第1页：非发酵菌的概念
非发酵菌：指一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利用糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性杆菌。
第2页：非发酵菌主要种类
主要种类：铜绿假单胞菌、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属、金氏杆菌属、土壤杆菌属等。
第3页：非发酵菌主要特点
- 氧化酶：＋（不动杆菌属除外）
- O/F试验：O／－
- 动力试验：多数有鞭毛，但半固体动力试验不明显，常采用镜检或鞭毛染色
第4页：葡萄糖氧化发酵试验（O/F）
- 培养基
- O/F培养基（半固体高层）。
- 指示剂
- 溴麝香草酚蓝。
- 培养基pH
- 7.0。
- 类型
- O/F：O（氧化型）；O/F：F（发酵型）。
第5页：O/F试验结果类型
- O/F：O——氧化型
- O/F：F——发酵型
- O/F：－——产碱型（不分解糖）
第6页：肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别
肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科的鉴别| 鉴定试验 | 肠杆菌科 | 非发酵菌 | 弧菌科 |
|---|
| 氧化酶 | － | ＋ | ＋ |
|---|
| 葡萄糖氧化／发酵（O/F） | F | O／－ | F |
|---|
| 鞭毛 | 周鞭毛 | 单、丛、周 | 单、丛 |
|---|
第7页：假单胞菌属概述
- 分类
- 假单胞菌科细菌根据rRNA-DNA同源性分为5群，其中Ⅰ群属于假单胞菌属，共7种细菌，代表菌种为铜绿假单胞菌。
- 致病性
- 多为条件致病菌，是医院感染的主要病原菌。
第8页：假单胞菌属共同点
- 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单或丛鞭毛
- 专性需氧
- 营养要求不高
- 氧化酶：＋
- O/F：O
- Mac生长：＋
- 产生水溶性色素
第9页：铜绿假单胞菌形态染色
形态染色：革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单或丛鞭毛。
第10页：铜绿假单胞菌培养特性
- 气体与营养
- 专性需氧、营养要求不高。
- 温度
- 最适温度35℃，42℃生长，4℃不生长。
- 色素
- 产生荧光素和蓝绿色水溶性的绿脓素，培养物呈蓝绿色。
- 气味
- 培养物有生姜气味。
第11页：铜绿假单胞菌菌落特征
- 典型菌落
- 扁平湿润，边缘不规则，菌落和培养基灰绿色，表面有金属光泽。
- 大肠菌样菌落
- 菌落圆形凸起，似大肠杆菌。
- 黏液型菌落
- 菌落凸起，呈粘液状。
- 侏儒型菌落
- 细小，无光泽。
- 血平板
- 形成透明溶血环。
- SS、Mac
- 形成不发酵乳糖菌落。
第12页：铜绿假单胞菌生化反应
- 氧化酶：＋
- O/F：O
- 枸橼酸盐利用：＋
- 精氨酸双水解：＋
- 乙酰胺酶：＋
- 明胶液化：＋
第13页：铜绿假单胞菌抗原结构与抵抗力
- O抗原
- 包括外膜蛋白和脂多糖。
- 其他抗原
- H抗原、S抗原。
- 抵抗力
- 对外界环境抵抗力强，对多种抗生素不敏感。
第14页：铜绿假单胞菌临床意义
- 致病物质
- 内毒素、外毒素、胞外酶、菌毛、荚膜。
- 所致疾病
- 条件致病菌，是医院感染的重要病原菌，也是大面积烧伤创面感染的重要病原菌。
第15页：铜绿假单胞菌检验程序
铜绿假单胞菌检验程序：标本（血标本先增菌）接种血平板分离培养；取可疑菌落作涂片染色镜检，观察菌落特征、绿脓素与气味，做氧化酶、O/F：O、枸橼酸盐利用、精氨酸双水解、乙酰胺酶、明胶液化与42℃生长试验完成初步鉴定，必要时作全面生化反应与分型检查后发出报告。
第16页：铜绿假单胞菌检验方法
- 显微镜检查
- 标本直接涂片革兰染色镜检；鞭毛染色镜检。
- 培养
- 标本接种血平板、Mac平板分离培养，血标本先增菌再转种。
- 初步鉴定
- 菌落特征、水溶性绿色色素、生姜气味、氧化酶、O/F。
- 全面鉴定
- 色素不典型者需全面鉴定。
第17页：铜绿假单胞菌分型检查
- 分型方法
- 血清学分型、噬菌体分型、质粒指纹图谱分析、脉冲场凝胶电泳。
- 意义
- 对医院感染的流行病学调查有重要意义。
第18页：荧光假单胞菌
- 形态与培养
- 革兰阴性杆菌，单端丛鞭毛；专性需氧；营养要求不高，普通平板、Mac平板可生长。
