第1页：球菌的种类
- 革兰阳性球菌
- 葡萄球菌属、链球菌属（链球菌、肺炎链球菌）、肠球菌属、微球菌属等。
- 革兰阴性球菌
- 奈瑟菌属、布兰汉菌属。
第2页：四种革兰阳性菌的比较
四种革兰阳性菌的比较| 项目 | 葡萄球菌属 | 微球菌属 | 链球菌属 | 气球菌属 |
|---|
| 排列方式 | 葡萄串状、四联或成对 | 四联或成对 | 链状 | 成双或四联 |
|---|
| 触酶试验 | ＋ | ＋ | － | 弱＋ |
|---|
| 氧化／发酵 | 发酵 | 氧化 | 发酵 | 发酵 |
|---|
| 厌氧生长 | ＋ | 不生长 | ＋ | 弱 |
|---|
第3页：葡萄球菌属
- 地位
- 最常见的化脓性球菌，医务人员带菌率高。
- 主要特性
- 革兰阳性、葡萄串状排列，产生不同的脂溶性色素，触酶试验阳性，发酵葡萄糖。
- 主要致病菌
- 金黄色葡萄球菌。
第4页：葡萄球菌形态染色
- 染色性
- 革兰阳性球菌。
- 排列
- 葡萄串状。
- 特殊结构
- 无鞭毛、无芽胞，一般不形成荚膜。
第5页：葡萄球菌革兰染色镜下图
葡萄球菌革兰染色镜下图：镜下可见染成紫色的革兰阳性球菌，呈葡萄串状排列。
第6页：葡萄球菌培养特性（生长条件）
- 气体
- 需氧、兼性厌氧。
- 营养
- 营养要求不高，普通培养基上生长良好。
- 耐盐
- 10～15％NaCl上能生长。
第7页：葡萄球菌培养特性（生长现象）
- 液体培养基
- 均匀混浊、少许沉淀。
- 固体培养基
- 中等大小菌落，圆形、凸起、边缘整齐、光滑、湿润的S型菌落。
第8页：常用培养基及菌落特征
- 血平板（营养培养基）
- 中等大小、光滑型菌落、脂溶性色素、透明溶血环（致病葡萄球菌）。
- 高盐甘露醇平板（选择鉴别培养基）
- 淡橙黄色菌落（致病葡萄球菌）。
- 卵黄高盐琼脂平板（选择鉴别培养基）
- 菌落周围形成白色沉淀圈（致病葡萄球菌）。
第9页：葡萄球菌生化反应
- 触酶试验：＋
- 葡萄糖氧化发酵试验：发酵＋
- 甘露醇分解试验：＋（致病菌株）
第10页：葡萄球菌抗原构造
- 葡萄球菌A蛋白（SPA）
- 存在于金黄色葡萄球菌细胞壁，可与人和其它哺乳动物IgG Fc段非特异性结合，应用于协同凝集试验，并能抵抗吞噬细胞的吞噬。
- 多糖抗原
- 具有型的特异性，有助于金葡菌感染的诊断。
第11页：葡萄球菌分类和分型
- 葡萄球菌包括32种及亚种
- 根据产生色素的不同分类
- 根据产生凝固酶与否进行分类
- 按噬菌体分型法分类
第12页：葡萄球菌传统分类
葡萄球菌传统分类| 性状 | 金黄色葡萄球菌 | 表皮葡萄球菌 | 腐生葡萄球菌 |
|---|
| 产生溶血毒素 | ＋ | － | － |
|---|
| 产生凝固酶 | ＋ | － | － |
|---|
| 产生耐热DNA酶 | ＋ | － | － |
|---|
| 产生SPA | ＋ | － | － |
|---|
| 新生霉素敏感性 | S | S | R |
|---|
| 致病性 | 强 | 弱 | 无 |
|---|
第13页：金葡菌噬菌体分型
- 分型
- 分五个群，共22型。
- 意义
- 追踪传染源。
第14页：葡萄球菌抵抗力
- 特点
- 是抵抗力最强的无芽孢细菌，耐干燥，对龙胆紫敏感。
- 耐药性
- 易形成耐药性；耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为医院感染最常见的致病菌。
第15页：葡萄球菌致病物质
- 凝固酶
- 葡萄球菌溶素
- 杀白细胞素
- 肠毒素
- 剥脱毒素
- 毒性休克综合征毒素－1
第16页：凝固酶
