第1页:病毒的概念
病毒:病毒是个体微小,结构简单,只含一种核酸,在细胞内以复制方式进行增殖的非细胞型微生物。
第2页:病毒特征
- 体积微小:能通过滤菌器,需用电子显微镜观察
- 非细胞结构:无细胞结构,由蛋白质和核酸组成
- 核酸类型单一:只含一种核酸
- 严格的细胞内寄生
- 以复制方式增殖
- 抵抗力特殊:耐冷不耐热,对抗生素不敏感
第3页:病毒的基本性状和分类
病毒的基本性状和分类:本节讲述病毒的形态、结构和化学组成。
第4页:病毒的大小与形态
- 病毒体
- 指完整的、成熟的具有感染性的病毒颗粒。
- 测量单位
- 纳米(nm)。
- 形态
- 球形、杆形、丝状、弹状、砖形、蝌蚪形等。
- 研究方法
- 电子显微镜、超滤膜法、超速离心法。
第5页:病毒的结构
- 基本结构(核衣壳):核心、衣壳(壳粒→衣壳)
- 辅助结构:包膜
第6页:核心
- 只含一种核酸,DNA或RNA,分别称DNA病毒和RNA病毒
- 控制病毒的增殖、变异、毒力等性状
- 除去病毒衣壳仍具有感染性的核酸称感染性核酸
第7页:衣壳
- 化学成分
- 为蛋白质。
- 构型
- 螺旋对称、20面体立体对称、复合对称。
- 功能
- 保护核酸;具有抗原性,能刺激机体产生免疫应答;通过与宿主细胞表面受体结合参与感染。
第8页:包膜
- 化学成分
- 类脂、多糖和蛋白质;类脂与多糖来自宿主细胞,蛋白质由病毒基因编码。
- 结构
- 包膜蛋白形成刺突。
- 作用
- 具有抗原性;参与病毒感染;可引起机体发热。
第9页:病毒的增殖
病毒的增殖:本节讲述病毒的增殖周期。
第10页:病毒的增殖周期
第11页:病毒增殖周期各阶段要点
- 吸附
- 特异性吸附。
- 穿入
- 通过胞饮、融合、转位作用方式。
- 脱壳
- 脱去衣壳释放核酸。
- 生物合成
- 病毒mRNA的转录、复制子代病毒核酸、转译子代病毒蛋白。
- 组装与释放
- 芽生释放、破胞释放。
第12页:病毒增殖示意图
病毒增殖示意图:依次显示病毒吸附宿主细胞、穿入、脱壳、生物合成、组装与释放的过程。
第13页:病毒的异常增殖和干扰现象
- 异常增殖
- 顿挫感染、缺陷病毒。
- 干扰现象
- 两种病毒同时或先后感染同一宿主细胞,可发生一种病毒干扰另一种病毒增殖的现象。
- 干扰机理
- 诱导细胞产生干扰素、竞争干扰。
- 干扰类型
- 同种干扰、异种干扰、自身干扰。
- 实际意义
- 指导疫苗的合理使用。
第14页:理化因素对病毒的影响
- 温度:病毒耐冷不耐热,应低温保存病毒
- 辐射:破坏病毒核酸结构,导致病毒灭活
- 脂溶剂:有包膜病毒对脂溶剂敏感
- 消毒剂:可灭活病毒
- 抗生素:病毒对抗生素不敏感,抗生素治疗病毒性疾病无效
第15页:病毒的变异
- 变异类型
- 毒力变异、耐药性变异、抗原性变异、温度敏感性变异。
- 变异机制
- 基因突变、基因重组。
第16页:病毒的分类
- 根据宿主不同分类
- 动物病毒、植物病毒、昆虫病毒、细菌病毒。
- 根据核酸类型分类
- DNA病毒、RNA病毒。
- 根据有无包膜分类
- 有包膜病毒、无包膜病毒。
- 临床分类
- 呼吸道病毒、消化道病毒、肝炎病毒、虫媒病毒、出血热病毒、肿瘤病毒。
第17页:亚病毒
- 类病毒
- 只有单股RNA,无蛋白质衣壳,主要引起植物疾病。
- 朊粒
- 只含具有感染性的蛋白质(分子量3.0×10⁴),与老年性痴呆、多发性硬化症、脑组织海绵状淀粉样变(疯牛病)等有关。
第18页:病毒的感染与免疫
病毒的感染与免疫:本章讲述病毒的感染方式、感染类型与抗病毒免疫。
第19页:病毒的感染方式
- 水平传播
- 通过黏膜表面:呼吸道、消化道、泌尿生殖道;通过皮肤传播:媒介昆虫叮咬皮肤;医源性传播:经输血、注射、拔牙、手术等。
- 垂直传播
- 经胎盘传播、经产道传播。