- 温度
- 最适生长温度25～30℃，4℃生长，35℃、42℃不生长。
- 色素
- 产生水溶性荧光素（青脓素），不产绿脓素。
- 生化反应
- 氧化酶＋；O/F：O；卵磷脂酶＋；明胶液化＋。
- 特点
- 具有嗜冷性，可在冰箱储存血中繁殖。
第19页：恶臭假单胞菌
- 形态与培养
- 革兰阴性杆菌，单端丛鞭毛；专性需氧。
- 温度
- 最适生长温度25～30℃，4℃生长，35℃、42℃不生长。
- 色素与气味
- 产生水溶性荧光素（青脓素），不产绿脓素；陈旧培养物有腥臭味。
- 生化反应
- 氧化酶＋；O/F：O；卵磷脂酶－；明胶液化－。
第20页：斯氏假单胞菌
- 形态
- 革兰阴性杆菌，单端丛鞭毛或侧生鞭毛。
- 温度
- 最适温度35℃，42℃生长，4℃不生长。
- 菌落特征
- 干燥、粗糙、皱缩，可产生黄色色素，无绿脓素和荧光素。
第21页：产碱杆菌属种类
种类：粪产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌氧化亚种、木糖氧化产碱杆菌脱硝亚种。
第22页：产碱杆菌属主要特征
- 形态
- 革兰阴性杆菌、有周鞭毛、无芽孢、无荚膜。
- 培养
- 专性需氧；营养要求不高，普通平板和Mac平板上可生长。
- 生化反应
- 氧化酶＋；O/F：－；不分解任何糖。
- 临床意义
- 是医院感染病原菌之一，粪产杆菌多见。
源文件本页O/F结果写作「K」，按「不分解任何糖」的性状记为阴性（－）。
第23页：产碱杆菌属鉴定要点
- 革兰阴性杆菌
- 氧化酶＋
- O/F：－
- 硝酸盐还原－；亚硝酸盐还原＋
- KIA：底层斜面不变色
- 注意与不动杆菌鉴别
第24页：不动杆菌属主要特征
- 种类
- 现已命名6个生物种，代表菌为醋酸钙不动杆菌。
- 形态
- 革兰阴性球杆菌，成双排列，无鞭毛，动力阴性。
- 培养
- 专性需氧，营养要求不高，普通平板、Mac平板上可生长。
- 生化反应
- 氧化酶－；O/F：O／－；硝酸盐还原－。
- 临床意义
- 临床标本分离率仅次于铜绿假单胞菌。
第25页：不动杆菌属鉴定要点
- 革兰阴性球杆菌
- 无动力
- 氧化酶－
- 硝酸盐还原－
- KIA：底层斜面不变色
- 注意与形态相似的奈瑟菌鉴别
- 注意与不分解糖的产碱杆菌鉴别
第26页：嗜麦芽窄食黄单胞菌
- 形态与培养
- 革兰阴性杆菌，丛鞭毛；专性需氧、营养要求不高，普通平板生长良好，麦康凯平板可生长。
- 生化反应
- 氧化酶－；葡萄糖O/F：－；麦芽糖O/F：＋；赖氨酸脱羧＋；明胶液化＋。
第27页：黄杆菌科
- 形态与培养
- 革兰阴性杆菌，无鞭毛；专性需氧、营养要求不高，普通平板上生长，形成黄色色素；麦康凯平板上不生长。
- 生化反应
- 氧化酶＋；O/F：O。
第28页：莫拉菌属
- 形态
- 革兰阴性球杆菌，不易脱色，成双排列（与奈瑟菌相似），无鞭毛，部分菌株有荚膜。
- 培养
- 专性需氧，营养要求高，普通平板上不生长。
- 生化反应
- 氧化酶＋；O/F：－。
第29页：非发酵菌检验程序
非发酵菌检验程序：标本（血标本先增菌）接种血平板、麦康凯平板分离培养；取可疑菌落作涂片染色镜检、动力观察（革兰染色、鞭毛染色），再做氧化酶、O/F、硝酸盐还原、KIA（斜面底层不变色）及其他生化反应后报告结果。
第30页：测验1
测验1：关于铜绿假单胞菌，错误的是
- A 革兰阴性杆菌
- B 氧化酶－、触酶－
- C 硝酸盐还原－
- D 产生水溶性蓝绿色素
- E 菌落有金属光泽
源文件未给出答案。
第31页：测验2
测验2：下列哪项是非发酵菌的主要特征
- A 需氧或兼性厌氧
- B 革兰阴性杆菌
- C 营养要求不高
- D 无芽孢
- E 不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用糖
源文件未给出答案。
第32页：测验3
测验3：对革兰阴性杆菌出现下列哪种特征，可怀疑为非发酵菌
- A 氧化酶＋
- B 发酵葡萄糖
- C 动力阴性
- D 触酶＋
- E 氧化利用麦芽糖
源文件未给出答案。
第33页：测验4
测验4：假单胞菌属中营养要求不高，新分离菌株在培养基上形成特征性干燥、皱缩样菌落，并黏附于平板表面难以移动，可产生黄色色素的细菌可能是
- A 铜绿假单胞菌
- B 斯氏假单胞菌
- C 产碱假单胞菌
- D 荧光假单胞菌
- E 恶臭假单胞菌
源文件未给出答案。
第34页：测验5
测验5：关于不动杆菌错误的是
- A 氧化酶＋
- B 硝酸盐还原－
- C 革兰阴性杆菌，形态多为球杆状
- D 无动力
- E 专性需氧
源文件未给出答案。
