14 志贺菌属.ppt

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本课件讲述肠杆菌科志贺菌属。先说明该属是引起人类细菌性痢疾的病原菌并分为四群共44个血清型，接着讲述其形态染色、在不同肠道选择培养基上的培养特性、KIA与MIU等生化反应、O抗原与K抗原构造、抵抗力及三类变异，随后说明菌毛、内毒素与志贺毒素的致病作用、菌痢三种临床类型与局部SIgA免疫，最后讲解标本采集、检验程序、血清学鉴定、不典型菌株处理、快速鉴定试验以及与EIEC和类志贺邻单胞菌的鉴别。

志贺菌属概述页，说明其为细菌性痢疾病原菌并分为A群痢疾、B群福氏、C群鲍氏、D群宋内四群共44个血清型

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第1页：肠道杆菌志贺菌属

肠道杆菌——志贺菌属：本课件讲述志贺菌属的生物学性状、临床意义与微生物学检验。

第2页：志贺菌属概述

志贺菌属：是引起人类细菌性痢疾的病原菌，包括四群，共44个血清型。

A群：痢疾志贺菌。
B群：福氏志贺菌。
C群：鲍氏志贺菌。
D群：宋内志贺菌。

第3页：志贺菌形态染色

形态染色：革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜、无鞭毛，多数菌株有菌毛。

第4页：志贺菌形态图

志贺菌镜下为革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜、无鞭毛。

第5页：志贺菌培养特性

生长条件: 兼性厌氧，营养要求不高。
生长现象: 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落。; SS平板：无色菌落。; Mac平板：无色菌落。; EMB平板：无色菌落。; 宋内志贺菌多呈扁平、R型菌落，个别菌株可迟分解乳糖。

第6页：志贺菌生化反应

氧化酶试验：阴性。
分解葡萄糖、不分解乳糖（个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖）。
KIA：KA－－。
MIU：－＋/－－。
IMViC：－/＋＋－－。
除A群外，均能发酵甘露醇。

第7页：志贺菌抗原结构

只有O抗原和K抗原，无H抗原。
K抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集。
根据O抗原分为4群和44型。

第8页：志贺菌抗原分类

志贺菌抗原分类：下表列出各群的型与亚型。

志贺菌抗原分类
菌种	群	型	亚型
痢疾志贺菌	A	1～10	8a、8b、8c
福氏志贺菌	B	1～6，x、y变种	1a、1b、2a、2b、3a、3b、3c、4a、4b
鲍氏志贺菌	C	1～18	—
宋内志贺菌	D	1	—

第9页：志贺菌抵抗力

对理化因素抵抗力弱。
尤其对酸敏感。
对消毒剂敏感。
易产生耐药性。

第10页：志贺菌变异性

S-R变异。
耐药性变异。
毒力变异。

第11页：志贺菌临床意义

致病物质: 菌毛；内毒素；志贺毒素，属外毒素，由A群志贺菌产生，具有肠毒性、细胞毒性和神经毒性作用。
所致疾病: 经肠道传染，引起细菌性痢疾，有三种临床类型：急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢。
免疫性: 主要依赖肠道局部SIgA；病后免疫力不持久。

第12页：志贺菌标本采集

标本：粪便或肛拭。
取新鲜脓血便。
立即送检或床边接种。
不能及时送检时保存于30％甘油盐水或卡-布培养基。

第13页：志贺菌检验程序

检验程序：粪便或肛拭接种肠道选择平板，取可疑菌落作KIA、MIU、IMViC。

初步鉴定：菌落涂片染色、多价血清玻片凝集。
最终鉴定：系统生化反应、因子血清凝集。
报告结果。

第14页：志贺菌检验方法

检验方法：将待检标本接种肠道选择平板，35℃培养18～24小时。

若标本含菌量少，可先增菌（GN增菌液）4～6小时再分离培养。
挑取无色半透明菌落，进行初步生化反应鉴定。
符合志贺菌生化反应特征者进行血清学鉴定。
血清学鉴定先用志贺菌多价诊断血清作玻片凝集试验，若凝集再用A、B、C、D群诊断血清鉴定到种、型。
注意K抗原的阻断作用，并应考虑是否为EIEC。