第20页:病毒感染的类型
- 隐性感染
- 成为病毒携带者;获得免疫。
- 显性感染
- 急性感染;持续性感染,包括慢性感染、潜伏感染与慢发感染。
第21页:病毒对宿主细胞的直接作用
- 影响细胞的生命力
- 杀细胞感染
- 非杀细胞感染
- 细胞融合
- 形成包涵体:有些病毒感染的细胞在普通光学显微镜下可观察到胞浆或胞核内出现圆形或卵圆形的斑块状结构
- 细胞转化
- 细胞凋亡
第22页:病毒感染的免疫病理损伤
- 体液免疫损伤
- 通过Ⅱ、Ⅲ型超敏反应引起损伤。
- 细胞免疫损伤
- 通过Tc细胞和Th1细胞杀伤病毒感染的细胞,同时造成组织细胞损伤。
- 病毒直接损伤淋巴细胞或淋巴器官
- 艾滋病毒直接杀伤CD4T细胞。
第23页:抗病毒免疫
抗病毒免疫:本节讲述干扰素、NK细胞与特异性免疫的抗病毒作用。
第24页:干扰素
- 概念
- 干扰素是个体出生后,由病毒或干扰素诱导剂刺激多种细胞所产生的一种糖蛋白。
- 种类
- Ⅰ型干扰素:α干扰素、β干扰素;Ⅱ型干扰素:γ干扰素(免疫干扰素)。
- 生物学活性
- 抗病毒、免疫调节、抗肿瘤。
第25页:NK细胞
- 非特异性杀伤,不受MHC限制
- 通过依赖抗体的杀伤作用(ADCC)
- 不依赖抗体的杀伤作用(自然杀伤)
- 干扰素可调节NK细胞的杀伤作用
第26页:抗病毒特异性免疫
- 体液免疫的保护作用
- 中和抗体:阻止病毒吸附;依赖抗体的细胞毒作用(ADCC):杀伤病毒寄生的细胞。
- 细胞免疫的保护作用
- TH1:释放细胞因子;效应Tc(CTL):特异性杀伤病毒寄生的细胞。
第27页:病毒微生物学检查
- 标本采集与送检
- 用于培养:注意时间、部位、处理、保存;血清学诊断:双份血清标本。
- 检查方法
- 显微镜观察(电镜、光镜);血清学(查病毒标记物、检测特异性抗体);病毒基因检测。
第28页:病毒的分离培养
病毒的分离培养:组织细胞培养是将组织或细胞模拟体内的生理条件在试管或培养瓶内培养,使其生存或生长,称组织培养。
第29页:组织培养方法
- 原代培养:如原代猴肾细胞等
- 次代培养:二倍体细胞株,如人胚肺成纤维细胞传代株W1-38
- 传代细胞系:多为肿瘤细胞或突变的二倍体细胞,如Hela细胞、Hep-2细胞等
第30页:鸡胚接种
- 接种部位
- 卵黄囊接种、尿囊腔接种、绒毛尿囊膜接种。
- 评价
- 鸡胚接种具有来源充足、操作简单等优点,也存在部分病毒不敏感等缺点。
第31页:动物接种
动物接种:动物接种是病毒分离培养的方法之一,根据病毒感染动物的表现判断病毒的增殖。
第32页:病毒的初步鉴定
- 动物感染
- 根据病毒感染动物的表现初步判断。
- 鸡胚接种
- 根据接种部位不同,收获不同材料进行观察。
- 细胞培养
- 观察细胞病变效应、红细胞吸附、干扰作用。
- 其他
- 物理化学实验。
第33页:病毒的最后鉴定
- 中和试验
- 已知抗体+待检病毒→细胞培养→观察有无细胞病变。
- 交叉保护试验
- 病毒免疫动物→2周后,用标准动物作攻击试验;不接种病毒的动物→2周后,用标准动物作攻击试验。
第34页:病毒的血清学诊断
- 标本采集
- 早期和恢复期双份血清;急性期单份血清IgM的测定;双份血清的IgG测定。
- 常用方法
- 中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验、免疫荧光试验、酶免试验、胶乳凝集试验、间接血凝试验。
第35页:病毒性疾病特异性预防
- 人工主动免疫
- 灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗。
- 人工被动免疫
- 抗病毒免疫血清、丙球。
第36页:病毒性疾病药物治疗
- 金刚烷胺:抑制病毒脱壳,用于预防感冒
