13 实验技术三 细菌的单染色法.ppt

第1页：实验技术三细菌的单染色法

• 实验技术三细菌的单染色法一、实验目的
• 学习微生物涂片、染色的基本技术；
• 掌握细菌的单染色法；
• 初步学会无菌操作技术；
• 巩固显微镜油镜的使用方法。

第2页：二、基本原理

• 二、基本原理
• 细菌体积微小，较透明，未经染色不易识别,借助于染色法可使细菌着色，与背景形成鲜明的对比，易于在显微镜下观察。
• 单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的方法。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或酸性溶液中时常带负电荷，故易于与碱性染料结合，使其着色。

第3页：三、实验器材

• 三、实验器材
• 菌种
• 试剂
• 其他器材枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌生理盐水、吕氏碱性美兰染液、齐氏复红染液或草酸铵结晶紫染液显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶、擦镜纸等

第4页：四、操作步骤载玻片要洁净无油迹

• 四、操作步骤载玻片要洁净无油迹；滴生理盐水和取菌不宜过多；涂片要均匀，不宜过厚热固定温度不宜过高（以玻片与手背接触感到不烫手为宜），否则会改变甚至破坏细胞形态以染液刚好覆盖涂片薄膜为宜水洗时，不要直接冲洗涂面，而应使水从载玻片的一端流下。
• 水流不宜过急、过大，以免涂片薄膜脱落。
• 吸水纸吸净或吹风机吹干涂片干燥与固定染色水洗干燥镜检。

第5页：思考题与复习题

思考题1. 你认为制备细菌染色标本时，尤其应该注意哪些环节？2. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察? 3. 如果你的涂片未经热固定，将会出现什么问题?如果加热温度过高、时间太长，又会怎么样呢？