第1页:奈瑟菌属共同特点
- 共同点:革兰阴性球菌,单个或成双排列,无芽孢、无鞭毛,有菌毛。
- 触酶试验(+)、氧化酶试验(+)。
- 本属有脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9种,致病菌为脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌。
第2页:脑膜炎奈瑟菌
脑膜炎奈瑟菌:是引起流行性脑脊髓膜炎的病原菌。
第3页:脑膜炎奈瑟菌电镜图
电镜下可见脑膜炎奈瑟菌呈肾形、成双排列,新分离菌株表面可见菌毛与荚膜。
第4页:脑膜炎奈瑟菌形态染色
- 革兰阴性,肾形,成双排列。
- 新分离菌株有菌毛和荚膜。
- 在患者脑脊液中位于中性粒细胞内。
第5页:脑膜炎奈瑟菌培养特性
- 营养要求高:在血液、血清培养基中才能生长。
- 专性需氧:初次分离需5%CO2。
- 最适温度35℃,低于30℃或高于40℃不生长。
- 可产生自溶酶。
第6页:常用培养基及生长现象
- 巧克力色血平板(营养培养基)
- 菌落无色、光滑湿润、边缘整齐、有光泽,似露水珠,易乳化。
- 卵黄双抗平板EPV(选择平板)
- 用于含杂菌的鼻咽拭标本的分离培养,菌落无色、光滑湿润、较大、扁平。
第7页:脑膜炎奈瑟菌生化反应
第8页:抗原构造与分型
- 菌体抗原
- 无特异性。
- 核蛋白抗原
- 无特异性,与细菌毒力有关。
- 表面荚膜多糖抗原
- 具有群特异性,据此将该菌分为13个血清群;我国以A群为主,占95%。
第9页:脑膜炎奈瑟菌抵抗力
- 抵抗力弱。
- 对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感。
- 能产生自溶酶。
第10页:脑膜炎奈瑟菌临床意义
- 传染源
- 病人、带菌者。
- 传染途径
- 呼吸道飞沫传染。
- 致病物质
- 内毒素、荚膜、菌毛。
- 所致疾病
- 流行性脑脊髓膜炎,表现为上呼吸道症状(鼻咽炎等)、全身感染症状(高热、出血点或瘀血点)与脑膜炎症状(头痛、呕吐、颈项强直)。
- 特异性预防
- 接种脑膜炎奈瑟菌荚膜多糖疫苗。
第11页:脑膜炎奈瑟菌微生物检验
微生物检验:本节讲述脑膜炎奈瑟菌的标本采集、检验程序与鉴定方法。
第12页:脑膜炎奈瑟菌标本采集
- 流脑病人:血液、脑脊液、瘀血点。
- 带菌者检查:鼻咽拭。
第13页:脑膜炎奈瑟菌检验程序
检验程序:脑脊液、瘀血点做直接涂片染色;血液经增菌培养后转种分离培养;鼻咽拭子直接分离培养。
- 分离培养:巧克力色平板(血液、脑脊液)或卵黄双抗平板(鼻咽拭子)。
- 可疑菌落:涂片染色、生化反应、生长特性、血清学分群。
- 可疑菌落盐水自凝者报告阴性,无自凝者作初步报告。
第14页:脑脊液与瘀血点直接涂片镜检
直接涂片镜检:取脑脊液沉淀物、瘀血点涂片,革兰染色镜检。若发现中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌、呈肾形,可作初步诊断。
第15页:脑膜炎奈瑟菌培养检查
- 增菌培养:血液、脑脊液接种增菌液,5%CO2培养。
- 分离培养:将增菌培养物转种巧克力色平板,置5%CO2环境,35℃培养18~24小时。
- 可疑菌落:观察菌落特征,取可疑菌落涂片染色镜检,并作盐水自凝试验,盐水中无自凝。
第16页:脑膜炎奈瑟菌鉴定试验
- 形态染色:革兰阴性、肾形、成双排列。
- 氧化酶(+)、触酶(+)。
- 糖代谢试验:发酵葡萄糖、麦芽糖。
- 生长特性试验:生长温度、营养需求。
- 血清学鉴定与分群:可与相应诊断血清发生凝集。
第17页:脑膜炎奈瑟菌快速鉴定试验
- 荧光抗体法
- 直接法:荧光素-流脑抗体+待检物;间接法:流脑抗体+待检物+羊抗兔荧光抗体,均可见荧光。
- 间接血凝试验
- 流脑多糖抗原致敏红细胞+待检血清。
- 反向血凝试验
