第1页：分枝杆菌属
分枝杆菌属：本章讲述分枝杆菌属的共同特点与分类，重点为结核分枝杆菌、非典型分枝杆菌与麻风分枝杆菌。
第2页：分枝杆菌属主要特点
- 形态
- 一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。
- 细胞壁
- 细胞壁脂质含量高，主要为分枝菌酸。
- 染色性
- 具有抗酸性，革兰染色不易着色，常用抗酸染色。
- 培养
- 专性需氧，营养要求特殊，大多数生长缓慢。
- 致病特点
- 不产内、外毒素和侵袭性酶等致病物质，所致疾病呈慢性。
第3页：分枝杆菌属种类
- 结核分枝杆菌复合群：结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌
- 非典型分枝杆菌：光产色分枝杆菌、暗产色分枝杆菌、不产色分枝杆菌、迅速生长分枝杆菌
- 麻风分枝杆菌
第4页：结核分枝杆菌形态染色
- 形态
- 细长略弯，有分枝生长趋势；无芽孢、无鞭毛，部分菌株有荚膜。
- 染色
- 革兰染色阳性，不易着色；抗酸染色阳性。
第5页：结核分枝杆菌培养特性
- 生长条件
- 专性需氧、细胞内寄生菌、最适pH6.5～6.8、营养要求高；培养基含鸡蛋、马铃薯粉、甘油、孔雀绿等。
- 生长速度
- 生长缓慢。
- 改良罗氏培养基
- 菌落干燥、淡黄色、质地较硬，为R型菌落。
- 液体培养基
- 形成菌膜，有毒株呈索状生长。
第6页：结核分枝杆菌生化反应
- 生化反应
- 生化反应不活泼，不发酵糖类。
- 与非结核分枝杆菌鉴别
- 耐热触酶试验－（非结核分枝杆菌为＋）。
- 与牛分枝杆菌鉴别
- 烟酸试验＋（牛分枝杆菌为－）。
第7页：结核分枝杆菌抵抗力与变异性
- 抵抗力
- 特点为“三耐四敏”：耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿（1：13000）；对湿热、70％乙醇、紫外线、常用抗结核药物敏感，但长期使用易产生耐药性。
- 变异性
- 典型形态→多形性；R型菌落→S型菌落；有毒→无毒（用于制备疫苗）；抗结核药敏感→耐药。
第8页：结核分枝杆菌致病物质
- 脂质
- 索状因子：与该菌毒力有密切关系；磷脂；分枝菌酸：与抗酸性有关；蜡质D：具有佐剂作用；硫酸脑苷脂。
- 蛋白质
- 与菌体成分共同引起迟发型超敏反应。
- 糖类
- 参与免疫反应。
结核杆菌不产生内、外毒素，不产生侵袭性酶。
第9页：结核分枝杆菌所致疾病与免疫性
- 感染与疾病
- 经多途径感染，引起结核病，以肺结核多见。
- 感染类型
- 原发感染和继发感染。
- 免疫性
- 抗结核免疫以细胞免疫为主；属带菌免疫；抗结核免疫与Ⅳ型超敏反应同时出现。
第10页：结核菌素试验
- 原理
- 用结核菌素进行皮肤试验，以检测受试者对结核杆菌是否有细胞免疫及迟发型超敏反应。
- 结果判断
- ＜5mm为阴性；≥5mm为阳性；＞15mm为强阳性（根据注射部位是否出现红肿判断）。
- 应用
- 选择卡介苗接种对象；判断卡介苗接种效果；辅助诊断婴幼儿结核病；测定肿瘤患者细胞免疫状态。
第11页：结核分枝杆菌检验程序
结核分枝杆菌检验程序：标本可作核酸检测与抗体检测；经前处理后接种固体培养基与液体培养基，或接种小白鼠与豚鼠；取可疑菌落涂片抗酸染色镜检并作鉴定试验，脏器涂片镜检与抗酸染色亦可辅助判断，慢性生长菌与快速生长菌分别作菌种鉴定。
第12页：结核分枝杆菌涂片检查
- 直接涂片
- 薄涂片、厚涂片。
- 集菌涂片
- 沉淀集菌法、漂浮集菌法。
- 荧光显微镜检查法
- 金刚胺O染色，荧光显微镜下检查。
第13页：抗酸染色镜检结果报告方式
抗酸染色镜检结果报告方式| 报告方式 | 镜检结果 |
|---|
| － | 仔细检查300个视野未发现抗酸杆菌 |
