首页生物学微生物学微生物学检验 11 奈瑟菌属、卡他布兰汉菌属.ppt

11 奈瑟菌属、卡他布兰汉菌属.ppt

页数:34页文件大小:207.5 KB来源: 微生物学检验ppt课件

本课件讲述革兰阴性球菌奈瑟菌属,重点是脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌。先概述本属共同特点与两个致病菌种,随后分别讲述脑膜炎奈瑟菌的形态染色、培养特性、生化反应、抗原构造与分型、抵抗力、临床意义及微生物学检验程序,再讲述淋病奈瑟菌的相应内容,并给出药敏试验判定标准与两者的鉴定依据。

奈瑟菌属共同特点页,列出革兰阴性球菌、无芽孢无鞭毛及触酶与氧化酶阳性的属内共同特征
脑膜炎奈瑟菌章节起始页,点明该菌是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌
脑膜炎奈瑟菌电镜图,显示肾形成双排列的菌体及其表面的荚膜与菌毛结构
查看本课件的文字版(共 34 页,供检索与复制)

第1页:奈瑟菌属共同特点

  • 共同点:革兰阴性球菌,单个或成双排列,无芽孢、无鞭毛,有菌毛。
  • 触酶试验(+)、氧化酶试验(+)。
  • 本属有脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9种,致病菌为脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌。

第2页:脑膜炎奈瑟菌

脑膜炎奈瑟菌:是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌。

第3页:脑膜炎奈瑟菌电镜图

电镜下可见脑膜炎奈瑟菌呈肾形、成双排列,新分离菌株表面可见菌毛与荚膜。

第4页:脑膜炎奈瑟菌形态染色

  • 革兰阴性,肾形,成双排列。
  • 新分离菌株有菌毛和荚膜。
  • 在患者脑脊液中位于中性粒细胞内。

第5页:脑膜炎奈瑟菌培养特性

  • 营养要求高:在血液、血清培养基中才能生长。
  • 专性需氧:初次分离需5%CO2。
  • 最适温度35℃,低于30℃或高于40℃不生长。
  • 可产生自溶酶。

第6页:常用培养基及生长现象

巧克力色血平板(营养培养基)
菌落无色、光滑湿润、边缘整齐、有光泽,似露水珠,易乳化。
卵黄双抗平板EPV(选择平板)
用于含杂菌的鼻咽拭标本的分离培养,菌落无色、光滑湿润、较大、扁平。

第7页:脑膜炎奈瑟菌生化反应

  • 氧化酶试验阳性。
  • 分解葡萄糖、麦芽糖。
  • 不分解蔗糖。

第8页:抗原构造与分型

菌体抗原
无特异性。
核蛋白抗原
无特异性,与细菌毒力有关。
表面荚膜多糖抗原
具有群特异性,据此将该菌分为13个血清群;我国以A群为主,占95%。

第9页:脑膜炎奈瑟菌抵抗力

  • 抵抗力弱。
  • 对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感。
  • 能产生自溶酶。

第10页:脑膜炎奈瑟菌临床意义

传染源
病人、带菌者。
传染途径
呼吸道飞沫传染。
致病物质
内毒素、荚膜、菌毛。
所致疾病
流行性脑脊髓膜炎,表现为上呼吸道症状(鼻咽炎等)、全身感染症状(高热、出血点或瘀血点)与脑膜炎症状(头痛、呕吐、颈项强直)。
特异性预防
接种脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖疫苗。

第11页:脑膜炎奈瑟菌微生物检验

微生物检验:本节讲述脑膜炎奈瑟菌的标本采集、检验程序与鉴定方法。

第12页:脑膜炎奈瑟菌标本采集

  • 流脑病人:血液、脑脊液、瘀血点。
  • 带菌者检查:鼻咽拭。

第13页:脑膜炎奈瑟菌检验程序

检验程序:脑脊液、瘀血点做直接涂片染色;血液经增菌培养后转种分离培养;鼻咽拭子直接分离培养。

  • 分离培养:巧克力色平板(血液、脑脊液)或卵黄双抗平板(鼻咽拭子)。
  • 可疑菌落:涂片染色、生化反应、生长特性、血清学分群。
  • 可疑菌落盐水自凝者报告阴性,无自凝者作初步报告。

第14页:脑脊液与瘀血点直接涂片镜检

直接涂片镜检:取脑脊液沉淀物、瘀血点涂片,革兰染色镜检。若发现中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌、呈肾形,可作初步诊断。

第15页:脑膜炎奈瑟菌培养检查

  • 增菌培养:血液、脑脊液接种增菌液,5%CO2培养。
  • 分离培养:将增菌培养物转种巧克力色平板,置5%CO2环境,35℃培养18~24小时。
  • 可疑菌落:观察菌落特征,取可疑菌落涂片染色镜检,并作盐水自凝试验,盐水中无自凝。

第16页:脑膜炎奈瑟菌鉴定试验

  • 形态染色:革兰阴性、肾形、成双排列。
  • 氧化酶(+)、触酶(+)。
  • 糖代谢试验:发酵葡萄糖、麦芽糖。
  • 生长特性试验:生长温度、营养需求。
  • 血清学鉴定与分群:可与相应诊断血清发生凝集。

