第1页：第八章 脂类的测定
Chapter 8. Determination of lipids（第八章 脂类的测定）
第2页：第一节 概述
Section 1. General（第一节 概述）
第3页：食品中的脂类
1. Lipids in foods
- Lipids（脂类）
- Lipids are usually defined as food components that are insoluble in water and that are soluble in organic fat solvents.（不溶于水、溶于有机溶剂的食品组分）
- fats（脂肪）
- Fatlike substances（类脂物质）
第4页：食品中脂类的含量分布
Lipids amounts in foods
- Corn foods（谷物类食品）
- Dairy foods（乳制品）
- Plant or animal lipid（植物或动物油脂）
- Vegetables and fruits（蔬菜与水果）
- Legume（豆类）
- Meat, fish, egg（肉、鱼、蛋）
第5页：测定脂类的意义
2. Significance of determining lipids
- Carrying odors and flavors and their contribution to the palatability of meats, the tenderness of baked products, and the richness and texture of ice cream.（携带香气与风味，改善肉的适口性、焙烤制品的柔软度与冰淇淋的口感质构）
- Affording energy.（供给能量）
- Providing essential fatty acids and fat-soluble vitamins.（提供必需脂肪酸与脂溶性维生素）
第6页：脂类的存在形式与提取溶剂
3. Determination of lipids
- Lipids forms in foods: free and compounds（存在形式：游离态与结合态）
- Sparing solubility in water and considerable solubility in organic solvents（难溶于水、易溶于有机溶剂）
- Organic solvents: ethyl ether（乙醚）、petroleum ether（石油醚）、chloroform-methanol（氯仿-甲醇）
第7页：脂类测定的样品预处理
Pretreatment of samples
- Grinding: the extraction of dry materials depends on particle size.（粉碎：干样提取效果取决于粒度）
- Drying: only part of the lipids can be extracted with ether from moist material, as the solvent cannot penetrate the tissues and the extractant becomes saturated with water.（干燥：潮湿样品中溶剂难以渗入组织且被水饱和，只能提取部分脂类）
第8页：脂类的测定方法
Determination methods
- Soxhlet extraction method（索氏抽提法）
- Chloroform-methanol method（氯仿-甲醇法）
- Acid hydrolyzed method（酸水解法）
- Rose-Gottlieb method, Babcock method, Gerber method（罗斯-哥特里法、巴布科克法、盖勃法）
第9页：第二节 脂类的测定方法
Section 2. Determination methods of lipids（第二节 脂类的测定方法）
第10页：索氏抽提法的原理
1. Soxhlet extraction method
- Direct extraction of lipids is often carried out in a Soxhlet.（脂类的直接提取常在索氏抽提器中完成）
- The sample in an extraction thimble (filter paper), covered with defatted cotton wool, is placed in the middle part of the apparatus.（样品置于滤纸筒中，上覆脱脂棉）
- The flask is filled with solvent, the condenser attached, and heating started.（烧瓶加溶剂、接冷凝管并开始加热）
第11页：索氏抽提的虹吸与称重
- The condensing vapors fill the middle part and carry the dissolved lipid into the flask by siphoning action.（冷凝蒸汽充满中部，借虹吸作用将脂类带入烧瓶）
- At the end of exhaustive extraction, the solvent from the tared flask is evaporated, and the weight increase is calculated.（提取完全后蒸干溶剂，计算增重）
第12页：索氏提取器装置图
第13页：索氏提取器的部件
第14页：索氏抽提法的适用范围
Applying area and speciality
- The result is crude lipid.（结果为粗脂肪）
- The extractions of ethyl ether and petroleum ether are free-lipid, not conjoint-lipid.（乙醚与石油醚提取的是游离脂类，非结合脂类）
第15页：索氏抽提的测定步骤
Determining procedures
- 1. Preparation of filter paper package（滤纸包的准备）
- 2. Treatment of sample（样品处理）
- 3. Extraction（提取）
- 4. Weigh（称重）
第16页：索氏抽提的注意事项
Notice
- No water in sample.（样品中不得含水）
- Filter paper package should be no leaking of sample.（滤纸包不得漏样）
- Extraction temperature.（提取温度）
- Safety.（安全）
第17页：脂肪自动测定仪的原理
脂肪自动测定仪
原理：样品首先浸泡在沸腾的溶剂中，提取出大部分的脂肪 → 再把样品提出至溶剂液面上，用溶剂淋洗，提取样品中残余的脂肪 → 除去溶剂，将抽提杯烘干称重。
