首页生物学生物工程发酵工艺学 04 第三章 培养基灭菌与空气净化.ppt

04 第三章 培养基灭菌与空气净化.ppt

页数:42页文件大小:6.51 MB来源: 发酵工艺学ppt课件

本课件讲解发酵无菌保障的两大环节。培养基部分区分消毒与灭菌概念,说明化学试剂、射线、干热、湿热、过滤与火焰六类除菌方法,比较间歇灭菌与连续灭菌的设备流程及优缺点;空气净化部分介绍辐射、热杀菌、静电与过滤四类除菌方法,剖析深层介质过滤的拦截机理,并给出从高空取气、压缩冷却、除油除水到加热过滤的完整无菌空气制备流程。

第三章培养基灭菌与空气净化开篇页,提出消毒与灭菌两个概念的区别这一核心问题
消毒与灭菌的概念辨析,消毒只杀死营养细胞而灭菌可除去包括芽孢和孢子在内的所有微生物
关于灭菌和消毒的选择题练习页,考查灭菌概念界定与常用灭菌方法的识记
查看本课件的文字版(共 42 页,供检索与复制)

第1页:灭菌的原理和方法

第三章 培养基灭菌与空气净化 第一节 培养基灭菌 一、灭菌的原理和方法

消毒(disinfection)与灭菌(sterilization)的区别?

第2页:消毒与灭菌的区别

消毒
用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物,一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。例如巴氏消毒法,将物料加热至 60℃ 维持 30min,以杀死不耐高温的微生物营养细胞。
灭菌
用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物,包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。消毒不一定能达到灭菌要求,而灭菌则可达到消毒的目的。

第3页:灭菌与消毒选择题

关于灭菌和消毒的不正确的理解是( )

  • A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
  • B.消毒和灭菌实质上是相同的
  • C.接种环用灼烧法灭菌
  • D.常用灭菌的方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法

第4页:防腐的概念与措施

防腐(antisepsis)
利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖,从而达到防止食品等发生霉腐的措施。
  1. 低温
  2. 缺氧
  3. 干燥
  4. 高渗
  5. 高酸度
  6. 防腐剂

第5页:除菌的方法

除菌的方法

  • 培养基的加热灭菌
  • 空气的过滤除菌
  • 紫外线或电离辐射
  • 化学药物灭菌

第6页:六种常用灭菌方法

常用灭菌方法的条件与适用范围
灭菌方法条件/介质适用范围
1. 化学试剂灭菌法甲醛、乙醇或新洁尔灭、高锰酸钾等环境、皮肤及器械的表面消毒
2. 射线灭菌法电磁波、紫外线或放射性物质无菌室、接种箱
3. 干热灭菌法常用烘箱,160℃ 下保温 1h金属或玻璃器皿
4. 湿热灭菌法利用饱和蒸汽灭菌,121℃,30min生产设备及培养基灭菌
5. 过滤除菌法利用过滤方法阻留微生物制备无菌空气
6. 火焰灭菌法火焰接种针、玻璃棒、三角瓶口

第7页:培养液灭菌方法选择题

谷氨酸棒状杆菌的培养液常采用的灭菌方法是( )

  • A.高压蒸汽灭菌
  • B.高温灭菌
  • C.加入抗生素灭菌
  • D.酒精灭菌

第8页:培养基的湿热灭菌

二、培养基的湿热灭菌

湿热灭菌原理
蒸汽具有很强的穿透能力,而且在冷凝时会放出大量的冷凝热,很容易使蛋白质凝固而杀死各种微生物。
灭菌条件
121℃,30min
灭菌不利方面
同时会破坏培养基中的营养成分,甚至产生不利于菌体生长的物质。

第9页:间歇灭菌

(一)间歇灭菌(常用)

将配制好的培养基同时放在发酵罐或其他装置中,通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程,也称实罐灭菌。

第10页:间歇灭菌的温度变化

培养基间歇灭菌过程中的温度变化情况:过程包括升温、保温和冷却三阶段。

间歇灭菌各阶段对灭菌的贡献
阶段对灭菌的贡献
升温20%
保温75%
冷却5%

第11页:连续灭菌

(二)连续灭菌(又称连消)

将培养基在发酵罐外通过连续灭菌装置进行加热、保温和冷却而进行灭菌。

  1. 发酵罐、蒸汽、蒸汽、冷却水、无菌培养基
  2. 配料罐 → 泵 → 加热塔 → 维持罐 → 冷却管

问题:连续灭菌的基本设备有哪些?