- 流脑抗体致敏红细胞+标本中可溶性流脑抗原。
第18页:脑膜炎奈瑟菌鉴定依据
- 形态染色:革兰阴性球菌,成双排列。
- 菌落典型:光滑型,易乳化,盐水中无自凝。
- 生化反应:氧化酶+,发酵葡萄糖、麦芽糖。
- 生长条件:普通培养基不生长。
- 血清学:与相应分群血清凝集。
原课件本页将触酶记为阴性,与本课件前述「触酶试验(+)」及奈瑟菌属共同特点不一致,奈瑟菌属触酶应为阳性,此处以属的共同特征为准。
第19页:与卡他布兰汉菌鉴别
- 形态与奈瑟菌相似。
- 18~24℃环境能生长。
- 普通培养基中可以生长。
- 具有DNA酶。
第20页:淋病奈瑟菌
淋病奈瑟菌:奈瑟菌属的另一个致病菌种,本节讲述其生物学性状、临床意义与微生物学检验。
第21页:淋病奈瑟菌形态染色
- 革兰阴性,肾形,成双排列,有荚膜、菌毛。
- 淋球菌多侵犯尿道粘膜,急性期常位于中性粒细胞内,慢性期则多在细胞外。
- 根据菌毛分型:T1~T5;T1、T2有菌毛,T3、T4、T5无菌毛。
第22页:淋球菌革兰染色图
分泌物涂片革兰染色镜检,可见中性粒细胞内革兰阴性双球菌,呈肾形、成双排列。
第23页:淋病奈瑟菌生长条件
- 营养要求高。
- 专性需氧。
- 需5~10%CO2。
- 低于30℃或高于36.5℃不生长。
第24页:淋病奈瑟菌培养基与菌落
- 巧克力色培养基
- 圆形、光滑、湿润、灰白色、易乳化的菌落。
- TM培养基
- 含万古霉素、多粘菌素、制霉菌素的选择培养基。
- MTM培养基
- 改良的TM培养基。
第25页:淋病奈瑟菌生化反应
- 氧化酶、触酶:+。
- 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖:+、-、-(仅分解葡萄糖)。
- 30%H2O2试验:+。
第26页:淋病奈瑟菌抵抗力
- 抵抗力极弱。
- 对温度变化敏感。
- 对干燥敏感。
- 对消毒剂敏感。
- 易形成耐药性。
第27页:淋病奈瑟菌临床意义
- 致病物质
- 菌毛、IgA蛋白酶。
- 所致疾病
- 性接触引起淋病;产道感染引起新生儿淋病性眼结膜炎。
第28页:淋病奈瑟菌标本采集
- 正确取材:女性病人标本取宫颈内膜分泌物。
- 男性病人标本取尿道口脓性分泌物。
第29页:淋病奈瑟菌检验程序
检验程序:分泌物标本分别作直接涂片染色与分离培养。
- 直接涂片染色:镜下观察革兰阴性双球菌的形态与位置。
- 分离培养:取可疑菌落作涂片染色、生化反应与生长特性观察。
- 综合上述结果发出初步报告。
第30页:分泌物直接涂片
直接涂片:分泌物涂片做革兰染色,急性炎症期中性粒细胞内可见革兰阴性双球菌。
- 阳性率:男性90%、女性50%~60%。
- 无症状淋病或轻症患者,尤其是女性,检出率低,只做涂片可漏诊40%以上。
第31页:淋病奈瑟菌培养检查
- 取材部位准确。
- 培养基预温,立即接种,最好床边接种。
- 选用合适的培养基,CO2环境培养。
- 取氧化酶阳性菌落做下一步鉴定。
第32页:淋病奈瑟菌鉴定试验
- 氧化酶试验。
- 糖分解试验(葡萄糖、麦芽糖、蔗糖)。
- 30%过氧化氢试验。
第33页:淋病奈瑟菌药敏试验
药敏试验:下表列出判定标准。
淋病奈瑟菌药敏试验纸片含药量与判定标准| 抗生素 | 纸片含药量 | 敏感(mm) | 中度敏感(mm) | 耐药(mm) |
|---|
| 青霉素 | 2.4μ(4U) | ≥30 | 20~29 | ≤19 |
|---|
| 壮观霉素 | 100μg | ≥18 | — | ≤14 |
|---|
| 头孢呋肟 | 10μg | ≥30 | 20~29 | ≤19 |
|---|
原课件壮观霉素未给出中度敏感区间,故该单元格以「—」占位。
第34页:淋病奈瑟菌鉴定依据
- 形态染色典型:革兰阴性球菌。
- 培养特性:光滑、湿润、易乳化菌落。
- 生化反应:氧化酶阳性、仅分解葡萄糖。