第18页：自动脂肪测定仪
Auto-analyzer of lipids（脂肪自动测定仪）
第19页：自动脂肪测定仪的系统
- 该系统由一套浸提单元和一套控制单元组成；预先称重的样品放入浸提杯，溶剂加入密闭系统后由电子加热板加热
- 浸提程序包括浸提、淋洗、溶剂回收及干燥四个步骤
- HHT-2055 主要用于烟草中石油醚提取物的测定，也可用于食品、饲料、环境、工业等领域
- 可适用全部用于浸提的溶剂，溶剂回收率可达 90%；可用于 GC/HPLC 的样品制备，精度可达传统索氏提取装置水平（1% 或更高）
第20页：VELP 全自动脂肪测定仪
意大利 VELP 全自动脂肪测定仪
第21页：脂肪测定仪的仪器构造
第22页：氯仿-甲醇法的原理
2. Chloroform-methanol method
- The sample is homogenized with a mixture of chloroform and methanol in such proportions that a miscible system is formed with the water in the sample.（样品与氯仿-甲醇混合液匀浆，与样品中的水形成混溶体系）
- Dilution with chloroform and water separates the homogenate into two layers: the chloroform layer containing all the lipids and the methanol layer containing all the nonlipids.（再用氯仿与水稀释分相）
- A purified extract is obtained by isolating the chloroform layer.（分离氯仿层得到纯化提取物）
第23页：氯仿-甲醇法的适用范围
Applying area：conjoint lipids, especially samples containing much phospholipids, such as animal tissue, fish muscle, poultry, egg, soybean（结合脂类，特别是含磷脂较多的样品）
第24页：酸水解法
3. Acid hydrolysis method
- Principle: the sample is hydrolyzed using HCl, and lipids in conjoint-compounds or stored in tissues are freed; then free lipids are extracted using ethyl ether or petroleum ether.（盐酸水解释放结合态脂类后用乙醚或石油醚提取）
- Applying: those samples which can not be determined by Soxhlet extraction; not fit sugar-rich sample.（适用于索氏抽提法难以测定的样品，不适用于高糖样品）
- The results contain lipids of free and conjoint.（结果包含游离脂类与结合脂类）
第25页：牛乳中脂类的测定
4. Determination of lipids in milk
- In milk, fat globules are present as an emulsion of oil in water and are surrounded by a thin protein film.（脂肪球以水包油乳浊液形式存在，外裹蛋白膜）
- The emulsion must be broken and the protein film removed before the fat can be separated and determined volumetrically.（须先破乳并除去蛋白膜后再分离测定）
第26页：巴布科克法
4.1 Babcock method
- Milk is mixed with sulfuric acid in a special bottle, shaken till apparently homogeneous, centrifuged, and submerged into water at 63℃.（牛乳与硫酸混匀、离心后置于 63℃ 水中）
- The rising fat is determined from the height formed in a graduated neck.（从刻度颈部读取脂肪层高度）
第27页：盖勃法
4.2 Gerber method
- 11 ml of milk followed by 1 ml isoamyl alcohol are added to a Gerber glass butyrometer containing 10 ml sulfuric acid.
- A lock stopper is inserted and the bottle is shaken until the curd disappears.（加塞摇动至凝块消失）
- The butyrometer is centrifuged 4 min, submerged to top of graduate stem in water at 63℃ for 5 min, and the fat content is read off.（离心 4 分钟，63℃ 水浴 5 分钟后读数）
第28页：盖勃法的特点
- The Gerber test is simpler and of wider general application than the Babcock test.（比巴布科克法简便、适用面更广）
- Charring is generally avoided by the ratio of milk to sulfuric acid.（控制牛乳与硫酸比例可避免炭化）
- Isoamyl alcohol improves the fat separation and reduces the effects of sulfuric acid.（异戊醇改善脂肪分离并减轻硫酸作用）
第29页：罗斯-哥特里法
4.3 Rose-Gottlieb method
- The sample is rendered alkaline with ammonium hydroxide.（加氢氧化铵使样品呈碱性）
- The digested mixture is extracted repeatedly with ethanol, ether, and petroleum ether.（用乙醇、乙醚与石油醚反复提取）
- The combined extracts are dried, purified by extraction with petroleum ether, and weighed.（合并提取液干燥、用石油醚纯化后称重）
