页数：57页文件大小：5.24 MB来源： 发酵工艺学ppt课件
本课件聚焦发酵工业的起点——菌种。先介绍细菌、放线菌、霉菌、酵母及噬菌体的特性与工业用途，再系统讲解自然选育的采样、增殖培养、纯种分离与筛选流程，进而展开诱变育种、原生质体融合和DNA重组等改良手段，最后说明菌种衰退复壮、保藏方法与种子扩大培养工艺。
第一章 菌种选育 第一节 工业常用微生物及要求
一、常见微生物（一）细菌（bacteria）
（二）放线菌（actinomyces）：最大的经济价值在于产生多种抗生素（antibiotic）。
（三）霉菌（mould）
（四）酵母（yeast）
（五）其它微生物
本页以照片形式展示几种常见工业微生物在平板上的菌落形态，建议对照原图补充各菌落的形状、颜色与边缘特征描述。
（六）噬菌体（phage）
噬菌体的增殖过程依次为：
二、微生物工业对菌种的要求
第二节 工业微生物菌种的选育 一、自然选育
3. 纯种分离
固体培养基四区划法接种法：本页起连续展示十步操作，通过分区划线逐步稀释菌量，最终在第四区获得单菌落。
步骤一：接种针先以火焰灭菌法灭菌。
步骤二：轻触营养平板上无菌的琼脂处冷却。
步骤三：以接种针轻触菌落，使接种针上沾有细菌。
步骤四：更换一个新的无菌营养平板。
步骤五：将接种针上的细菌划于一个新的营养平板上，此为第一菌区。
步骤六：重复第一步骤，将接种针以火焰灭菌法灭菌，然后轻触琼脂无菌处冷却。
步骤七：由第五步骤的第一区中划出第二区。
步骤八：重复第六以及第七步骤，由第七步骤的第二区中划出第三区。
步骤九：重复第六以及第七步骤，由第八步骤的第三区中划出第四区，划满剩下的空间，至此完成整个营养平板的划线。
步骤十：在营养平板上贴好标签，标示好接种日期、操作者姓名、菌种学名以及培养基名称。
固体培养基的稀释涂抹接种法：本页起连续展示该方法的操作步骤，通过十倍梯度稀释后取菌液涂布平板，用于分离与计数。
本页展示稀释涂抹接种需要使用的仪器——震荡机，用于将试管中的菌液混合均匀。
吸取准备好欲稀释的菌液。
吸取充分均匀后的菌液。
取含有 9mL 无菌水之试管，将试管口过火灭菌。将菌液置入，此时试管须做记号为第一次稀释。
将试管于震荡机上，使菌液混合均匀。
取出试管中的第一次十倍稀释菌液 1mL，加入另一个新的含 9mL 无菌水的试管中。重复此步骤直至所需要的稀释浓度。
从最后稀释菌液中吸取 0.1mL 菌液，置入准备好的无菌琼脂内。
将三角玻璃棒浸于酒精中。
将三角玻璃棒在火焰上燃烧（须注意勿使燃烧中的酒精滴入酒精瓶中，引起燃烧）。
使用玻璃棒将菌液均匀涂布开来，将培养皿置于恒温培养箱中隔天观察菌落数目，再依照稀释倍数推算出菌液浓度。
4. 生产性能的测定：一般采用两步法。
二、诱变育种：用各种物理、化学的因素人工诱发基因突变。
诱变育种的主要环节
第三节 生产菌种的改良 一、原生质体融合（protoplast fusion）
二、DNA 重组技术（DNA recombination technology）
第四节 菌种的衰退、复壮与保藏 一、菌种的衰退
衰退的原因：
二、菌种的复壮
三、菌种保藏
第五节 种子的扩大培养 一、微生物的培养方法
二、菌种的扩大培养
菌种扩大培养的目的：为每次发酵罐的投料提供相当数量的代谢旺盛的种子。
（一）种子制备的工艺流程
（二）斜面菌种的培养
培养基特点：原料较精细。
（三）一级种子培养（摇瓶）
培养基特点：使用的原料基本接近于发酵培养基。
（四）二级种子培养（种子罐）
培养基的特点：和一级种子相似，其中葡萄糖用水解糖代替，更接近于发酵培养基。
大量地接入培养成熟菌种的优点：
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