|---|
| ± | 300个视野内发现1～2条抗酸菌 |
|---|
| ＋ | 100个视野内发现1～9条抗酸菌 |
|---|
| 2＋ | 10个视野内发现1～9条抗酸菌 |
|---|
| 3＋ | 每个视野内发现1～9条抗酸菌 |
|---|
| 4＋ | 每个视野内发现9条以上抗酸菌 |
|---|
第14页：结核分枝杆菌分离培养
- 标本前处理
- 目的：杀死杂菌，液化标本；方法：4％NaOH法、4％H₂SO₄法、胰酶-新洁尔灭法等。
- 培养基选择
- 罗氏培养基、米氏培养基、小川培养基等，接种后培养。
源文件此处写作“4％H2SO2法”，按常用方法应为4％硫酸（H₂SO₄）法，已按标准写法记录。
第15页：结核分枝杆菌培养结果记录与报告方法
结核分枝杆菌培养结果记录与报告方法| 报告方式 | 培养结果 |
|---|
| ＋ | 斜面20个菌落以上，占斜面1/4以下 |
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| 2＋ | 斜面上菌落生长面积占1/4以上，1/2以下 |
|---|
| 3＋ | 斜面上菌落面积占斜面1/2以上，3/4以下 |
|---|
| 4＋ | 斜面上菌落生长密集，成菌苔 |
|---|
第16页：非典型分枝杆菌
- 概念
- 指结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌，大多为环境中的腐生菌。
- 特性
- 对酸碱比较敏感；对常用抗结核药耐受。
- 致病性
- 为条件致病菌，艾滋病患者易感染鸟复合分枝杆菌。
第17页：麻风分枝杆菌生物学性状
- 性状
- 为抗酸杆菌，细胞内寄生。
- 麻风细胞
- 有麻风杆菌寄生的细胞呈泡沫状，称为麻风细胞。
- 培养
- 体外人工培养尚未成功；犰狳是动物感染模型。
第18页：麻风分枝杆菌临床意义与微检
- 感染与疾病
- 经呼吸道、接触感染，引起麻风病。
- 临床类型
- 瘤型麻风（开放型）：传染性强；结核样型（闭锁性）：传染性弱。
- 微生物学检验
- 标本涂片抗酸染色是诊断麻风的主要依据。
第19页：麻风杆菌
麻风杆菌：图示麻风分枝杆菌的抗酸染色镜下图，可见大量抗酸杆菌聚集于泡沫状的麻风细胞内。
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第20页：犰狳
犰狳：图示犰狳，是麻风分枝杆菌感染研究常用的动物感染模型。
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第21页：抗酸染色
- 染液组成
- 石炭酸复红、3％盐酸酒精、美兰。
- 染色步骤
- 石炭酸复红加温染5分钟，水洗；3％盐酸酒精脱色至无红色脱下为止，水洗；美蓝染1分钟，水洗，干后镜检。
- 染色结果
- 抗酸菌：红色；非抗酸菌：蓝色。
- 染色意义
- 区别抗酸菌与非抗酸菌。
第22页：结核分枝杆菌菌落
结核分枝杆菌菌落：图示结核分枝杆菌在改良罗氏培养基上形成的干燥、淡黄色、质地较硬的R型菌落。
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第23页：结核分枝杆菌（抗酸染色）
结核分枝杆菌（抗酸染色）：图示结核分枝杆菌抗酸染色的镜下形态，抗酸菌呈红色，菌体细长略弯。
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第24页：麻风病人
麻风病人：图示麻风病患者的临床表现，为麻风分枝杆菌经呼吸道或接触感染所致。
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