第12页:连续灭菌的设备(一)

连续灭菌的流程与设备

  1. 配料预热罐,将配制好的料液预热到 60~70 ℃,以免连续灭菌时由于料液与蒸汽温度相差过大而产生水汽撞击声;
  2. 连消塔,用高温蒸汽使料液温度很快升高到灭菌温度(126~132℃);

第13页:连续灭菌的设备(二)

  1. 维持罐,使料液在灭菌温度下保持 5~7min。因为连消塔加热的时间很短,光靠这段时间的灭菌是不够的;
  2. 冷却管,使料液冷却到 40~50℃ 后(冷水喷淋),输送到预先灭菌过的罐内。

第14页:连续灭菌的温度变化

本页以曲线图展示连续灭菌过程中温度的变化(虚线),建议对照原图补充升温、保温与降温各段的温度与时间参数。

第15页:间歇灭菌与连续灭菌的比较

(三)间歇灭菌与连续灭菌的比较

连续灭菌与间歇灭菌的优缺点比较
方式优点缺点
连续灭菌1. 高温短时灭菌,培养基营养成分损失少;2. 发酵罐占用时间缩短,利用率高1. 设备复杂,操作麻烦,染菌机会多;2. 不适合含大量固体物料的灭菌
间歇灭菌1. 设备要求低,不需另外加热、冷却装置;2. 操作要求低,适合小批量生产规模;3. 适合含大量固体物料的灭菌1. 培养基的营养物质损失大,灭菌后培养基质量下降;2. 发酵罐的利用率较低;3. 不适合大规模生产的灭菌

第16页:罐头食品保藏选择题

罐头食品在很长时间内不会腐败变质,是因为( )。

  • A.罐头密封很严,细菌无法侵入
  • B.罐头密封很严,细菌无法呼吸
  • C.罐头在封罐前经过高温高压灭菌,封罐后罐内没有细菌
  • D.罐头在封罐前经过高温高压灭菌,封罐后罐内细菌无法生存

第17页:发酵对空气无菌程度的要求

第二节 空气净化(除菌)

发酵对空气无菌程度的要求:一般要求 1000 次使用周期中只允许有一个菌通过,即经过滤后空气的无菌程度为 N = 10-3。

第18页:空气中微生物的含量

  • 空气中微生物(包括细菌、酵母、霉菌和病毒)含量一般为 103~104 个/m3,一般附着在空气中的灰尘上或雾滴上。
  • 灰尘粒子的平均大小约 0.6 μm 左右,空气除菌主要去除空气中的微粒(0.6~1 μm)。

第19页:空气除菌的方法

一、空气除菌的方法

  1. 辐射杀菌
  2. 热杀菌
  3. 静电除菌
  4. 过滤除菌

第20页:过滤除菌的种类

二、空气过滤除菌的原理与介质 1. 过滤除菌的种类

绝对过滤
过滤介质的滤孔小于细胞和孢子,如聚乙烯醇缩甲醛树脂(PVF)制成的 0.3 μm 的微孔滤膜。
深层介质过滤
介质的孔隙一般大于微生物细胞,如用棉花、玻璃纤维和颗粒活性炭填充的过滤器。

第21页:深层介质过滤的原理

2. 深层介质过滤的原理

微粒随气流通过滤层时,由于滤层纤维的层层阻碍,使气流出现无数次改变运动速度和方向的绕流运动,引起微粒与滤层纤维间产生惯性冲击、拦截、布朗扩散、重力沉降、静电引力等作用把微粒滞留在纤维表面上,实现过滤的目的。