第17页:脑膜炎奈瑟菌快速鉴定试验

荧光抗体法
直接法:荧光素-流脑抗体+待检物;间接法:流脑抗体+待检物+羊抗兔荧光抗体,均可见荧光。
间接血凝试验
流脑多糖抗原致敏红细胞+待检血清。
反向血凝试验
流脑抗体致敏红细胞+标本中可溶性流脑抗原。

第18页:脑膜炎奈瑟菌鉴定依据

  • 形态染色:革兰阴性球菌,成双排列。
  • 菌落典型:光滑型,易乳化,盐水中无自凝。
  • 生化反应:氧化酶+,发酵葡萄糖、麦芽糖。
  • 生长条件:普通培养基不生长。
  • 血清学:与相应分群血清凝集。

原课件本页将触酶记为阴性,与本课件前述「触酶试验(+)」及奈瑟菌属共同特点不一致,奈瑟菌属触酶应为阳性,此处以属的共同特征为准。

第19页:与卡他布兰汉菌鉴别

  • 形态与奈瑟菌相似。
  • 18~24℃环境能生长。
  • 普通培养基中可以生长。
  • 具有DNA酶。

第20页:淋病奈瑟菌

淋病奈瑟菌:奈瑟菌属的另一个致病菌种,本节讲述其生物学性状、临床意义与微生物学检验。

第21页:淋病奈瑟菌形态染色

  • 革兰阴性,肾形,成双排列,有荚膜、菌毛。
  • 淋球菌多侵犯尿道粘膜,急性期常位于中性粒细胞内,慢性期则多在细胞外。
  • 根据菌毛分型:T1~T5;T1、T2有菌毛,T3、T4、T5无菌毛。

第22页:淋球菌革兰染色图

分泌物涂片革兰染色镜检,可见中性粒细胞内革兰阴性双球菌,呈肾形、成双排列。

第23页:淋病奈瑟菌生长条件

  • 营养要求高。
  • 专性需氧。
  • 需5~10%CO2。
  • 低于30℃或高于36.5℃不生长。

第24页:淋病奈瑟菌培养基与菌落

巧克力色培养基
圆形、光滑、湿润、灰白色、易乳化的菌落。
TM培养基
含万古霉素、多粘菌素、制霉菌素的选择培养基。
MTM培养基
改良的TM培养基。

第25页:淋病奈瑟菌生化反应

  • 氧化酶、触酶:+。
  • 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖:+、-、-(仅分解葡萄糖)。
  • 30%H2O2试验:+。

第26页:淋病奈瑟菌抵抗力

  • 抵抗力极弱。
  • 对温度变化敏感。
  • 对干燥敏感。
  • 对消毒剂敏感。
  • 易形成耐药性。

第27页:淋病奈瑟菌临床意义

致病物质
菌毛、IgA蛋白酶。
所致疾病
性接触引起淋病;产道感染引起新生儿淋病性眼结膜炎。

第28页:淋病奈瑟菌标本采集

  • 正确取材:女性病人标本取宫颈内膜分泌物。
  • 男性病人标本取尿道口脓性分泌物。

第29页:淋病奈瑟菌检验程序

检验程序:分泌物标本分别作直接涂片染色与分离培养。

  • 直接涂片染色:镜下观察革兰阴性双球菌的形态与位置。
  • 分离培养:取可疑菌落作涂片染色、生化反应与生长特性观察。
  • 综合上述结果发出初步报告。

第30页:分泌物直接涂片

直接涂片:分泌物涂片做革兰染色,急性炎症期中性粒细胞内可见革兰阴性双球菌。

  • 阳性率:男性90%、女性50%~60%。
  • 无症状淋病或轻症患者,尤其是女性,检出率低,只做涂片可漏诊40%以上。

第31页:淋病奈瑟菌培养检查

  • 取材部位准确。
  • 培养基预温,立即接种,最好床边接种。
  • 选用合适的培养基,CO2环境培养。
  • 取氧化酶阳性菌落做下一步鉴定。

第32页:淋病奈瑟菌鉴定试验

  • 氧化酶试验。
  • 糖分解试验(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖)。
  • 30%过氧化氢试验。

第33页:淋病奈瑟菌药敏试验

药敏试验:下表列出判定标准。

淋病奈瑟菌药敏试验纸片含药量与判定标准
抗生素纸片含药量敏感(mm)中度敏感(mm)耐药(mm)
青霉素2.4μ(4U)≥3020~29≤19
壮观霉素100μg≥18—≤14
头孢呋肟10μg≥3020~29≤19

原课件壮观霉素未给出中度敏感区间,故该单元格以「—」占位。

第34页:淋病奈瑟菌鉴定依据

  • 形态染色典型:革兰阴性球菌。
  • 培养特性:光滑、湿润、易乳化菌落。
  • 生化反应:氧化酶阳性、仅分解葡萄糖。
顶部目录