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19 实验技术九 培养基的制备与高压蒸汽灭菌.ppt

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本课件讲解培养基的制备与高压蒸气灭菌,介绍培养基的配制原则与细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的常用配方,演示计算、称量、熔化、调pH、分装与包扎的操作流程,并说明高压蒸气灭菌的原理与操作步骤。

实验技术九培养基的制备与高压蒸气灭菌章节标题页,涵盖二、基本原理培养基、按成份不同半合成培养基天然培养基合成培养等内容
二、基本原理培养基的定义与要点,是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质
按成份不同半合成培养基天然培养基合成培养基液体培养基选择培养基基础成培养基营养培养基按用途半固体合成培养基固体培养基
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第1页:实验技术九培养基的制备与高压蒸气灭菌

实验技术九培养基的制备与高压蒸气灭菌一、实验目的1. 明确培养基的配制原理;2. 了解高压蒸气灭菌的实验内容及应用范围;3. 学习高压蒸气灭菌锅的使用及操作方法和注意事项。

第2页:二、基本原理培养基

二、基本原理培养基
二、基本原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质

第3页:按成份不同半合成培养基天然培养基合成培养

按成份不同半合成培养基天然培养基合成培养基液体培养基选择培养基基础成培养基营养培养基按用途半固体合成培养基固体培养基按物理状态鉴别培养基︵一︶培养基的分类

第4页:二)高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌

  • (二)高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。
  • 待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸气不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
  • 导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

第5页:三、实验器材细菌培养基酵母菌培养基放线菌

三、实验器材细菌培养基酵母菌培养基放线菌培养基霉菌培养基试管手提式或立式全自动高压蒸气灭菌锅等。

第6页:细菌与放线菌培养基配方

常用培养基配方(每 1000 mL)
培养基主要成分与用量
细菌培养基(牛肉膏蛋白胨)牛肉膏 3.0 g;蛋白胨 10.0 g;氯化钠 5.0 g;琼脂 15~25 g;水 1000 mL;pH 7.4~7.6
高氏 I 号合成培养基(放线菌)可溶性淀粉 20 g;KNO₃ 1.0 g;K₂HPO₄·3H₂O 0.5 g;MgSO₄·7H₂O 0.5 g;NaCl 0.5 g;FeSO₄·7H₂O 0.01 g;琼脂 15~25 g;水 1000 mL;pH 7.4~7.6

第7页:酵母菌与霉菌培养基配方

常用培养基配方(每 1000 mL)
培养基主要成分与用量
酵母菌合成培养基蛋白胨 20 g;酵母膏 10 g;葡萄糖 20 g;琼脂 15~20 g;水 1000 mL;自然 pH
查氏培养基(霉菌)NaNO₃ 2.0 g;K₂HPO₄ 1.0 g;KCl 0.5 g;MgSO₄·7H₂O 0.5 g;FeSO₄·7H₂O 0.01 g;蔗糖 30 g;琼脂 15~20 g;蒸馏水 1000 mL;自然 pH

第8页:五、操作步骤计算调pH

五、操作步骤计算调pH值称量熔化分装包扎灭菌制作斜面培养基和平板培养基补足水分(一)培养基的制备

第9页:二)高压湿热灭菌放物品加水加盖排冷空气

(二)高压湿热灭菌放物品加水加盖排冷空气加热维持压力至所需时间关闭放气阀关闭电源,待温度降至零打开放气阀取出物品

第10页:六、思考问题

六、思考问题1.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后,为什么待压力降低至“0”时才能打开排气阀,开盖取物?2.在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素?3.灭菌在微生物实验操作中有何重要意义?4.黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的芽孢对热的抗性哪个更强?为什么?

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