页数:10页文件大小:162.0 KB来源: 微生物学ppt课件
本课件讲解培养基的制备与高压蒸气灭菌,介绍培养基的配制原则与细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的常用配方,演示计算、称量、熔化、调pH、分装与包扎的操作流程,并说明高压蒸气灭菌的原理与操作步骤。
实验技术九培养基的制备与高压蒸气灭菌一、实验目的1. 明确培养基的配制原理;2. 了解高压蒸气灭菌的实验内容及应用范围;3. 学习高压蒸气灭菌锅的使用及操作方法和注意事项。
按成份不同半合成培养基天然培养基合成培养基液体培养基选择培养基基础成培养基营养培养基按用途半固体合成培养基固体培养基按物理状态鉴别培养基︵一︶培养基的分类
三、实验器材细菌培养基酵母菌培养基放线菌培养基霉菌培养基试管手提式或立式全自动高压蒸气灭菌锅等。
| 培养基 | 主要成分与用量 |
|---|---|
| 细菌培养基(牛肉膏蛋白胨) | 牛肉膏 3.0 g;蛋白胨 10.0 g;氯化钠 5.0 g;琼脂 15~25 g;水 1000 mL;pH 7.4~7.6 |
| 高氏 I 号合成培养基(放线菌) | 可溶性淀粉 20 g;KNO₃ 1.0 g;K₂HPO₄·3H₂O 0.5 g;MgSO₄·7H₂O 0.5 g;NaCl 0.5 g;FeSO₄·7H₂O 0.01 g;琼脂 15~25 g;水 1000 mL;pH 7.4~7.6 |
| 培养基 | 主要成分与用量 |
|---|---|
| 酵母菌合成培养基 | 蛋白胨 20 g;酵母膏 10 g;葡萄糖 20 g;琼脂 15~20 g;水 1000 mL;自然 pH |
| 查氏培养基(霉菌) | NaNO₃ 2.0 g;K₂HPO₄ 1.0 g;KCl 0.5 g;MgSO₄·7H₂O 0.5 g;FeSO₄·7H₂O 0.01 g;蔗糖 30 g;琼脂 15~20 g;蒸馏水 1000 mL;自然 pH |
五、操作步骤计算调pH值称量熔化分装包扎灭菌制作斜面培养基和平板培养基补足水分(一)培养基的制备
(二)高压湿热灭菌放物品加水加盖排冷空气加热维持压力至所需时间关闭放气阀关闭电源,待温度降至零打开放气阀取出物品
六、思考问题1.高压蒸气灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?灭菌完毕后,为什么待压力降低至“0”时才能打开排气阀,开盖取物?2.在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素?3.灭菌在微生物实验操作中有何重要意义?4.黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的芽孢对热的抗性哪个更强?为什么?
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