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13 埃希菌属.ppt

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本课件讲述肠杆菌科埃希菌属,以大肠埃希菌为重点。先介绍本属种类与大肠埃希菌的形态染色、培养特性、生化反应、抗原结构与抵抗力,随后讲述其致病物质、肠外感染与肠内感染的临床意义,接着讲解肠内与肠外感染的微生物学检验程序,最后给出致腹泻大肠埃希菌的鉴定、肠毒素比较与和志贺菌的鉴别。

埃希菌属章节封面,标示肠道杆菌埃希菌属篇的起始与本属主要菌种
菌属种类页,列出生境为肠道的正常菌群大肠埃希菌与蟑螂埃希菌等五个菌种
形态染色页,说明为革兰阴性中等大小杆菌,无芽孢,有周鞭毛与菌毛,部分菌株有荚膜
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第1页:肠道杆菌埃希菌属

肠道杆菌——埃希菌属:本课件讲述埃希菌属的种类、生物学性状、致病性与微生物学检验。

第2页:埃希菌属种类

  • 生境:肠道正常菌群。
  • 菌种:大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌、伤口埃希菌。

第3页:大肠埃希菌形态染色

形态染色:革兰阴性、中等大小杆菌,无芽孢,有周鞭毛、菌毛,部分菌株有荚膜。

第4页:

第5页:大肠埃希菌培养特性

生长条件
需氧、兼性厌氧;营养要求不高。
生长现象
血平板:中等大小、圆形、稍凸、边缘整齐、灰白色、湿润、光滑型菌落,某些菌株呈β型溶血。
中国蓝或SS等选择培养基:分解乳糖,菌落呈红色或桃红色。
伊红美蓝平板:菌落呈紫黑色,并有金属光泽。

第6页:大肠埃希菌生化反应

  • 氧化酶试验:阴性。
  • 发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖。
  • KIA:AA+-;MIU:++-。
  • IMViC:++--。

第7页:大肠埃希菌抗原结构

O抗原
菌体抗原,为多糖-磷脂-蛋白质复合物,耐热。
H抗原
鞭毛抗原,为蛋白质,不耐热。
K抗原
位于O抗原外层,为多糖,不耐热。
血清型表示式
按O∶K∶H排列,例如O111∶K58∶H2。

第8页:大肠埃希菌抵抗力

  • 胆盐、煌绿对该菌有抑制作用。
  • 对氯霉素、链霉素、庆大霉素敏感,但易产生耐药性。

第9页:大肠埃希菌临床意义

致病物质
K抗原、定植因子(菌毛)、内毒素、肠毒素(不耐热肠毒素LT、耐热肠毒素ST)。
所致疾病——肠外感染
机会感染,以泌尿系感染最多见,也可引起胆囊炎、腹膜炎、肺炎、新生儿脑膜炎等。
所致疾病——肠内感染
引起腹泻,由ETEC、EPEC、EIEC、EHEC、EAEC等致腹泻大肠埃希菌所致。

第10页:大肠埃希菌标本采集

  • 肠内感染:粪便。
  • 肠外感染:按疾病不同采集相应标本,如尿标本取中段尿。

第11页:肠内感染检验程序

肠内感染检验程序:粪便标本接种肠道选择培养基,取可疑菌落分别作生化反应、血清学定型,并结合毒素检测与侵袭力试验发出报告。

第12页:肠外感染检验程序

肠外感染检验程序:中段尿等标本接种血平板及麦康凯或中国蓝平板,取可疑菌落作涂片染色、生化反应与药敏试验后发出报告。

第13页:肠外感染检验方法

直接涂片镜检
标本直接涂片镜检。
分离培养
标本接种血平板和Mac或EMB平板,经18~24小时培养,挑取可疑菌落作进一步鉴定;血标本先增菌,再分离培养。
鉴定
菌落涂片、生化反应:氧化酶(-),与非发酵菌鉴别;KIA:AA+/--;MIU:++-;IMViC:++--。
尿菌落计数
>10万/ml尿液有诊断意义。