第15页：志贺菌鉴定

初步鉴定: 挑取可疑菌落接种KIA、MIU培养基；若符合KIA为KA－－、MIU为－＋/－－，再作志贺菌多价诊断血清玻片凝集试验。
最后鉴定: 全面生化反应和单价血清玻片凝集试验。
K抗原阻断的处理: 若生化反应符合而血清学不凝集，可将菌液加热100℃15～30min后重复凝集试验；仍不凝集者可考虑EIEC，需进行鉴别。

第16页：志贺菌鉴别

志贺菌鉴别：

与EIEC的鉴别。
与类志贺邻单胞菌的鉴别。
与动力不明显、不产H2S的沙门菌的鉴别。

第17页：志贺菌血清学鉴定

先用志贺菌多价诊断血清鉴定群，再用A、B、C、D群单价血清鉴定血清型。
A群以1、2型为主，多有K抗原。
C群型别多。
D群只有1个血清型。
B群型别多，抗原结构复杂，多无K抗原；我国以B群为主。

第18页：不典型菌株的鉴定

生化反应符合而血清学不凝集，或血清学凝集而生化反应不符合者，可考虑为不典型菌株。
将不典型菌株在肉汤中反复传代，促其恢复典型性状。

第19页：志贺菌快速鉴定试验

直接凝集试验。
免疫荧光菌球法。
协同凝集试验。
乳胶凝集试验。
分子生物学方法。

第20页：志贺菌鉴定依据

肠道选择平板上为无色半透明菌落。
KIA：KA－－。
MIU：－＋/－－。
与志贺菌多价诊断血清和各群血清凝集。
注意与EIEC、类志贺邻单胞菌、动力不明显的沙门菌鉴别。

第21页：与EIEC的鉴别

与EIEC的鉴别：下表列出生化反应鉴别试验。

与肠侵袭性大肠埃希菌的鉴别
生化反应鉴别试验	EIEC	志贺菌
粘质酸盐产酸	＋	－
醋酸盐利用	＋	－
赖氨酸脱羧酶	＋	－

第22页：与类志贺邻单胞菌的鉴别

与类志贺邻单胞菌的鉴别：下表列出鉴别试验。

与类志贺邻单胞菌的鉴别
鉴别试验	类志贺邻单胞菌	志贺菌
氧化酶	＋	－
动力	＋	－
半乳糖苷渗透酶（ONPG）	＋	－

第23页：与沙门菌的鉴别

与动力不明显、H2S阴性沙门菌的鉴别：下表列出鉴别试验。

与动力不明显、硫化氢阴性沙门菌的鉴别
鉴别试验	沙门菌	志贺菌
沙门菌诊断血清玻片凝集试验	＋	－

第24页：大肠埃希菌生化反应结果

大肠埃希菌生化反应结果：下表列出KIA、MIU、IMViC及氧化酶结果。

大肠埃希菌生化反应结果
菌株	KIA斜面	KIA底层	气体	硫化氢	动力	吲哚	脲酶	靛基质(I)	甲基红(M)	VP(Vi)	枸橼酸盐(C)	氧化酶
菌株一	A	A	＋/－	－	＋/－	＋	－	＋	＋	－	－	－
菌株二	K	A	－	－	＋	＋	－	＋	＋	－	－	－
菌株三	K	A	－	－	－	＋	－	＋	＋	－	－	－
菌株四	K	A	＋	－	＋/－	＋	－	＋	＋	－	－	－

本页在志贺菌属课件末尾列出大肠埃希菌的生化反应结果，疑为源课件沿用的对照表，内容已如实保留，请对照原课件确认其归属。表中原稿未标注各行对应的菌株名称，表中以菌株一至菌株四依次标示；＋/－表示反应不定。