- 游离凝固酶
- 采用试管法检测，与协同因子作用形成凝血酶，使纤维蛋白原变为纤维蛋白而血浆凝固。
- 结合凝固酶
- 位于菌体表面，采用玻片法检测，使纤维蛋白原变为纤维蛋白致细菌凝集。
- 意义
- 金葡菌凝固酶试验均为阳性，是鉴定金葡菌的重要标志。
第17页：葡萄球菌所致疾病
- 侵袭性疾病
- 化脓性感染：疖、痈、甲沟炎、中耳炎、脑膜炎、败血症等。
- 毒素性疾病
- 食物中毒、假膜性肠炎等。
第18页：葡萄球菌免疫性
免疫性：有一定天然免疫力；病后获得的免疫力作用不强、不持久。
第19页：葡萄球菌微生物学检验
微生物学检验：本节讲述葡萄球菌的标本采集、细菌鉴定基本程序、各类标本检验方法与鉴定依据。
第20页：细菌鉴定的基本程序
细菌鉴定的基本程序：标本→直接涂片革兰染色镜检→分离培养→取可疑菌落→鉴定试验和药敏试验→结果报告。
第21页：标本采集
标本采集：根据病种不同采集不同标本，包括脓液、创伤分泌液、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便。
第22页：葡萄球菌检验程序
检验程序：脓、穿刺液、尿液、痰及脑脊液标本直接分离培养，血液标本先增菌培养后分离培养，粪便与呕吐物接种选择培养基；随后取菌落涂片染色，做血浆凝固酶、耐热核酸酶、药敏试验等，最后报告结果。
第23页：金葡菌脓标本检验程序
金葡菌脓标本检验程序：脓标本→分离培养（血平板）→直接涂片染色→鉴定试验（血浆凝固酶、耐热核酸酶）和药敏试验→报告。
第24页：检验方法—直接镜检
- 方法
- 取标本直接涂片，革兰染色后镜检。
- 初步报告
- 「查见革兰阳性葡萄串状排列球菌，疑似葡萄球菌」「查见革兰阳性球菌」。
第25页：检验方法—分离培养（脓、痰、脑脊液）
- 标本处理
- 脓、痰、脑脊液标本接种血平板。
- 菌落特征
- 光滑型、中等大小、脂溶性色素、透明溶血环（β-溶血环）。
第26页：检验方法—分离培养（粪便）
- 标本处理
- 粪便标本接种高盐甘露醇平板。
- 菌落特征
- 光滑型、中等大小、淡黄色菌落。
第27页：检验方法—分离培养（血液）
- 标本处理
- 血标本→增菌（葡萄糖肉汤）→分离培养（血平板）。
- 生长现象
- 混浊、胶胨状凝固、溶血。
第28页：金葡菌的鉴定依据
- 血平板上金黄色色素、β-溶血环
- 血浆凝固酶＋
- 发酵甘露醇＋
- 耐热核酸酶＋
第29页：凝固酶阴性葡萄球菌
- 性质
- 条件致病菌。
- 临床意义
- 医院内感染的重要病原菌，对多种抗生素耐药。
第30页：MRSA与MRCNS的耐药性
MRSA与MRCNS：是院内感染的重要病原菌之一。MRSA不仅对青霉素类、头孢菌素类等β－内酰胺类药物耐药，也对四环素、红霉素、氯霉素、克林霉素及庆大霉素等常用药物耐药，对利福平和磺胺的耐药率也达30％，但通常对万古霉素敏感；两者常引起院内感染与播散，难于治疗和控制，病死率高。
第31页：MRSA的传播方式
传播方式：患者—医护人员—患者之间的传播，特别是医护人员手的传播；这些带菌者有可能成为传染源。病房医护人员带菌可能与长期在病房工作、接触患者较多有关。
第32页：血浆凝固酶试验
- 玻片法
- 检测结合型血浆凝固酶，简便快速。
- 试管法
- 检测游离型血浆凝固酶，灵敏。
- 试剂
- 生理盐水、待检细菌、新鲜兔血浆。
第33页：协同凝集试验
协同凝集试验：利用金葡菌细胞壁SPA与IgG Fc段非特异性结合，以金葡菌为载体检测相应抗原的凝集试验。
第34页：SPA的细胞定位图
SPA的细胞定位：图示葡萄球菌A蛋白（SPA）位于细胞壁层，并显示其与细胞膜、细胞质的位置关系。
