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15 沙门氏菌属.ppt

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本课件讲述沙门菌属。先介绍其形态染色、培养特性、生化反应与O、H、Vi三类抗原构造,以及S-R、H-O、V-W与相位变异和抵抗力特点;随后说明菌毛、内毒素与Vi抗原等致病物质及肠热症、食物中毒、败血症、慢性肠炎等所致疾病;最后详述肠热症标本采集时机、检验程序、生化与血清学鉴定、肥达反应结果判定及带菌者检测。

沙门菌属章节封面,标示本章讲述沙门菌属的分类、生物学性状与微生物学检验
沙门菌属概述页,说明沙门菌属分肠道沙门菌与邦戈沙门菌两种,致病沙门菌多为肠道亚种
形态染色页,说明沙门菌为革兰阴性杆菌,无芽胞无荚膜,有周鞭毛,多数菌株有菌毛
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第1页:沙门菌属

沙门菌属:本章讲述沙门菌属的分类与生物学性状、致病性及微生物学检验。

第2页:沙门菌属概述

概念
沙门菌属是寄生于人类和动物肠道中、生物学性状相似的革兰阴性杆菌。
分类
肠道沙门菌、邦戈沙门菌。
亚种
肠道亚种、萨拉姆亚种、双亚利桑那亚种、亚利桑那亚种、豪顿亚种、英迪加亚种;致病沙门菌多为肠道亚种。

第3页:形态染色

形态与染色
革兰阴性杆菌。
特殊结构
无芽胞、无荚膜、有周鞭毛,多数菌株有菌毛。

第4页:沙门菌革兰染色镜下图

沙门菌革兰染色镜下图:镜下可见染成红色的革兰阴性杆菌,散在分布,有周鞭毛,无芽胞、无荚膜。

第5页:培养特性

气体与营养
兼性厌氧、营养要求不高。
菌落特征
在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落,与志贺菌菌落相似;SS平板为无色菌落,产H₂S菌株菌落中心呈黑色;Mac平板与EMB平板均为无色菌落。

第6页:生化反应

氧化酶试验
(-)
糖代谢
分解葡萄糖、不分解乳糖。
KIA
K A + +(伤寒沙门菌产酸不产气,K A - +)。
MIU
+ - -。
IMViC
- + - +。
脱羧试验
赖氨酸脱羧(+)、鸟氨酸脱羧(+)。

第7页:抗原结构

O抗原
化学成分为脂多糖;耐热;与相应抗体结合出现颗粒状凝集;为沙门菌分群依据。
H抗原
化学成分为蛋白质;不耐热;与相应抗体结合出现絮状凝集;为沙门菌分型依据。
Vi抗原
位于菌体外层,抗原性强,相应抗体可作为筛选带菌者指标;不耐热;能阻止O抗原与相应抗体结合;伤寒沙门菌和丙型副伤寒沙门菌有Vi抗原,有V-W变异。

第8页:几种沙门菌的抗原组分

几种沙门菌的抗原组分
群型O抗原H抗原第1相H抗原第2相
A组甲型副伤寒沙门菌1,2,12a—
B组乙型副伤寒沙门菌1,4,5,12b1,2
B组鼠伤寒沙门菌1,4,5,12i1,2
C组丙型副伤寒沙门菌6,7,Vic1,5
C组猪霍乱沙门菌6,7c1,5
D组伤寒沙门菌9,12,Vid—
D组肠炎沙门菌1,9,12g.m—

第9页:变异性

  • S-R变异:菌落由光滑型变为粗糙型
  • H-O变异:失去鞭毛抗原
  • V-W变异:Vi抗原由有到无
  • 相位变异:H抗原第1相与第2相的相互转变
  • 耐药性变异:易产生耐药性

第10页:抵抗力

特点
对理化因素抵抗力弱,尤其对酸敏感。
消毒剂
对消毒剂敏感。
耐药性
易产生耐药性。

第11页:致病物质与所致疾病

致病物质
菌毛、内毒素、Vi抗原。
所致疾病
肠热症、食物中毒、败血症、慢性肠炎。
免疫性
病后免疫力牢固,以细胞免疫为主。

第12页:肠热症发病过程

肠热症发病过程:图示伤寒杆菌和副伤寒杆菌经口进入小肠黏膜,侵入肠壁淋巴组织并被吞噬细胞吞噬,进入血液引起菌血症,随后播散至骨髓、脾、肝、胆囊、肾,再次侵入肠壁引起并发症;细菌随尿液和粪便排出,潜伏在胆囊中随粪便排出者成为带菌者。

第13页:沙门菌感染的预防

  • 加强饮食卫生,切断传播途径
  • 发现并及时隔离病人
  • 接种伤寒和副伤寒沙门菌疫苗进行特异性预防

第14页:微生物学检验与标本采集

原则
根据不同疾病采集不同标本。
肠热症第1~2周
血液。
肠热症第2~3周
粪便、尿液。
肠热症全程
骨髓。

第15页:沙门菌属检验程序

沙门菌属检验程序:粪便、尿、残余食物经GN或SF增菌后接种SS、Mac与血平板;血液、骨髓经胆盐葡萄糖肉汤增菌;挑取可疑菌落做菌落涂片染色,经KIA、MIU、IMViC初步鉴定,以A-F多价血清玻片凝集与因子血清凝集做最终鉴定,再做系统生化反应并报告结果。

