）→杀伤靶细胞(3).介导超敏反应：Ⅰ型,Ⅱ型和Ⅲ型超敏反应
第38页：
第39页：第五节各类免疫球蛋白的特性和功能
第五节各类免疫球蛋白的特性和功能
- 一、IgG一般特性
- 单体分子;四个亚类；血清中含量最高(75%Ig)；半衰期最长(21-23天)；3～5岁达成人水平(8.0-17 mg/ml)；可与SPA结合
第40页：生物学活性
- 生物学活性
- 通过胎盘（新生儿抗感染）；激活补体（裂解细胞）；调理作用（促进吞噬）；介导ADCC（细胞毒作用）。
第41页：实际意义
实际意义
- 抗感染
- 自身抗体→自身免疫病
- 介导变态反应(I, II, III型)
- 封闭抗体→肿瘤细胞逃逸
- 亲合层析法---IgG纯化
- 免疫学检测
第42页：穿过胎盘和粘膜IgG
穿过胎盘和粘膜IgG(母体)→胎盘→胎儿和新生儿→抗感染免疫分泌型IgA→粘膜→局部免疫
第43页：二、IgM
- IgM1．五聚体，分子量最大(900 kd),又称巨球蛋白；
- 人类发育过程中最早合成的Ig；
- 体液免疫应答最先产生的Ig-----感染早期免疫；
- 半衰期: 5天-----血清中特异性IgM水平增高提示有近期感染。
第44页：5.激活补体
- 激活补体；
- IgM不能通过胎盘→脐带血或新生儿血清中IgM水平升高表明胎儿有宫内感染；
- B细胞膜IgM(mIgM)→体液免疫应答；
- 自身抗体→自身免疫病，如；类风湿因子。
- 0.1M 2-巯基乙醇(2-ME)处理后失活。
第45页：三、IgA
- IgA1.两种类型：血清型---IgA1(主要)，单体(主要)；分泌型---IgA2(主要)，二聚体(主要),粘膜局部浆细胞合成；分泌片由粘膜上皮胞合成；
- 粘膜局部抗感染免疫
- 聚合IgA激活补体替代途径。
第46页：四、IgD
- IgD1.单体分子；
- 存在形式：分泌性---血清中，功能不清；膜结合性---B细胞表面,
- 抗原受体。
第47页：五、IgE
- IgE1.血清中含量最低(占Ig的0.002%)；
- 呼吸道和胃肠道浆细胞产生；
- 介导I型超敏反应；
- 过敏性疾病和某些寄生虫感染患者血清中特异性IgE水平增高。
第48页：第六节单克隆抗体和基因工程抗体
第六节单克隆抗体和基因工程抗体
一、多克隆抗体（polyclonalantibody）：指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。如:免疫血清（含多种特异性抗体）
第49页：实际意义
实际意义
- 预防、治疗感染性疾病，如：破伤风抗毒素血清→抗破伤风，胎盘球蛋白→抗病毒感染等，副作用：→超敏反应。
- 临床诊断，如：肥达氏反应---伤寒、副伤寒，缺点：特异性差。
第50页：二、单克隆抗体（monoclonal
二、单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb）由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。特点：具有高度均一性。杂交瘤细胞：骨髓瘤细胞---无限增殖；免疫B细胞---合成、分泌特异性抗体。杂交瘤技术---HAT培养基：次黄嘌(H),氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)。
第51页：
第52页：
第53页：实际意义
实际意义
- 抗原的纯化和结构分析；
- 细胞发生、分化及功能的阐明；
- 临床疾病的诊断和治疗，如：免疫分子检测；免疫导向药物治疗恶性肿瘤---McAb抗癌药物(毒素或放射核素偶联)。
第54页：三、基因工程抗体（genetic
三、基因工程抗体（genetic engineeringantibody）在DNA水平对Ig基因进行切割、拼接或修饰，导入受体细胞表达的抗体。如：人-鼠嵌合抗体(chimeric antibody)改型抗体(reshapedhumanized antibody)小分子抗体：Fab片段Fc片段Fv片段双特异性抗体(bispecific antibody)：如：Ig-融合蛋白，抗体导向酶等。
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