- 病毒蛋白酶的抑制物:indinavir
- 核苷类药物:疱疹净、阿昔洛韦
- 免疫制剂:特异性抗体、治疗性疫苗
- 其他:干扰素及干扰素诱生剂、中草药;抗病毒基因治疗:asODN、asON、核酶
第37页:补体结合试验
补体结合试验:抗原-抗体+补体+绵羊红细胞-溶血素;病毒与抗体对应时补体被结合,不溶血;病毒与抗体不对应时补体游离,发生溶血。
第38页:血凝试验和血凝抑制试验
- 血凝试验
- 血凝素+鸡红细胞→红细胞凝集。
- 血凝抑制试验
- 血凝素-抗体+鸡红细胞→红细胞不凝集。
第39页:20面体立体对称衣壳
20面体立体对称:图示病毒衣壳的20面体立体对称构型,壳粒按二十面体对称方式排列。
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第40页:螺旋对称(RNA与壳粒)
RNA与壳粒(螺旋对称):图示病毒核酸RNA与壳粒(Capsomere)按螺旋对称方式排列形成的核衣壳。
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第41页:病毒分离培养三大培养技术
病毒的分离培养三大培养技术:图示动物接种、鸡胚接种与细胞培养三种病毒分离培养方法。
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第42页:细胞病变效应(CPE)
细胞病变效应(CPE):病毒在细胞内增殖引起细胞形态学改变,是病毒在细胞培养中增殖的重要观察指标。
第43页:干扰素的产生及作用机制
干扰素的产生及作用机制:图示病毒感染细胞后诱导细胞产生干扰素,干扰素作用于邻近未感染细胞,使其产生抗病毒蛋白而建立抗病毒状态。
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第44页:病毒结构示意图
病毒结构示意图:图示病毒的核心、衣壳与包膜,并对比无包膜病毒与有包膜病毒的结构差异。
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第45页:病毒的吸附
吸附:图示病毒增殖的第一步,病毒表面结构特异性地与宿主细胞表面受体结合。
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第46页:病毒释放示意图
病毒释放示意图:图示子代病毒以芽生释放或破胞释放两种方式从宿主细胞释放。
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第47页:病毒形态
病毒形态:图示病毒的多种形态,包括球形、杆形、丝状、弹状、砖形与蝌蚪形等。
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第48页:病毒体结构模式
病毒体结构模式:图示完整成熟的病毒体结构模式,显示核心、衣壳与包膜等组成部分。
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第49页:DNA病毒的合成
DNA病毒的合成:亲代DNA在依赖DNA的RNA聚合酶作用下转录mRNA,转译早期蛋白(DNA聚合酶);亲代DNA复制子代DNA,再转录子代mRNA并转译晚期蛋白(衣壳蛋白)。
第50页:RNA病毒的合成
RNA病毒的合成:单股正链RNA直接作为mRNA转译早期蛋白(RNA多聚酶),再复制子代RNA并转译晚期蛋白(衣壳蛋白);单股负链RNA先转录出正链RNA(mRNA)后再复制与转译。
第51页:逆转录病毒的合成
逆转录病毒的合成:病毒RNA在逆转录酶作用下合成互补DNA,形成RNA:DNA杂交体与双股DNA,整合入宿主细胞DNA后再转录子代RNA。