原课件此处写作「MIR:++-」,据上下文应为MIU(动力、吲哚、脲酶),表中已按MIU标示。

第14页:肠内感染检验方法

分离培养
粪便标本接种Mac或EMB平板,经18~24小时培养,挑取可疑菌落作进一步鉴定。
生化反应
KIA、MIU、IMViC符合大肠埃希菌。
致病大肠埃希菌鉴定
符合者进一步作致病大肠埃希菌鉴定。

第15页:ETEC的鉴定

ETEC的鉴定:主要检测肠毒素LT与ST。

ETEC肠毒素检测方法
方法LTST
生物学方法兔肠段结扎试验、细胞培养(CHO、Y1细胞)乳鼠灌胃试验
免疫学法ELISAELISA
免疫学法固相放免固相放免
分子生物学法基因探针基因探针

第16页:EPEC的鉴定

EPEC的鉴定:生化反应符合大肠埃希菌、不符合EIEC和ETEC者,用EPEC多价OK血清作玻片凝集试验,凝集者再用单价OK血清作定型鉴定。

第17页:EIEC的鉴定

生化反应特点(与志贺菌相似)
发酵葡萄糖产酸不产气;不发酵或迟分解乳糖;多数菌株动力阴性。
与志贺菌的鉴别
毒力测定:豚鼠眼结膜试验。
血清学分型:O152、O124。

第18页:EHEC的鉴定

  • 生化反应符合大肠埃希菌。
  • 血清学分型:有50多个型,代表为O157∶H7。
  • O157∶H7不发酵山梨醇,有助于选择性分离培养。

第19页:大肠埃希菌鉴定依据

  • 形态染色:革兰阴性杆菌。
  • 培养特性:血平板上为中等大小、灰白色、湿润的光滑型菌落,选择培养基上分解乳糖。
  • 生化反应:KIA AA+-、MIU ++-、IMViC ++--。
  • 血清学:与相应大肠杆菌诊断血清发生凝集。

第20页:肠毒素LT与ST的比较

LT与ST的比较:下表列出两种肠毒素的主要区别。

不耐热肠毒素LT与耐热肠毒素ST的比较
特性LTST
分子量大小
耐热性不耐热耐热
抗原性强弱
免疫原性强弱或无
肠毒素作用机制激活腺苷酸环化酶,使细胞内cAMP升高激活鸟苷酸环化酶,使细胞内cGMP升高
引起腹泻特点大量水样腹泻大量水样腹泻

第21页:致腹泻大肠埃希菌种类

致腹泻大肠埃希菌种类:下表列出五类致腹泻大肠埃希菌。

致腹泻大肠埃希菌种类与致病特点
菌株侵袭部位疾病与症状致病机制
ETEC小肠旅行者腹泻、婴幼儿腹泻;水样便质粒介导LT和/或ST肠毒素
EPEC小肠婴儿腹泻;水样便质粒介导粘附和破坏上皮细胞微绒毛
EIEC大肠志贺样腹泻;脓血便质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞
EHEC大肠出血性结肠炎;血性腹泻溶原性噬菌体编码Vero毒素,终止蛋白质合成
EAEC小肠婴儿腹泻;水样便质粒介导集聚性粘附上皮细胞

第22页:大肠埃希菌生化反应结果

大肠埃希菌生化反应结果:下表列出KIA、MIU、IMViC及氧化酶结果。

大肠埃希菌生化反应结果
菌株KIA斜面KIA底层气体硫化氢动力吲哚脲酶靛基质(I)甲基红(M)VP(Vi)枸橼酸盐(C)氧化酶
菌株一AA+/--+/-+-++---
菌株二KA--++-++---
菌株三KA---+-++---
菌株四KA+-+/-+-++---

原稿未标注各行对应的菌株名称,表中以菌株一至菌株四依次标示;+/-表示反应不定。

第23页:与志贺菌的鉴别

与志贺菌的鉴别:下表列出两者的主要鉴别试验。

大肠埃希菌与志贺菌的鉴别
鉴别试验大肠埃希菌志贺菌
动力+/--
乳糖发酵+-
赖氨酸脱羧酶+-
靛基质++/-
醋酸钠利用+-
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