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14 实验技术四 革兰氏染色法.ppt

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本课件讲解革兰氏染色法,说明细胞壁结构差异导致的着色原理与四种染色试剂的作用,按结晶紫初染、碘液媒染、酒精脱色、番红复染四步演示操作,并说明阳性菌与阴性菌的判定以及假阳性结果的预防。

实验技术四革兰氏染色法一、实验目的
二、基本原理革兰氏染色法的定义与要点,是1884年由丹麦病理学家C.Gram创立的
二、基本原理为什么通过革兰氏染色会出现这章节标题页,涵盖三、实验器材、四、操作步骤涂片干燥与固定草酸铵结晶紫等内容
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第1页:实验技术四革兰氏染色法

  • 实验技术四革兰氏染色法一、实验目的
  • 学习并初步掌握革兰氏染色法;
  • 了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。

第2页:二、基本原理革兰氏染色法

二、基本原理革兰氏染色法
二、基本原理革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram创立的

第3页:二、基本原理为什么通过革兰氏染色会出现这

二、基本原理为什么通过革兰氏染色会出现这两种不同反应的细菌呢?这是由这两类细菌的细胞壁的结构和化学成份的不同决定的

第4页:三、实验器材

  • 三、实验器材
  • 菌种
  • 试剂
  • 其他器材大肠杆菌、金黄色葡萄球菌草酸铵结晶紫、碘液、蕃红、95% 酒精显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶、擦镜纸等或枯草杆菌或沙黄

第5页:革兰氏染色操作步骤

革兰氏染色操作步骤
步骤操作
1 涂片干燥与固定
2 初染草酸铵结晶紫 1 min,水洗
3 助染碘液 1 min,水洗
4 脱色95% 乙醇 20~25 s,水洗
5 复染蕃红 1~2 min,水洗
6 镜检干燥后镜检

染色要点:须用活跃生长期的幼培养物,涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性;火焰固定不宜过热,以玻片不烫手为宜。菌体呈蓝紫色者为革兰氏阳性菌,呈红色者为革兰氏阴性菌。

第6页:思考题与复习题

  • 思考题1. 制作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚。
  • 其染色成败的关键一步是什么。
  • 2. 当你对一株未知菌进行革兰氏染色时,怎样能确定你的染色技术操作正确,结果可靠。
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