页数:23页文件大小:252.0 KB来源: 微生物学检验ppt课件
本课件讲述肠杆菌科埃希菌属,以大肠埃希菌为重点。先介绍本属种类与大肠埃希菌的形态染色、培养特性、生化反应、抗原结构与抵抗力,随后讲述其致病物质、肠外感染与肠内感染的临床意义,接着讲解肠内与肠外感染的微生物学检验程序,最后给出致腹泻大肠埃希菌的鉴定、肠毒素比较与和志贺菌的鉴别。
肠道杆菌——埃希菌属:本课件讲述埃希菌属的种类、生物学性状、致病性与微生物学检验。
形态染色:革兰阴性、中等大小杆菌,无芽孢,有周鞭毛、菌毛,部分菌株有荚膜。
肠内感染检验程序:粪便标本接种肠道选择培养基,取可疑菌落分别作生化反应、血清学定型,并结合毒素检测与侵袭力试验发出报告。
肠外感染检验程序:中段尿等标本接种血平板及麦康凯或中国蓝平板,取可疑菌落作涂片染色、生化反应与药敏试验后发出报告。
原课件此处写作「MIR:++-」,据上下文应为MIU(动力、吲哚、脲酶),表中已按MIU标示。
ETEC的鉴定:主要检测肠毒素LT与ST。
| 方法 | LT | ST |
|---|---|---|
| 生物学方法 | 兔肠段结扎试验、细胞培养(CHO、Y1细胞) | 乳鼠灌胃试验 |
| 免疫学法 | ELISA | ELISA |
| 免疫学法 | 固相放免 | 固相放免 |
| 分子生物学法 | 基因探针 | 基因探针 |
EPEC的鉴定:生化反应符合大肠埃希菌、不符合EIEC和ETEC者,用EPEC多价OK血清作玻片凝集试验,凝集者再用单价OK血清作定型鉴定。
LT与ST的比较:下表列出两种肠毒素的主要区别。
| 特性 | LT | ST |
|---|---|---|
| 分子量 | 大 | 小 |
| 耐热性 | 不耐热 | 耐热 |
| 抗原性 | 强 | 弱 |
| 免疫原性 | 强 | 弱或无 |
| 肠毒素作用机制 | 激活腺苷酸环化酶,使细胞内cAMP升高 | 激活鸟苷酸环化酶,使细胞内cGMP升高 |
| 引起腹泻特点 | 大量水样腹泻 | 大量水样腹泻 |
致腹泻大肠埃希菌种类:下表列出五类致腹泻大肠埃希菌。
| 菌株 | 侵袭部位 | 疾病与症状 | 致病机制 |
|---|---|---|---|
| ETEC | 小肠 | 旅行者腹泻、婴幼儿腹泻;水样便 | 质粒介导LT和/或ST肠毒素 |
| EPEC | 小肠 | 婴儿腹泻;水样便 | 质粒介导粘附和破坏上皮细胞微绒毛 |
| EIEC | 大肠 | 志贺样腹泻;脓血便 | 质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞 |
| EHEC | 大肠 | 出血性结肠炎;血性腹泻 | 溶原性噬菌体编码Vero毒素,终止蛋白质合成 |
| EAEC | 小肠 | 婴儿腹泻;水样便 | 质粒介导集聚性粘附上皮细胞 |
大肠埃希菌生化反应结果:下表列出KIA、MIU、IMViC及氧化酶结果。
| 菌株 | KIA斜面 | KIA底层 | 气体 | 硫化氢 | 动力 | 吲哚 | 脲酶 | 靛基质(I) | 甲基红(M) | VP(Vi) | 枸橼酸盐(C) | 氧化酶 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 菌株一 | A | A | +/- | - | +/- | + | - | + | + | - | - | - |
| 菌株二 | K | A | - | - | + | + | - | + | + | - | - | - |
| 菌株三 | K | A | - | - | - | + | - | + | + | - | - | - |
| 菌株四 | K | A | + | - | +/- | + | - | + | + | - | - | - |
原稿未标注各行对应的菌株名称,表中以菌株一至菌株四依次标示;+/-表示反应不定。
与志贺菌的鉴别:下表列出两者的主要鉴别试验。
| 鉴别试验 | 大肠埃希菌 | 志贺菌 |
|---|---|---|
| 动力 | +/- | - |
| 乳糖发酵 | + | - |
| 赖氨酸脱羧酶 | + | - |
| 靛基质 | + | +/- |
| 醋酸钠利用 | + | - |
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