第1页：革兰阳性需氧或兼性厌氧杆菌
革兰阳性需氧或兼性厌氧杆菌：本章讲述棒状杆菌属中的白喉棒状杆菌，以及需氧芽孢杆菌属中的炭疽芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌等革兰阳性杆菌。
第2页：白喉棒状杆菌概述
- 概念
- 棒状杆菌属是引起白喉的病原体。
- 致病特点
- 主要以外毒素致病。
第3页：白喉棒状杆菌形态染色
- 形态与染色
- 革兰阳性细长、棒状杆菌，无芽孢、无荚膜。
- 排列
- 排列不规则，常呈V、L或栅栏状。
- 异染颗粒
- 胞浆中有异染颗粒，是重要的形态学特征。
- 异染颗粒染色法
- 阿伯脱染色、奈瑟染色。
第4页：白喉棒状杆菌培养特性
- 气体与营养
- 需氧或兼性厌氧；营养要求高。
- 血平板
- 灰白、狭窄溶血环。
- 鸡蛋斜面和血清斜面
- 生长迅速，灰白色有光泽菌落。
- 亚碲酸钾血平板
- 为选择培养基，菌落呈黑色，可分为重型、轻型或中间型。
第5页：白喉棒状杆菌生化反应与抗原结构
- 生化反应
- 分解葡萄糖、麦芽糖、果糖等；不分解乳糖，多数不分解蔗糖；靛基质试验－、明胶液化－、尿素分解－。
- K抗原
- 型特异性抗原，不耐热。
- O抗原
- 与分枝杆菌、奴卡菌有共同抗原。
第6页：白喉棒状杆菌临床意义
- 致病物质
- 白喉外毒素，由携带β-棒状杆菌噬菌体的白喉杆菌产生，可抑制蛋白质的合成。
- 所致疾病
- 经呼吸道飞沫感染，引起白喉；假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因，中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因。
- 免疫性
- 抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用。
- 锡克试验
- 用于检测机体有无白喉抗毒素免疫。
第7页：白喉棒状杆菌检验程序
白喉棒状杆菌检验程序：咽拭标本接种亚碲酸钾血平板观察菌落特征，同时作直接涂片革兰染色与异染颗粒染色；另接种血平板与吕氏血清斜面，取可疑菌落作涂片染色镜检、生化反应和毒力试验后报告结果。
第8页：白喉棒状杆菌标本采集和检查方法
- 标本采集
- 咽拭标本。
- 直接涂片
- 革兰染色观察形态、染色性；异染颗粒染色观察异染颗粒。
- 初步报告
- “检出形似白喉棒状杆菌”。
- 分离培养
- 吕氏斜面生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显；亚碲酸钾血平板形成黑色菌落。
第9页：白喉棒状杆菌毒力试验
- 意义
- 是鉴定白喉杆菌为致病菌株的重要依据。
- 方法
- 艾立克平板毒力试验、对流电泳法、协同凝集试验、动物实验。
第10页：需氧芽孢杆菌属概述
- 概念
- 是一大群能产生芽孢的革兰阳性大杆菌。
- 种类
- 炭疽芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、多粘杆菌等。
第11页：炭疽芽孢杆菌形态染色
- 形态与染色
- 革兰阳性粗大杆菌，两端平截，呈竹节状，链状排列。
- 特殊结构
- 可形成荚膜、芽孢，无鞭毛。
第12页：炭疽芽孢杆菌培养特性
- 气体与营养
- 需氧或兼性厌氧；营养要求不高，普通培养基上生长良好。
- 固体培养基
- 干燥、边缘不整的粗糙型菌落，低倍镜下边缘呈“卷发状”。
- 液体培养基
- 呈絮状生长。
- 明胶培养基
- 呈倒置的杉树状。
- 有毒株
- 在NaHCO₃培养基中形成荚膜，菌落呈粘液状，有拉丝。
第13页：炭疽芽孢杆菌抗原结构与抵抗力
- 炭疽毒素
- 由保护性抗原、致死因子、水肿因子组成，具有毒性作用；三种成分单独存在无致病作用。
- 菌体抗原
- 耐热、耐腐败，能与相应抗体结合发生沉淀反应，用于Ascoli试验。
- 抵抗力
- 本菌芽孢抵抗力强，芽孢对碘和氧化剂敏感。
- 耐药性
- 本菌对青霉素、氨基糖甙类、四环素类、环丙沙星敏感。
第14页：炭疽芽孢杆菌临床意义
- 致病物质
- 炭疽毒素、荚膜。
- 所致疾病
- 经多途径感染，引起炭疽病；临床类型有肺炭疽、肠炭疽、皮肤炭疽、败血症。
- 流行特点
- 属人畜共患传染病，死亡率高。
第15页：炭疽芽孢杆菌标本采集和处理
- 病人标本
- 血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等。
- 死亡病畜标本
- 死亡牲畜严禁宰杀。
- 污染物品
- 皮革、兽毛、土壤等。
- 标本处理
- 无杂菌污染标本直接接种；有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种。
第16页：炭疽芽孢杆菌检验程序
炭疽芽孢杆菌检验程序：已处理标本作直接涂片（革兰染色、荚膜染色）给出初步报告，同时增菌培养后分离接种血平板与戊烷脒琼脂平板；取可疑菌落作涂片染色镜检与鉴定试验，必要时作肉汤培养、动物实验，动物死亡后再分离培养，并以噬菌体裂解、串珠试验、青霉素抑制试验等确证。
第17页：炭疽芽孢杆菌检查方法
- 涂片染色镜检
- 革兰染色：涂片后升汞固定；发现革兰阳性粗大杆菌、有荚膜，竹节样排列可初步报告。
- 分离培养
- 污染的标本先加热处理再接种。
- 动物试验
- 注射部位胶样水肿，肝脾肿大，出血等。
第18页：炭疽芽孢杆菌鉴定试验
- 青霉素抑制试验
- 与其他需氧芽孢杆菌鉴别。
- 串珠试验
- 与其他类炭疽芽孢杆菌鉴别。
- 青霉素和串珠联合试验
- 提高鉴别的准确性。
- 噬菌体裂解试验
- 与类炭疽芽孢杆菌鉴别。
- 其他试验
- 重碳酸盐毒力试验、植物凝集素试验、Ascoli试验。
- 结果报告
- “经检验未发现炭疽芽孢杆菌”或“经检验发现炭疽芽孢杆菌”。
第19页：蜡样芽孢杆菌
- 形态与培养
- 革兰阳性杆菌，短链状排列，有芽孢和鞭毛；菌落粗糙呈蜡状，β溶血；液体培养基中呈混浊和菌膜生长。
- 生化反应
- 液化明胶、卵磷脂酶＋。
- 致病性
- 产生两种类型肠毒素，引起食物中毒。
- 微生物学检验
- 细菌培养鉴定、活菌计数定量（13～36×10⁶）。
