第1页：厌氧菌概念
- 概念
- 是一大群必须在无氧环境条件下才能生长繁殖的细菌。
- 特点
- 种类多、分布广；感染可发生于人体各个部位。
第2页：厌氧菌特点
芽孢厌氧菌与无芽孢厌氧菌的特点比较| 特点 | 芽孢厌氧菌 | 无芽孢厌氧菌 |
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| 种类 | 1个菌属 | 40多属 |
|---|
| 分布 | 自然界 | 人和动物体内 |
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| 致病 | 外源性感染，多以外毒素致病 | 内源性感染，多为条件致病菌 |
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第3页：厌氧菌感染的临床及细菌学特征
- 感染发生于黏膜附近
- 深部外伤感染
- 局部有气体产生
- 分泌物有恶臭或暗血红色
- 某些抗生素治疗无效的感染
- 标本直接涂片细菌染色不均，镜检见细菌，需氧培养无细菌生长
第4页：厌氧菌感染的原因
- 局部形成厌氧微环境
- 局部或全身免疫功能下降
- 菌群失调
- 寄居部位发生改变
第5页：厌氧菌标本采集与送检
- 采集原则
- 采集部位恰当，正确采集，避免污染，严格厌氧，及时送检。
- 运送方法
- 针筒运送法、无氧小瓶运送法、标本充盈运送法、组织块运送法、厌氧袋运送法、棉拭运送法。
第6页：厌氧菌常用培养基
- 非选择性培养基
- 心脑浸液＋5％脱纤维羊血＋氯化血红素＋维生素K。
- 选择培养基
- 七叶苷胆汁平板（培养脆弱类杆菌）、卡那万古冻溶血琼脂平板、FS培养基（培养梭杆菌属）、VS培养基（培养韦容球菌）、CCFA培养基（培养艰难梭菌）。
第7页：厌氧培养法
第8页：厌氧菌检验程序
厌氧菌检验程序：标本增菌后分离培养，分别作需氧培养与厌氧培养；厌氧培养生长而需氧培养不生长者为专性厌氧菌，依据形态染色、菌落特征、生化反应、药敏试验和气相色谱分析进行鉴定。血标本亦可作需氧与厌氧培养对照。
第9页：厌氧菌标本观察和涂片镜检
- 肉眼观察
- 观察标本的性状：脓性、带血、气味、硫磺样颗粒、坏死组织等。
- 涂片染色镜检
- 估计细菌数量、观察细菌形态与染色性，以便选择培养基和培养方法。
第10页：厌氧菌分离培养
- 初代培养
- 厌氧培养48h。
- 次代培养
- 挑5个以上不同菌落做耐氧试验，每个菌落接种2个平板，分别进行需氧培养和厌氧培养；挑取有氧培养中不生长、厌氧培养生长的菌落进行鉴定。
第11页：厌氧菌鉴定
- 菌体形态与菌落性状
- 观察形状、色素、荧光、溶血等。
- 药敏鉴定试验
- 卡那霉素：梭杆菌属多敏感，类杆菌属多耐药；聚茴香脑磺酸钠：快速鉴定厌氧消化链球菌。
- 其他
- 生化反应、气相色谱技术。
第12页：破伤风芽孢梭菌主要性状
- 形态染色
- 革兰阳性细长杆菌，有周鞭毛；芽孢位于菌体顶端，圆形、大于菌体，呈“火柴棒状”。
- 培养特性
- 专性厌氧；在血平板上呈扩散生长，菌落边缘不整齐，呈羽毛状；在疱肉培养基中，肉渣变黑，有腐败恶臭味。
第13页：破伤风芽孢梭菌临床意义
- 致病物质
- 破伤风痉挛毒素，属神经毒素，阻止中枢抑制性神经介质的释放，导致骨骼肌强直性痉挛。
- 所致疾病
- 破伤风。
- 感染途径与条件
- 经伤口感染，伤口内形成厌氧微环境为致病条件。
第14页：破伤风芽孢梭菌检查方法
- 显微镜检查
- 观察菌体形态、芽孢特征。
- 分离培养
- 厌氧培养，观察菌落特征。
- 动物实验
- 毒力试验：毒素注射小鼠→小鼠出现症状；保护试验：毒素＋抗毒素→注射小鼠→小鼠无症状。
第15页：产气荚膜梭菌形态与培养
- 形态染色
