第1页：实验二 革兰氏染色及细菌特殊结构观察封面
实验二革兰氏染色及细菌特殊结构观察
第2页：一、实验目的学习细菌的革兰氏染色原理
一、实验目的
- 学习细菌的革兰氏染色原理和方法
- 了解细菌的特殊形态结构：芽孢、荚膜、鞭毛
第3页：二、实验原理单染色法
二、实验原理
- 单染色法：只能观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。
- 复染色法：用两种或两种以上染色液进行染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称鉴别染色法。常用的有：革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法等。
第4页：革兰氏染色丹麦C.Gram创立
革兰氏染色
- 丹麦C.Gram创立，用于细菌分类学研究
- 细菌细胞壁的结构
第5页：G－肽聚糖层较薄
- G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂质，故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了类脂质，增加了细胞的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，经沙黄复染呈红色。
- G＋细胞壁结构致密，用脱色剂处理后，肽聚糖层孔径缩小，通透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。
第6页：细菌的特殊形态结构芽孢的概念
细菌的特殊形态结构
- 芽孢：休眠体，不利环境下产生，耐受各种极端环境。
- 荚膜：多糖，包裹在菌体外围，保护菌体
- 鞭毛：运动，菌落形态。
第7页：三、实验材料大肠杆菌
三、实验材料
- 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌（24h培养物）
- 革兰氏染色液一套
第8页：四、实验步骤革兰氏染色枯草杆菌的芽孢观察
四、实验步骤
- 革兰氏染色
- 枯草杆菌的芽孢观察
- 观看鞭毛、荚膜的示范片
- 绘图、写实验报告
第9页：革兰氏染色法1. 涂片2. 初染的概念
革兰氏（Gram）染色法
- 1. 涂片
- 2. 初染：在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液，染1分钟，倾去染液，流水冲洗至无紫色。
- 3. 媒染：先用新配的路哥氏碘液冲去残水，而后用其覆盖涂面1分钟，后水洗。
- 4. 脱色：除去残水后，滴加95%酒精进行脱色约15－20秒，后立即用流水冲洗。
- 5. 复染：滴加番红染色液，染3－5分钟，水洗后用吸水纸吸干。
- 6.镜检：观察染色结果并绘图。
第10页：枯草杆菌芽孢的观察
枯草杆菌芽孢的观察
第11页：细菌鞭毛的观察
细菌鞭毛的观察
第12页：细菌荚膜的观察荚膜
细菌荚膜的观察荚膜
第13页：五、实验结果记录所观察到的三种菌革兰氏染
五、实验结果
- 记录所观察到的三种菌革兰氏染色结果的差别
- 记录枯草杆菌Gram染色结果，并判断是阳性还是阴性
第14页：六、问题与讨论要得到正确的革兰氏染色结果
六、问题与讨论要得到正确的革兰氏染色结果必须注意哪些操作？哪一步是关键？Why?
第15页：内容回顾原理细菌革兰氏染色的原理方法细菌
内容回顾
- 原理细菌革兰氏染色的原理
- 方法细菌革兰氏染色的方法简要介绍了芽孢染色、荚膜染色、鞭毛染色的方法
第16页：本次实验课结束请确保油镜头擦拭干净！
本次实验课结束请确保油镜头擦拭干净！请第二排同学留下值日下周再见！
