16 实验技术六 放线菌的培养与形态观察.ppt

第1页：实验技术六放线菌的培养与形态观察

实验技术六放线菌的培养与形态观察一、实验目的1. 学习并掌握用玻璃纸培养放线菌的方法；2. 观察放线菌的培养特征；3. 初步了解放线菌的个体形态特征。

第2页：二、基本原理玻璃纸具有半透膜性

• 二、基本原理玻璃纸具有半透膜性，其透光性与载玻片基本相同。
• 将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将放线菌接种于玻璃纸上，经培养使放线菌生长在玻璃纸上。
• 观察时，将长菌的玻璃纸剪取小片，贴放在载玻片上，直接镜检。
• 这种方法可观察到放线菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态。

第3页：三、实验器材

三、实验器材1. 菌种：405（球孢链霉菌）和4029（紫色链霉菌）；2. 培养基：高氏Ⅰ号培养基；3. 其他器材：无菌平皿、无菌玻璃纸、无菌盖玻片、无菌玻璃涂棒、1mL无菌吸管、盛有9mL无菌水试管若干支、无菌镊子、酒精灯、接种环、剪刀、载玻片、显微镜等。

第4页：四、实验步骤

四、实验步骤1. 玻璃纸灭菌将玻璃纸和滤纸剪成与培养皿大小相同的圆形纸片，用水浸泡后把湿滤纸和玻璃纸交互重叠地放在培养皿中，使滤纸和玻璃纸隔开，然后进行湿热灭菌，备用。

第5页：制备琼脂玻璃纸平板培养物

• 2. 制备琼脂玻璃纸平板培养物（1）将高氏一号琼脂培养基熔化后倒平板，待凝固后，无菌操作用镊子将玻璃纸覆盖在琼脂平板上，展平。
• （2）稀释菌液：将放线菌斜面菌种制成10-3的孢子悬液。
• （3）接种：用1mL无菌吸管取0.2mL孢子悬液滴加在玻璃纸平板上，然后用无菌涂棒涂抹均匀。
• 也可用接种环挑取菌种斜面菌苔在玻璃纸上划线。
• （4）培养：将平板倒置于28-30℃下培养5-7天。

第6页：在洁净载玻片上加一杯水，用剪刀剪取小片玻璃纸

• 在洁净载玻片上加一杯水，用剪刀剪取小片玻璃纸，菌面朝上平贴在玻片的水滴上（勿产生气泡），先用低倍镜观察，再用高倍镜找到适宜部位，用油镜仔细观察。
• 要区别基内菌丝、气生菌丝、孢子丝及孢子的形态、粗细和颜色的差异。
• 3. 自然生长状态的观察注意：1. 接种时注意玻璃纸与培养基间不宜有气泡，以免影响其表面放线菌的生长；2. 操作过程，勿碰动玻璃纸菌面上的培养物。

第7页：五、思考题

五、思考题1. 为什么在培养基上放了玻璃纸后放线菌仍能生长？2. 玻璃纸法可否用于其他微生物？为什么？