- 革兰阳性粗大杆菌，有荚膜；芽孢位于菌体中央或次极端，小于菌体，无鞭毛。
- 培养特性
- 专性厌氧；血平板菌落圆形、凸起、光滑、湿润，有双层溶血环；卵黄琼脂平板出现Nagler反应。
- 牛乳培养基
- 出现“汹涌发酵”现象。
- 生化反应
- 生化反应活泼，分解多种糖。
第16页：产气荚膜梭菌临床意义
- 致病物质
- 荚膜、多种毒素和侵袭性酶。
- 所致疾病
- 气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎。
第17页：产气荚膜梭菌检查方法
- 标本涂片染色镜检
- 观察形态、染色性、荚膜。
- 分离培养
- 注意观察双圈溶血环。
- 生化反应
- 汹涌发酵现象。
- 动物实验
- 培养物→小鼠腹腔注射→处死小鼠→解剖小鼠→肉眼观察泡沫肝＋涂片染色镜检。
第18页：肉毒梭菌形态与培养
- 形态染色
- 革兰阳性粗大杆菌，有鞭毛；芽孢位于菌体次极端，大于菌体，呈“网球拍状”；无荚膜。
- 培养特性
- 专性厌氧；菌落大而不规则；消化肉渣，肉渣变黑，有腐败恶臭。
第19页：肉毒梭菌临床意义
- 致病物质
- 肉毒毒素，为神经毒素，引起肌肉弛缓型麻痹；毒素分为8个型别，我国以A型最多见。
- 所致疾病
- 肉毒食物中毒、婴儿肉毒病。
第20页：肉毒梭菌检验程序
肉毒梭菌检验程序：标本先作疱肉培养与分离培养，取可疑菌落作革兰染色、生化反应，并作毒素测定后报告结果。
第21页：肉毒梭菌检验方法
- 标本采集
- 可疑食物、呕吐物等。
- 分离培养
- 疱肉培养、分离培养。
- 毒素测定
- 毒素定性检验：毒素注射小鼠→小鼠出现症状；毒素＋抗毒素→注射小鼠→小鼠无症状；并作毒素型别鉴定。
- 鉴定依据
- 形态、芽孢特征、疱肉培养物、肉毒毒素。
第22页：艰难梭菌
- 形态与培养
- 革兰阳性粗大杆菌，芽孢位于菌体次极端，无荚膜；严格厌氧；在果糖卵黄琼脂平板上形成粗糙的黄色菌落。
- 生化反应
- 脂酶－、卵磷脂酶－。
- 致病性
- 为人和动物肠道中的正常菌群，肠道菌群失调时可引起伪膜性肠炎。
- 微生物学检验
- 粪便标本直接涂片检查见优势生长的革兰阳性粗大杆菌并有芽孢，具有诊断价值。
第23页：革兰阴性无芽孢厌氧菌
- 类杆菌属
- 肠道和女性生殖道主要菌群，是临床最重要的无芽孢厌氧菌。
- 其他菌属
- 普雷沃菌属、卟啉单胞菌属。
- 梭杆菌属
- 菌体细长，两端尖细，中间膨大，革兰染色可见菌体中有紫色颗粒。
第24页：革兰阳性无芽孢厌氧菌
- 丙酸杆菌属
- 痤疮丙酸杆菌寄居人和动物皮肤、皮脂腺等部位，与痤疮有关。
- 优杆菌属
- 常见于口腔与肠道。
- 乳杆菌属
- 女性生殖道主要正常菌群。
- 双歧杆菌属
- 人和动物肠道中重要的正常菌群，对维持人体内微生态平衡发挥重要作用。
第25页：厌氧性球菌
- 消化球菌属：革兰阳性球菌
- 消化链球菌属：革兰阳性球菌
- 韦荣球菌属：革兰阴性球菌
第26页：测验1：正常人肠道中数量最多的细菌
测验1：正常人肠道中数量最多的细菌是
- A 大肠埃希菌
- B 乳酸杆菌
- C 粪肠球菌
- D 无芽孢厌氧菌
- E 芽孢厌氧菌
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第27页：测验2：无芽孢厌氧菌感染检出率最高者
测验2：在无芽孢厌氧菌感染中，临床标本检出阳性率最高的是：
- A 脆弱类杆菌
- B 双歧杆菌
- C 丙酸杆菌
- D 梭形杆菌
- E 消化链球菌
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第28页：测验3：对厌氧要求不严格的细菌
测验3：下列对厌氧要求不严格的细菌是
- A 双歧杆菌
- B 产气荚膜梭菌