第22页:纤维状或颗粒状过滤介质

3. 空气过滤除菌介质(1)纤维状或颗粒状过滤介质

  • 棉花:常用,有弹性,纤维长度适中。
  • 玻璃纤维:直径小,不易折断,过滤效果好。
  • 活性炭:要求质地坚硬,颗粒均匀。

缺点:体积大,装填费时费力,松紧度不易掌握,空气压降大。

第23页:纸类过滤介质

(2)纸类过滤介质——超细玻璃纤维纸

3~6 张叠在一起使用,过滤效率高,压降小。缺点:强度不大(特别是受潮后)。

第24页:无菌空气的制备流程

发酵生产中制备无菌空气的大致过程:空气 → 空压机 → 贮气罐 → 冷却 → 除油水 → 加热(空气预处理)→ 总过滤器 → 分过滤器 → 无菌空气。

第25页:空气预处理的目的

三、空气的预处理目的:

  • 提高压缩前空气的洁净度
  • 去除压缩后空气中的油和水

第26页:提高压缩前空气的洁净度

1. 提高压缩前空气的洁净度

  1. 提高空气吸气口的位置
  2. 在空气入口处设置粗过滤器——捕集较大的灰尘颗粒,并保护空压机

第27页:高空取气管

高空取气管

  • 为远离地面几十米的管子。
  • 每升高 10 米,空气中杂菌降低一个数量级。因此从高空取气要比从低空取气有利得多。

第28页:高效前置过滤除菌流程

高效前置过滤除菌流程

  1. 高效前置过滤器
  2. 压缩机
  3. 贮罐
  4. 冷却器
  5. 丝网分离器
  6. 加热器
  7. 过滤器

第29页:空气压缩与冷却

2. 空气压缩和压缩空气的冷却

  1. 空气压缩:克服输送过程中过滤介质的阻力并维持一定的气流速度。
  2. 压缩后空气温度显著上升,需冷却。

第30页:压缩空气为什么要冷却

因为:

  • 压缩后的高温空气能引起过滤介质的炭化或燃烧
  • 增大发酵罐的降温负荷
  • 增加培养液水分的蒸发

一般用列管式冷却器进行冷却。

第31页:空气贮罐

空气贮罐

  • 消除压缩机排出空气量的脉冲,维持稳定的空气压力。
  • 利用重力沉降作用除去部分油雾。
  • 紧接空压机安装。
  • 有些装有冷却管。

第32页:压缩空气的除油除水

3. 压缩空气的除油除水

冷却降温后的空气湿度增大,会使过滤介质受潮失效。

第33页:除油除水设备

旋风分离器与丝网分离器的比较
设备原理分离效率
旋风分离器利用离心力进行沉降对于 10 μm 以上的微粒分离效率较高
丝网分离器利用惯性进行拦截分离效率较高,能除去 2~5 μm 的细小颗粒

第34页:旋风分离器

本页为旋风分离器的结构示意图,建议对照原图补充进气、出气与排尘口等结构名称。

第35页:丝网分离器

采用惯性拦截等机理,有效去除空气中的水、油雾、尘埃,不锈钢丝网可清洗,使用寿命长。

第36页:空气的加热

4. 空气的加热

将除油水的空气加热(温差在 10~15℃ 左右),降低相对湿度(达 50%~60%)后,输入过滤器。用列管换热器。

第37页:空气过滤除菌设备流程

空气过滤除菌设备流程:空压机 → 储罐 → 二级冷却 → 加热器 → 空气过滤(含粗过滤)。

第38页:空气过滤器

四、空气过滤器——过滤除菌的关键设备。本页起展示发酵车间的大型空压机与空气过滤器实物。

第39页:

第40页:发酵车间大型空气压缩机

本页为 180 M3 发酵罐车间大型空气压缩机的实景照片,建议对照原图补充机组型号与供气能力说明。

第41页:发酵车间的空气过滤器

本页为发酵车间空气过滤器的实景照片,建议对照原图补充过滤器型式与滤材说明。

第42页:空气净化的流程

空气净化的流程

  1. 吸气口吸入的空气先经过压缩前的过滤
  2. 进入空气压缩机(120~150℃)
  3. 冷却(20~25℃),除去油、水,再加热至 30~35℃
  4. 最后通过总过滤器和分过滤器,获得洁净度、压力、温度和流量都符合要求的无菌空气
顶部目录