第16页:检验方法—培养

血液、骨髓
接种胆盐葡萄糖肉汤增菌培养,每日观察,出现浑浊等现象及时转种血平板和肠道选择平板。
粪便
接种SS、Mac或EMB分离培养,含菌量少时可先增菌。
尿液
离心后取沉淀物接种血平板和肠道选择平板。

第17页:检验方法—生化反应

初步鉴定
触酶(+)、氧化酶(-)、硝酸盐还原(+)、苯丙氨酸(-)、葡萄糖酸盐(-)。
KIA
K A +/- +/-。
MIU
动力(+)、吲哚(-)、尿酶(-)。
脱羧试验
赖氨酸脱羧(+)、鸟氨酸脱羧(+)。

第18页:检验方法—血清学鉴定

血清学鉴定:首先用A-F多价O诊断血清进行初步鉴定;再用O因子血清鉴定到群(A、B、C、D、E、F群);再用H因子第2相血清辅助鉴定型。若生化反应符合沙门菌而A-F诊断血清不凝集,应考虑是否有Vi抗原,将待检菌液加热后再进行A-F多价O血清凝集试验。

第19页:沙门菌鉴定需注意的问题

  • 玻片凝集试验需注意菌液浓度、反应温度
  • 生化反应符合而玻片凝集试验阴性,应考虑是否有Vi抗原存在
  • 抗原结构相同而生化反应不同,应加做生化反应
  • 生化反应符合、玻片凝集阴性且无Vi抗原,应重新观察生化反应并传代以恢复原有抗原性

第20页:肠热症不同标本细菌培养情况

肠热症不同标本细菌培养情况:图示随发病周数推移,血标本、粪便标本与尿标本的细菌培养阳性检出率变化——血标本在发病第1~2周检出率最高,粪便与尿标本在发病第2周以后逐渐升高。

本页源文件为曲线图,具体数值未提取到文字,建议对照原课件图示补充各周次检出率。

第21页:血清学诊断—肥达反应

原理
用已知伤寒沙门菌O、H抗原和甲型、乙型、丙型副伤寒沙门菌H抗原与病人血清作半定量凝集试验,测定受检血清中有无相应抗体及其效价。
意义
协助诊断肠热症(伤寒与副伤寒)。

第22页:肠热症病人血清抗体出现情况

肠热症病人血清抗体出现情况:图示随发病周数推移,病人血清中相应抗体阳性检出率的动态变化,提示恢复期抗体效价明显高于发病早期,需采集双份血清比较。

本页源文件为曲线图,具体数值未提取到文字,建议对照原课件图示补充。

第23页:肥达反应结果判定

临界值
O效价≥1∶80、H效价≥1∶160、副伤寒H效价≥1∶80有诊断意义。
O、H效价均升高
已感染伤寒。
O、H效价均低于正常值
未感染沙门菌或免疫力低下。
O升高、H正常
某型沙门菌感染早期。
H升高、O正常
以往接种过疫苗或非特异性回忆反应。
双份血清
后一次较前一次抗体效价增高四倍以上有诊断价值。

第24页:肥达反应操作与结果示例

肥达反应操作与结果示例
标本伤寒O效价伤寒H效价甲型副伤寒H效价肖沙门菌H效价诊断意义
示例一1∶1601∶320<1∶20<1∶20感染伤寒沙门菌
示例二1∶80<1∶201∶160<1∶20感染甲型副伤寒沙门菌

操作:生理盐水+待检血清+诊断抗原,反应6小时后45℃观察结果;血清自1∶20起倍比稀释至1∶640。

第25页:沙门菌鉴定依据

菌落特征
肠道选择平板上无色半透明菌落。
KIA
K A - +/-。
MIU
动力(+)、吲哚(-)/(+)、尿酶(-)。
血清学
与A-F多价O诊断血清和相应O因子血清、H因子血清凝集。
注意
注意Vi抗原的存在;抗原结构相同的菌株应加做生化反应进行鉴别。

第26页:伤寒带菌者的检测

病原学方法
从标本中分离出病原菌。
血清学方法
血清中检出Vi抗体,效价≥1∶10。

第27页:几种沙门菌的主要生化反应

几种沙门菌的主要生化反应
菌种KIA斜面KIA底层气体H₂S动力
甲型副伤寒沙门菌KA+-/++
乙型副伤寒沙门菌KA+++
鼠伤寒沙门菌KA+++
丙型副伤寒沙门菌KA+++
猪霍乱沙门菌KA++/-+
伤寒沙门菌KA-+/-+
肠炎沙门菌KA+++

源文件该表符号粘连严重,吲哚、尿酶、甲基红、伏普、枸橼酸盐、苯丙氨酸、赖氨酸、鸟氨酸等列未能安全切分,本表仅还原可判读的KIA与动力部分,完整数据请对照原课件核实。

第28页:沙门菌菌落

沙门菌菌落:图示沙门菌在肠道选择培养基上形成的无色半透明、光滑型菌落,产H₂S的菌株菌落中心呈黑色。

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