- C 破伤风梭菌
- D 艰难梭菌
- E 产黑色素类普雷沃菌
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第29页：测验4：条件致病菌的判断
测验4：下列哪种细菌是条件致病菌
- A 脆弱类杆菌
- B 淋病奈瑟菌
- C 溶血性链球菌
- D 肠产毒素性大肠杆菌
- E 乙型副伤寒沙门菌
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第30页：测验5：牛乳培养基「汹涌发酵」的细菌
测验5：在牛乳培养基产生“汹涌发酵”现象的是
- A 破伤风梭菌
- B 产气荚膜梭菌
- C 肉毒梭菌
- D 艰难梭菌
- E 诺维梭菌
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第31页：测验6：艰难梭菌特点
测验6：关于艰难梭菌特点错误的是
- A 革兰阳性粗大杆菌
- B 为肠道内正常菌群
- C 在组织和培养时不易形成芽孢
- D 是伪膜性肠炎最常见的病原菌
- E 所致疾病与长期使用抗生素有关
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第32页：测验7：两端尖细中间膨大的细菌
测验7：菌体细长，两端尖细，中间膨大，菌体中常有紫色颗粒（革兰染色），可能的细菌是
- A 产气荚膜梭菌
- B 具核梭杆菌
- C 放线菌
- D 双歧杆菌
- E 脆弱类杆菌
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第33页：Nagler反应
Nagler反应：在卵黄琼脂平板上，产气荚膜梭菌产生的卵磷脂酶分解卵磷脂，菌落周围出现白色混浊圈；若培养基中加入相应抗体，则不出现混浊，此现象称为Nagler反应。
第34页：「汹涌发酵」现象
“汹涌发酵”现象：产气荚膜梭菌在牛乳培养基中分解乳糖产酸使酪蛋白凝固，同时产生的大量气体使凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，气势凶猛，称为“汹涌发酵”现象。
第35页：破伤风梭菌
破伤风梭菌：图示破伤风梭菌，为革兰阳性细长杆菌，芽孢位于菌体顶端、大于菌体，呈火柴棒状。
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第36页：双圈溶血环
双圈溶血环：图示产气荚膜梭菌在血平板上形成的双圈溶血环，内层为完全溶血、外层为不完全溶血。
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第37页：产气荚膜梭菌（革兰染色）
产气荚膜梭菌（革兰染色）：图示产气荚膜梭菌革兰染色镜下图，为有荚膜的革兰阳性粗大杆菌。
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第38页：肉毒梭菌（革兰染色）
肉毒梭菌（革兰染色）：图示肉毒梭菌革兰染色镜下图，芽孢位于次极端、大于菌体，呈网球拍状。
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第39页：气性坏疽
气性坏疽：图示气性坏疽的临床表现，主要由产气荚膜梭菌等厌氧芽胞梭菌感染引起。
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第40页：破伤风
破伤风：图示破伤风的临床表现，由破伤风痉挛毒素阻止抑制性神经介质释放、导致骨骼肌强直性痉挛所致。
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