21 其他革兰阴性杆菌及检验.ppt

第1页：其他革兰阴性杆菌的常规检验

其他革兰阴性杆菌：包括嗜血杆菌属、嗜肺军团菌属、布鲁菌、百日咳鲍特菌、弯曲菌、幽门螺杆菌等，其共同特点是培养要求较特殊。

第2页：流感嗜血杆菌形态与培养特性

形态染色

G⁻小杆菌，多形性；有毒菌株形成荚膜。

培养特性

培养基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培养基）；X因子为血红素，V因子为辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ。

菌落特征

菌落光滑、无色透明、露滴状；需CO₂培养。

特殊现象

血平板上出现“卫星现象”。

第3页：卫星现象

卫星现象：流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的V因子，在其菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。

第4页：流感嗜血杆菌分型与致病性

分型

根据荚膜抗原分a、b、c、d、e、f六型，b型毒力最强；可产生自溶酶。

致病物质

荚膜、菌毛、内毒素、IgA蛋白酶。

原发感染

脑膜炎、鼻咽炎等，多见于儿童。

继发感染

鼻窦炎等，多见于成人。

第5页：流感嗜血杆菌微生物学检查

微生物学检查：标本（脑脊液、痰、血液、脓液）先作涂片染色镜检，再分离培养并作鉴定试验，依据革兰阴性多形性小杆菌和“卫星现象”作出判断，报告“检出流感嗜血杆菌”。

第6页：流感嗜血杆菌鉴定依据

• 革兰阴性小杆菌、多形性
• 培养采用巧克力色培养基，CO₂培养
• 血平板上有“卫星现象”
• X、V因子需求试验

第7页：

第8页：嗜肺军团菌属概述

概念

军团菌是引起军团菌病的病原体。

由来

首发于1976年美国一次军人聚会，故称作军团病。

国内发现

1982年在我国南京首次证实了军团菌病。

第9页：嗜肺军团菌形态染色

染色

革兰阴性，但不易被着色；Gimenez染色菌体呈红色，背景为绿色。

形态

杆菌，形态有多形性。

特殊结构

不形成芽孢，无荚膜，有端生或侧生鞭毛。

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第11页：嗜肺军团菌培养特性

气体与营养

营养要求高；专性需氧；需2.5％～5％CO₂。

生长速度

生长缓慢。

BCYE培养基

灰白色、圆形光滑湿润菌落。

F-G培养基

针尖大小、黄色荧光。

第12页：军团菌菌落形态（CYE琼脂）

军团菌菌落形态（CYE琼脂培养基）：图示军团菌在CYE琼脂上形成的灰白色、圆形、光滑湿润菌落。

本页源文件为菌落形态图，菌落细节描述建议对照原课件图示核实。

第13页：嗜肺军团菌抗原结构

O抗原

具有型特异性。

血清型

军团菌病约90％由嗜肺军团菌所致；已发现15个血清型，其中以Lp1血清型最常见，Lp6次之。

第14页：嗜肺军团菌抵抗力与流行环节

抵抗力

分布广泛、抵抗力强，在水中存活时间长。

污染源

军团菌病的主要污染源是供水系统及冷却塔和空调系统。

第15页：定期清洗空调预防军团菌病

定期清洗空调预防军团菌病：因冷却塔与空调系统是军团菌病的主要污染源，应定期清洗空调系统，防止含菌气溶胶经呼吸道传播。

第16页：嗜肺军团菌临床意义

致病物质

内毒素、外毒素、侵袭性酶。

传染途径

呼吸道，吸入含有军团菌的气溶胶。

所致疾病

军团菌病，包括肺炎型与非肺炎型（类似感冒）。

免疫性

感染者血清中出现特异性IgG、IgM抗体。

第17页：嗜肺军团菌微生物学检查

微生物学检查：标本（痰、支气管分泌物、血液）先作涂片染色镜检（Giemsa染色），再接种BEYE琼脂分离培养，依据形态染色、菌落特征、氧化酶与触酶试验及荧光抗体染色等进行鉴定后报告结果。

第18页：军团菌血清学试验

检测指标

检测患者血清中特异性抗体。

方法

ELISA。

意义

检测特异性IgM可诊断军团菌病；检测特异性IgG可用于军团菌病流行病学调查。

第19页：布鲁菌属概述

所致疾病

布鲁菌属引起布鲁菌病（波状热），可引起人畜共患病。

流行菌种

我国流行菌种主要是羊、牛、猪布鲁菌，以羊布鲁菌最常见。

寄生特性

属细胞内寄生菌。

第20页：布鲁菌形态染色

形态染色

革兰阴性球杆菌。

特殊结构

光滑型有微荚膜，无芽孢，无鞭毛。

常用染色法

改良Ziehl-Neelsen染色法：菌体红色，背景为蓝色；柯兹洛夫斯基染色法：菌体红色，背景绿色。

第21页：布鲁菌培养特性

气体与营养

专性需氧、5％～10％CO₂；营养要求高，常用肝浸液培养基。

生长速度

生长缓慢。

菌落特征

菌落细小、无色透明、光滑。

第22页：布鲁菌生化反应

• 氧化酶、触酶：＋
• 氧化分解葡萄糖
• 产生硫化氢

第23页：布鲁菌抗原构造

表中比例为源文件所载M抗原与A抗原之比；部分教材按A抗原：M抗原顺序列出，数值顺序相反，引用时请注意口径。